成纤维细胞生长因子-21[Arg^(59)]突变体基因的克隆及融合蛋白的表达与纯化

目的:对野生型成纤维细胞生长因子-21(FGF21)进行突变改造及表达与纯化,为后续蛋白质体外偶联(Pull-down)实验及建立人源肝癌裸鼠模型奠定基础。方法:采用PCR定点突变方法,将FGF21cDNA第59位赖氨酸密码子突变为精氨酸密码子,所得的突变体片段与SUMO分子伴侣相连后插入表达载体pET20b,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。对表达产物进行Ni-NTA柱亲和层析、酶切和除盐等纯化分析。结果:PCR扩增出约546bp的特异性片段,测序分析表明已成功引入突变;所构建的pET20b-SUMO-FGF21[Arg59]重组阳性克隆经PCR与双酶切鉴定及测序分析,与预期结果一致;SDS-PAGE显示表达产物相对分子质量约31500,且为可溶性;Western blotting分析证实:纯化后产物是成熟的FGF21[Arg59]突变体蛋白。结论:成功构建FGF21[Arg59]突变体基因,并经表达纯化得到成熟的FGF21[Arg59]突变体蛋白。

钨系列多金属氧酸哌啶配合物的合成

首次合成了2种新型有机-无机电荷转移配合物:(C5H10NH2)4S iW12O40,(C5H10NH2)4GeW12O40.并通过元素分析、红外光谱对新合成的化合物进行表征.红外数据表明,多阴离子仍保持原来的Keggin结构,其特征吸收峰有一定的红移或蓝移,说明哌啶分子与多阴离子之间有较强的相互作用.

基于单片机的居家安全检测报警系统的设计

本文介绍了一种基于单片机的居家安全检测报警系统,详细阐述了系统的组成结构、硬件设计和软件设计。该系统选用多种传感器采集家居信息,A/D转换处理采集信号,采用单片机作为主控制器,利用报警电路实现安全报警,GSM短信模块来发送短消息提示住户,从而实现对家居安全的监控。系统结构简单,安装调试容易、使用方便。

水稻重要农艺性状调控基因及其育种利用研究进展

水稻是我国三大主要粮食作物之一,也是保证我国口粮绝对安全的必保品种之一,具有极高的生产价值。随着分子标记、转基因等技术的快速发展,越来越多的科研工作者将研究方向聚焦到水稻高产、高抗、营养高效等优异农艺性状基因的克隆和功能鉴定上来,并在此基础上利用分子育种技术对目标性状进行定向改良,以获得综合性状优良的水稻品种。相对于传统杂交育种技术,分子育种技术在水稻中的应用可以打破物种间的生殖隔离,缩短育种时间,使水稻性状的改良更加精准、多样化。综述了水稻营养高效利用、激素、生物胁迫、非生物胁迫、产量与品质等调控基因的最新研究进展,并对未来水稻研究发展方向进行了展望,旨在为我国水稻研究提供有益参考。

浅谈金矿地质找矿勘查技术的趋势与发展

在当前社会经济稳定增长背景下,对于矿产资源需求度越来越高,对于新时期的地质勘查工作提出了更高的要求。在矿产开采工作持续深化下,矿物资源短缺问题愈加严重,为了可以提升资源开采效率,迫切需要研发新式的矿物勘查技术和方法,以此来满足实际工作需求。但是,当前金矿地质找矿勘查工作中还存在很多的不足,勘查技术水平滞后有待进一步创新。本文就金矿地质找矿勘查技术发展趋势进行分析,针对其中的问题提出有效对策,以求提升勘查工作质量。

内质网应激对3T3-L1脂肪细胞成纤维细胞生长因子21 mRNA表达的调节作用

目的在m RNA水平探讨内质网应激对3T3-L1脂肪细胞成纤维细胞生长因子21表达的影响。方法利用经典鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,再用毒胡萝卜内酯分别按照剂量梯度(0、6.25、12.5、25、50和100 nmol/L)和时间梯度(0、1、3、6和12 h)进行处理,实时PCR检测内质网应激相关蛋白C/EBP同源蛋白和葡萄糖调节蛋白78以及成纤维细胞生长因子21 m RNA的表达水平。结果毒胡萝卜内酯能诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞发生内质网应激,促进C/EBP同源蛋白、葡萄糖调节蛋白78和成纤维细胞生长因子21 m RNA水平显著升高,且与毒胡萝卜内酯的剂量和处理时间呈正相关。当用100 nmol/L毒胡萝卜内酯处理6 h后,成纤维细胞生长因子21 m RNA水平显著增高,为对照组的114.55倍(P<0.05)。蛋白激酶C抑制剂钙磷酸蛋白C能阻断由毒胡萝卜内酯诱导的内质网应激,并伴随成纤维细胞生长因子21 m RNA水平的下降。结论内质网应激能上调3T3-L1脂肪细胞成纤维细胞生长因子21 m RNA表达,且可被蛋白激酶C抑制剂钙磷酸蛋白C阻断。

纳岭沟地区测井参数和测井相分析

通过对纳岭沟地区伽马、综合测井等参数的研究分析,加强地层物性参数特征对比,总结该地区各地层不同岩性的不同参数变化规律和曲线形态,能够较准确划分岩性、确定标识性岩性位置、进一步研究测井相和地层放射性特征;目的层直罗组下段为辫状河沉积,直罗组上段为曲流河沉积,直罗组内部不同岩性依据三侧向电阻率和密度值可以进行准确识别与划分。为该地区铀矿地质工作从事生产实践、提高工作效率提供具指导性的参数数据,为进一步铀矿找矿工作打下基础。

人表皮生长因子融合蛋白的表达及纯化工艺的优化

探讨了在大肠杆菌中生产小分子泛素样修饰蛋白与人表皮生长因子(SUMO-hEGF)的最佳表达及纯化条件。将重组表达载体pET3c-SUMO-hEGF转化到大肠杆菌BL21(AI)中,以阿拉伯糖为诱导剂,对诱导表达参数进行优化,并进一步通过离子交换层析,Ni-NTA亲和层析及分子筛层析等进行纯化分析。结果表明:SUMO-hEGF在BL21(AI)中的最佳诱导表达温度为37℃,诱导剂阿拉伯糖的最佳浓度为5.0g/L,最佳诱导表达时间为4h,表达量约为20.2%,Western blot分析证实,纯化后的蛋白是hEGF,为进一步开发hEGF基因工程药物奠定了基础。