不同烘烤工艺对烟叶淀粉含量及淀粉酶活性的影响

为降低初烤烟叶中淀粉的含量(质量分数,下同),以现行工艺为对照(CK),采用低温高湿延时(W)、外加纤维素酶烘烤(M)和高温诱导酶预激活烘烤工艺(BK)进行了对比试验,用碘显色法测定淀粉含量,用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定淀粉酶活性。结果表明:1烘烤后,CK,W,M,BK 4种烘烤工艺烤烟烟叶中淀粉的含量分别为6.54%,6.06%,5.08%和3.13%。2鲜烟叶淀粉酶活性为0.25 U,CK工艺中,烘烤3 h后淀粉酶活性为0.31 U;在BK工艺中,高温预处理后淀粉酶活性为0.49 U,全程呈双峰型。高温诱导酶预激活烘烤工艺可为降低烟叶淀粉含量和提高烟叶品质提供方法参考。

大鼠成熟的肺表面活性蛋白B的原核表达及纯化

为表达和纯化SP-B蛋白,先对SP-B基因进行稀有密码子优化,PCR反应获得SP-B片段,构建重组质粒pGEX4T-1/SP-B,转化到E.coli BL21(DE3)中诱导表达;用SDS-PAGE与Western blot进行检测;用GSTPrep FF 16/10对融合蛋白进行纯化。经双酶切鉴定证实质粒中插入基因长250bp,测序结果与大鼠SP-B cDNA序列相符;质粒转化后用IPTG进行诱导,在分子质量约34ku处出现1个新条带,与pGEX4T-1/SP-B蛋白预期大小一致,且该融合蛋白能可溶性表达并被纯化。结果表明成功构建了pGEX4T-1/SP-B重组质粒,表达、纯化得到GST/SP-B蛋白,为研究肺表面活性物质替代药物奠定了基础。

R2工程细菌纤维素酶酶活影响条件初探

以3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定纤维素酶活力,研究了不同浓度的表面活性剂(Tween 80)、不同缓冲液、不同pH对R2工程细菌纤维素酶酶活的影响。结果表明,在35℃、Tween 80浓度为1.6%、醋酸-醋酸钠缓冲液pH 4.8的条件下纤维素酶酶活最高,是对照的1.47倍。

BCA-TCA法快速测定烟草蛋白质的研究

为快速准确地测定烟草中的蛋白质含量,建立并优化了BCA-TCA法,即提取烟叶蛋白质的最佳体系条件为pH值7.0的0.05 mol/L PBS缓冲液、液料比40 m L/g,使用TCA沉淀蛋白质,利用差减法去除烟叶中还原性物质对BCA方法准确性的影响,从而准确测定样品的蛋白质含量。结果表明:该方法测得的烟叶样品蛋白质含量变异系数小于5%,重复性较好;样品的加标回收率为96.39%,加标回收变异系数为0.75%<2%,准确度高;BCA-TCA法和克达尔法测定值的t检验结果为t=1.554 5<t_(0.05),8=2.306,说明2种方法在95%的置信区间内无显著差异,但建立的BCATCA法将耗时缩短至2.5~3.5 h,且操作步骤简捷、所用设备简单。可见,建立的BCA-TCA法能够快速准确地测定烟草中的蛋白质含量。

抗红色毛癣菌药物靶标研究进展

红色毛癣菌是引起皮肤癣菌病的主要致病菌,现有治疗药物多以酶、核酸及化学键作为抗红色毛癣菌药物靶标,尤其是以真菌细胞膜合成途径中的酶为"药靶"发现的新型酶抑制剂具有良好的开发应用。作为抗真菌剂关键特异性代谢的另一个重要途径——细胞壁生物合成途径,其药物靶标的研究和开发却并不理想。根据现有药物靶标,设计和合成新的抗真菌药物以及其衍生药物,运用现代生物技术发现新的药物靶标,对临床治疗皮肤癣菌引起的浅部真菌病有重要的意义。

CBS对红色毛癣菌的抗菌及协同增效作用研究

目的:研究荧光增白剂CBS(flourescent brightener CBS,CBS)对红色毛癣菌的抗菌作用,以及联合使用酮康唑和特比萘芬的增效作用。方法:采用滤纸片扩散法,探究CBS对红色毛癣菌的单一抗菌作用;采用MTT法探究CBS联合酮康唑、特比萘芬对红色毛癣菌的协同抗菌作用;然后采用均匀设计方法结合SPSS软件建立模拟方程,并通过验证试验确定最优配方;用豚鼠构建红色毛癣菌感染的动物模型,评价最优配方的实际药用效果。结果:酮康唑、特比萘芬联合CBS均对其存在协同作用。均匀设计得到最优配方是CBS浓度为1.861 mg·mL^(-1),酮康唑浓度为1.5μg·mL^(-1),特比萘芬浓度为0.175μg·mL^(-1),SDS浓度为0.077 4 mg·mL^(-1),氮酮浓度为6 mg·mL^(-1)时,理论最大抑制率为75.34%。进行动物试验表明联合药物比单一药物平均缩短了6 d的治疗时间。结论:CBS对红色毛癣菌有抗菌作用,联合酮康唑和特比萘芬对红色毛癣菌具有协同增效作用。

响应面法优化小球藻中叶绿素盐的超声波制取工艺

在单因素试验基础上,选取乙醇体积分数、超声波处理时间,皂化时间为自变量,叶绿素铜钠盐制取量为响应值,利用Box-Benhnken响应曲面分析法,研究各自变量及其交互作用对制取量的影响,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型。确定最佳制取工艺条件为:乙醇体积分数为60%,超声波处理时间为17 min,皂化时间为42 min,叶绿素制取预测值为8.7 mg,验证值为8.4 mg,相对误差为3.45%。此研究结果对利用小球藻制取叶绿素铜钠盐具有一定的实践指导意义。