呼吸道合胞病毒在儿童急性呼吸道感染中的临床分析

目的分析呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)在儿童急性呼吸道感染中的临床特征,为及早做好预防措施和对症治疗提供理论和实践依据。方法选取银川市妇幼保健院2017年11月至2018年11月因急性呼吸道感染就诊治疗的765例患儿为研究对象,采集患儿上呼吸道分泌物,用多重聚合酶连锁反应(polymerase chain reaction,PCR)法及核酸电泳分别检测样本的多种病毒感染情况,结合患儿的临床资料,从发病年龄、临床症状、实验室指标、病毒共感染及细菌共感染情况等多方面分析RSV感染的临床特征。结果 765例标本中共检出RSV阳性标本204例,阳性检出率为26.7%,不同性别间RSV检出率差异无统计学意义(P>0.05);RSV感染组住院天数长于非RSV感染组(P<0.05);RSV感染主要发生在2岁以下婴幼儿(占55.9%);与非RSV感染组相比,RSV感染组发热症状严重(P<0.01),而咳嗽、喘憋、咽部充血、有无喘鸣音、肺部啰音、呼吸困难的临床症状差异均无统计学意义(P均>0.05)。实验室指标分析中,RSV感染者与非RSV感染者白细胞计数、血红蛋白、乳酸脱氢酶含量、谷草转氨酶、谷丙转氨酶含量差异均无统计学意义(P均>0.05)。204例RSV阳性标本中,42例(20.6%)为RSV单独感染,117例(57.4%)至少混合一种其他呼吸道病毒感染,41例(20.1%)既混合细菌感染又混合其他病毒感染,4例(2.0%)混合其他细菌感染;与RSV发生混合感染的病毒以鼻病毒常见(58.2%),混合感染的细菌以大肠埃希菌(24.4%)、肺炎克雷伯杆菌(22.2%)、金黄色葡萄球菌(15.6%)常见。RSV与其他病毒混合感染后,更易发生咳嗽,血红蛋白指标升高(P均<0.05);RSV与细菌混合感染后,更易出现肺部啰音,呼吸频率加快,谷草转氨酶升高(P均<0.05)。结论 RSV是婴幼儿急性呼吸道感染的重要病原体,临床症状主要有咳嗽、发热,常与其他病毒、细菌发生混合感染,需要通过预防和隔离来避免交叉感染。

犬博卡病毒结构蛋白VP1多克隆抗体的制备及特异性鉴定

为深入研究犬博卡病毒(MVC)结构蛋白VP1及其抗体在MVC感染及致病分子机制中的作用,本研究以先期构建的MVC感染性克隆载体pI-MVC为模板,构建VP1结构蛋白(独特区)原核表达载体pET32a(+)-VP1N,转化于大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达后进行蛋白可溶性分析;用镍柱亲和层析法纯化诱导表达产物,以纯化的VP1N融合蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,获得特异性抗VP1N多克隆抗体;通过ELISA的方法测定VP1N多克隆抗体效价,并采用Western blot和免疫荧光鉴定VP1N抗体的特异性。结果表明:重组蛋白VP1N可高效可溶性表达,分子量约为34 kDa;VP1N融合蛋白免疫兔后,ELISA法测定VP1N多抗效价达1∶1600 000;Western blot结果显示,VP1N多克隆抗体能够与MVC感染靶细胞后的天然VP1蛋白反应;细胞免疫荧光结果显示,该抗体也可与MVC感染WRD细胞中的天然VP1蛋白反应,且发现VP1大量分布于WRD细胞的胞核中。本研究所制备的VP1N抗体具有很好的反应性和特异性,为进一步深入研究VP1蛋白在博卡病毒致病性及感染机制中的研究提供实验基础。