miRNA-141、miRNA-145在非小细胞肺癌中的表达及与临床病理的关系

目的通过检测miRNA-141、miRNA-145在非小细胞肺癌中的表达,探讨其与非小细胞肺癌临床病理的关系。方法采用Real time-PCR法对48例非小细胞肺癌组织及正常肺组织的miRNA-141、miRNA-145进行定量分析,结果由2(-△△CT)处理,并分析与临床病理资料的关系。结果 1NSCLC患者肿瘤组织中miRNA-141表达水平明显升高,而且其表达与临床分期、病理类型显著相关(P<0.05),miRNA-141在鳞癌患者肿瘤组织表达高于腺癌(P<0.05),而在不同年龄、性别、肿瘤大小患者间差异无统计学意义(P>0.05)。2NSCLC患者肿瘤组织中miRNA-145表达水平明显下降,而且其表达与临床分期、病理类型显著相关(P<0.05),miRNA-145在腺癌患者肿瘤组织表达低于鳞癌(P<0.05),而在不同年龄、性别、肿瘤大小患者间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miRNA-141高表达及miRNA-145低表达与非小细胞肺癌的临床分期、病理分级密切相关,miRNA-141、miRNA145有可能作为非小细胞肺癌的重要肿瘤标志物。

miR-19a和miR-19b在非小细胞肺癌中的表达

目的通过检测非小细胞肺癌患者癌组织和血清中miR-19a、miR-19b的表达水平,探讨其与临床病理参数的关系和作为肿瘤分子标志物的可能性。方法采用实时荧光定量PCR技术检测正常人和非小细胞肺癌患者血清,以及非小细胞肺癌组织和癌旁组织中miR-19a、miR-19b的表达,分析miR-19a、miR-19b的表达与非小细胞肺癌临床病理参数的关系。采用ROC曲线分析miR-19a、miR-19b对非小细胞肺癌的诊断价值。结果 miR-19a、miR-19b在癌组织中的表达量明显高于癌旁正常组织(P<0.05);miR-19a、miR-19b在NSCLC血清中的浓度显著高于对照组。miR-19a的ROC曲线下面积0.989,灵敏度95.1,特异度94.0;miR-19b的ROC曲线下面积0.983,灵敏度93.4,特异度94.0。结论非小细胞肺癌患者癌组织和血清miR-19a、miR-19b高表达,miR-19a、miR-19b有望作为NSCLC诊断及预后评价的检测指标。

腹腔镜与经腹宫颈癌根治术154例临床观察

目的:通过对腹腔镜下宫颈癌根治术(laparoscopic radical hysterectomy,LRH)与传统经腹宫颈癌根治术(abdominal radical hysterectomy,ARH)的术中、术后评价主要指标进行对比分析,探讨腹腔镜与经腹手术治疗宫颈癌的可行性、安全性、近期疗效及临床应用价值。方法:回顾性分析在我院行手术治疗的宫颈癌患者154例,其中92例接受腹腔镜广泛子宫切除及盆腔淋巴结清扫术(LRH组),62例接受开腹广泛全子宫切除及盆腔淋巴结清扫术(ARH组),进行临床相关指标的对比分析。结果:LRH组手术时间及淋巴结清扫数目和ARH组相当,出血量LRH组明显少于ARH组,有显著性差异(P<0.05);LRH组和ARH组术后相比,肛门排气时间早,第10天拔除留置导尿管成功率高,有显著性差异(P<0.05)。结论:LRH能完全达到开腹手术的要求,手术创伤小、恢复快,临床疗效明显优于开腹手术,对早期宫颈癌的手术近期疗效具有显著的优越性。

胸腔镜微创手术与传统开胸手术治疗纵隔肿瘤效果比较

目的:比较胸腔镜微创手术与传统开胸手术治疗纵隔肿瘤的疗效。方法:对22例行胸腔镜微创手术和20例传统开胸手术治疗纵隔肿瘤的治疗效果进行比较。结果:两组患者手术顺利,治愈出院,无手术死亡。胸腔镜微创手术组手术时间、术后胸管引流时间、术后镇痛药物使用时间、术后住院时间均比传统开胸组短(P<0.05),胸腔镜组术中出血量比传统开胸组少(P<0.01),胸腔镜组术后并发症发生率低于传统开胸组,住院费用略高于传统开胸组,但差异比较无统计学意义(P>0.05),术后随访1-2年,无局部复发。结论:胸腔镜微创手术治疗纵隔肿瘤创伤小、手术时间短、出血少、术后恢复快,住院费用及疗效与传统开胸手术无明显差别,是纵隔肿瘤的重要治疗方法。

微信结合多元化教学法在八年制临床医学专业妇产科学教学中的应用评价

目的探讨应用以微信平台为基础结合多元化教学法在八年制临床医学专业妇产科学教学中的应用及效果。方法选择第四军医大学2016年5~7月2012级及2017年5~7月2013级八年制临床医学专业学生作为研究对象,2013级为实验组(20名),采用以微信平台为基础结合多元化教学方法;2012级为对照组(21名),采用传统教学方法。教学结束后对学生采用问卷调查及考试进行综合评估。结果实验组理论知识成绩、病例分析题及综合成绩均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组的学生普遍认为以微信平台为基础结合多元化教学模式能够激发学习兴趣,提高学习效率,促进教学内容的掌握,并增加师生间的沟通互动,能接受该教学模式。结论以微信平台为基础结合多元化教学法引入八年制妇产科学教学实践中,能够充分激发学生学习兴趣,突破传统课堂限制,加深知识理解,强化自学能力,有效提升教学效果。

纵隔留置引流管对治疗食管癌术后胸内吻合口瘘的临床价值

目的探讨食管癌根治术中留置纵隔引流管对发生术后吻合口瘘的治疗作用。方法回顾性分析2012年1月—2016年12月西安交通大学第二附属医院胸外科行食管癌根治性切除手术后发生吻合口瘘的患者45例,采用经左胸(Sweet)或上腹右胸(Ivor-lewis)术式,吻合口均位于胸腔内。其中放置常规胸腔闭式引流管后关胸(对照组)22例,放置常规胸腔闭式引流管后再于食管床放置纵隔引流管(研究组)23例。比较2组患者吻合口瘘确诊时间、术后平均最高体温、平均白细胞计数峰值、治愈时间、心肺并发症、病死率以及预后随访吻合口狭窄等情况。结果研究组术后吻合口瘘确诊时间组早于对照组(t=3.834,P<0.01),且纵隔引流管的引流量约占胸腔总引流量的70%[胸腔总引流量(753.6±136.4)ml,纵隔引流量(536.8±108.3)ml];研究组术后平均最高体温、平均白细胞计数峰值低于对照组(t=8.965、6.185,P<0.01),吻合口瘘治愈时间明显短于对照组,且其之间差异具有统计学意义(t=11.237,P<0.01)。术后对侧胸腔积液行穿刺引流例数少于对照组(χ~2=2.522,P<0.05),术后心肺并发症发生率病死率低于对照组(χ~2=2.741、1.755,P<0.05),但2组患者出院后6个月吻合口狭窄率之间比较,差异无统计学意义(χ~2=0.897,P>0.05)。结论术中放置纵隔引流管有助于早期发现吻合口瘘、更好地通畅术后胸腔引流、降低对侧胸腔积液发生率、减轻术后全身炎性反应症状、减少心肺并发症的发生、缩短吻合口瘘的治愈时间、降低吻合口瘘所致病死率,值得临床推广使用,但对术后出现吻合口狭窄与否无明显影响。

激光捕获显微切割联合SELDI蛋白质芯片筛选肺腺癌早期诊断标志蛋白

目的探讨应用激光显微切割(LCM)联合表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱蛋白质芯片(SEL-DI-TOF-MS)及模式识别分类技术—支持向量机(SVM)筛选肺腺癌标志蛋白的可行性。方法将6例新鲜肺腺癌组织标本及其配对的4例正常肺组织制备8μm厚度冰冻切片;改良HE染色;用LCM技术选择性获取同质腺癌细胞和配对正常肺组织细胞。应用PBSⅡ+型SELDI-TOF-MS分析仪(IMAC芯片)分析腺癌及其配对正常细胞的蛋白质表达谱,比对差异点;应用SVM筛选并验证候选标志蛋白的判别效能。结果平均每个LCM帽子的激光点数约4000shots,获得了同质性>95%的肿瘤细胞和正常细胞。比较腺癌和配对正常细胞之间的SELDI谱图,共筛选出84个蛋白峰。将差异最明显的10个蛋白峰作为候选标志蛋白。和正常组织相比,6种蛋白在腺癌中呈低表达,4种蛋白在腺癌中呈高表达,差异有统计学意义(P<0.05)。初步筛选出3191m/z蛋白峰作为腺癌诊断标志蛋白。结论LCM联合SELDI蛋白质芯片技术有可能筛选出敏感性高、特异性强的肺腺癌标志蛋白;该技术将为肺腺癌早期诊断研究提供新的强有力的工具。

碘-125内照射粒子支架治疗中晚期食管癌的疗效研究

目的:探讨捆绑碘-125内照射粒子的食管支架在治疗中晚期食管癌中的临床应用和疗效。方法:35例食管癌患者分为两组,A组放置普通自膨支架,B组放置捆绑碘-125粒子的支架进行治疗,术后随访并发症、治疗效果及生存期。结果:35例患者支架置入过程顺利,位置合适,术后吞咽困难症状明显改善,连续随访未出现穿孔、出血、移位等并发症,生活质量良好,普通支架组平均生存期为120d,碘-125粒子支架组平均生存期为370d,明显高于普通支架组(P<0.001),2组术后血象和体重改变无显著性差异(P>0.05)。结论:捆绑碘-125内照射粒子的食管支架置入可明显改善中晚期食管癌患者的吞咽困难症状,同时对肿瘤行组织间放疗治疗,提高患者生存质量,延长生存期,疗效明显优于普通支架,且安全可靠。

单操作孔胸腔镜下微创治疗纵隔肿瘤22例体会

目的:分析单操作孔胸腔镜下微创治疗纵隔肿瘤的临床效果。方法:对22例行胸腔镜手术的纵隔肿瘤患者相关资料进行回顾分析。结果:22例均完全在胸腔镜下完成手术,16例在单孔操作下完成,6例因游离困难加开副操作孔,手术时间30-110min,平均65min;术中出血30-200ml,平均100ml;术后胸管引流时间2-4天,平均3天;术后住院时间5-8天,平均6.5天。均顺利恢复出院,无术后出血、气胸、感染、肺不张等并发症。随访1-20个月,未有局部复发。结论:单操作孔胸腔镜下切除纵隔肿瘤可达到双操作孔的手术效果,进一步减少手术创伤,加快术后恢复,可在临床上加以推广应用。

非小细胞肺癌血清miR-197和miR-203的表达及意义

目的：检测外周血清miR-197、miR-203在非小细胞肺癌的表达及对非小细胞肺癌诊断的意义。方法：采用实时荧光定量PCR检测80例正常人和80例非小细胞肺癌患者血清中miR-197、miR-203的表达量,绘制ROC曲线分析其诊断非小细胞肺癌的价值。结果：miR-197和miR-203在NSCLC血清中均高表达,miR-197在两组中表达有差异[（4.23±0.38）vs（1.25±0.24）,P〈0.05],miR-203在两组中表达有差异[（3.32±0.21）vs（1.32±0.42）,P〈0.05]。miR-197诊断非小细胞肺癌的AUC值为0.83（95%CI：0.68-0.93）,而miR-203则为0.76（95%CI：0.60-0.87）。联合miR-197与miR-203诊断非小细胞肺癌的AUC值提高至0.93（95%CI：0.70-0.98）。结论：非小细胞肺癌外周血中miR-197、miR-203呈高表达,与NSCLC临床TNM分期、淋巴结转移关系密切。ROC曲线分析显示联合检测miR-197、miR-203特异度及灵敏度均可达90%,有望作为诊断NSCLC的潜在分子标志物。

子宫内膜异位症:终生管理与降阶梯治疗

子宫内膜异位症是育龄妇女的常见病,更是典型的慢性病。其发病、病情进展或复发、转归等与卵巢功能密切相关。因此,抑制或终止卵巢功能是目前治疗子宫内膜异位症最有效的手段之一。但对年轻及/或有生育要求的子宫内膜异位症患者而言,保护卵巢及生育功能是子宫内膜异位症治疗中难以回避的问题。如何有效地治疗子宫内膜异位症、控制病变活动、减少延缓复发,实现慢性病长期管理,同时保护好患者的卵巢功能及生育能力。现实的要求迫使子宫内膜异位症治疗在抑制和保护卵巢功能的左右摇摆中前行。本文提出"降阶梯治疗"概念及长期管理的策略,并就实现"长期或终生管理"理念作一简要设想和分析。

小细胞肺癌及其配对的正常肺组织差异表达蛋白质的双相电泳-飞行时间质谱研究

目的应用比较蛋白质组学方法分析小细胞肺癌(SCLC)与其配对的正常肺组织差异表达蛋白质,为阐明SCLC发病机制、筛选其早期诊断标志物提供有益的思路。方法应用双相电泳(2-DE)分离6例SCLC及其配对的正常肺组织可溶性总蛋白;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)获得差异蛋白点的肽质量指纹图谱(PMF);通过Mascot软件查询NCBI或SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质。结果每张图谱约检测到800多个蛋白质点。经匹配分析,肺癌组织之间和正常肺组织之间凝胶图像的匹配率分别为75.5%和78.2%;选择14个背景清晰、重复性及分辨率较好、蛋白表达差异明显的点进行质谱分析,结合表观分子量及等电点(pI),初步鉴定了11种(六类)蛋白质:①与蛋白质降解通路有关的蛋白质:蛋白酶体α亚单位3型、蛋白酶体β亚单位2型及β亚单位5型;②自由基/抗氧化剂类:锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和黄素还原酶(FR);③细胞骨架类:原肌球蛋白-3(Tpm-3);④与能量代谢有关的蛋白质:硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX1);⑤分子伴侣:抑制素(PHB),内质网蛋白ER29(Erp29);⑥其他:可溶性NSF黏附蛋白(alpha SNAP)。结论应用2-DE及MALDI-TOF-MS方法分离并初步鉴定了11种(六类)蛋白质;这些蛋白质与SCLC发生发展密切相关,部分可能成为SCLC诊断及治疗的分子靶点。

镍钛记忆合金治疗创伤性连枷胸的临床效果及对骨形态发生蛋白和炎性因子水平的影响

目的观察镍钛记忆合金治疗创伤性连枷胸的临床效果及对骨形态发生蛋白(BMP)和炎性因子水平的影响。方法选取2016年8月至2018年8月西安交通大学第二附属医院诊治的创伤性连枷胸患者120例为研究对象。完全随机分为对照组和观察组,各60例。对照组患者采用常规的非手术治疗,胸壁用多头肋骨带及厚棉垫加压固定;观察组患者进行镍钛记忆合金环抱器内固定术治疗。观察2组患者的临床治疗效果及治疗前后BMP和炎性因子水平的变化,比较并发症发生情况。结果观察组机械通气时间、胸腔引流管拔管时间及住院时间均明显短于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。治疗后,2组血清中BMP-2、BMP-7及BMP-14水平均较治疗前明显升高,且观察组高于对照组[(8.7±1.6)μg/L比(4.9±1.1)μg/L、(9.7±2.0)μg/L比(6.2±1.9)μg/L、(9.5±1.3)μg/L比(5.6±1.1)μg/L];2组白细胞介素2(IL-2)、IL-10及C反应蛋白水平均较治疗前明显降低,且观察组低于对照组[(39±5) ng/L比(45±4) ng/L、(35±9) ng/L比(40±6) ng/L、(12.1±2.8) mg/L比(18.4±5.4) mg/L],差异均有统计学意义(均P <0.05)。观察组并发症发生率明显低于对照组[23.3%(14/60)比63.3%(38/60)],差异有统计学意义(P <0.05)。结论镍钛记忆合金能有效治疗创伤性连枷胸,且安全性高,同时对异常的BMP及炎性因子有明显的恢复作用。

非小细胞肺癌组织miRNA-203表达及其与预后的关系

目的:探讨miRNA-203在非小细胞肺癌组织中的表达及其与预后的关系。方法:采用实时荧光定量PCR检测100例肺癌标本中miRNA-203的水平。分析miRNA-203表达与临床病理参数的关系;采用Kaplan-Meier法分析miRNA-203表达与非小细胞肺癌生存期(overall survival,OS)之间的关系。Cox风险比例模型分析各个协变量的联合效应。结果:miRNA-203的表达量与病理类型(P=0.026)相关,与性别(P=0.756)、年龄(P=0.280)及吸烟史(P=0.122)无明显关系;生存分析显示miRNA-203高表达组患者生存期显著低于低表达组(P=0.02)。Cox风险比例模型分析显示miRNA-203表达可作为非小细胞肺癌患者预后不良的标志。结论:miRNA-203的高表达提示非小细胞肺癌患者预后较差,是潜在的肺癌预后预测分子标志物。

双基因shRNA干扰乙酰肝素酶在卵巢癌细胞中表达的实验研究

目的：采用编码2条短发卡式RNA(shRNA)的抗乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)特异性载体干扰卵巢癌细胞中Hpa的表达,观察其对肿瘤生长转移的抑制作用。方法：以脂质体介导的方法将自行设计和构建的抗Hpa短发卡式RNA (Hpa-shRNA)基因真核表达载体稳定转染人卵巢癌细胞SKOV3；流武细胞仪鉴定转染效率,免疫组化和实时定量RT-PCR检测转染前后卵巢癌细胞中Hpa蛋白和mRNA表达,Boyden小室观测细胞增殖和侵袭能力的变化,透射电镜观察卵巢癌细胞超微结构改变。结果：Hpa mRNA表达在SKOV_3-Hpa(转染Hpa)明显升高(P＜0．01),SKOV3-Hpa-shRNA(转染Hpa- sh RNA)显著降低(P＜0．01),SKOV3-DZ-shRNA(转染非特异性sh RNA片段)和SKOV3无显著性差异(P＞0．05)。电镜下,SKOV3-Hpa组Hpa蛋白表达最为明显,SKOV3-Hpa-shRNA Hpa蛋白则最低,各组间比较差别有显著性意义(P＜0．01)。SKOV3-Hpa细胞器发达,细胞表面绒毛丰富,细胞间连接稀少。SKOV3-Hpa-shRNA以变形为主,细胞表面绒毛少,细胞器不发达,部分见线粒体皱缩,肿胀和空泡样改变。SKOV3-Hpa、SKOV3-DZ-shRNA和SKOV3-Hpa-shRNA 3种细胞穿过人工基底膜的细胞数分别为82．3±9．16,36．1±8．73和18．6±10．5,各组间比较有显著性差异(P＜0．01)。结论：双基因Hpa特异性shRNA可显著抑制卵巢癌细胞Hpa表达,降低细胞侵袭能力。

早期手术治疗重症胸外伤的临床研究

目的:探讨重症胸外伤合并胸壁软化早期手术内固定治疗的临床意义。方法:总结26例重症胸外伤早期手术内固定的临床救治经验。结果:26例患者全部存活,无1例死亡,效果满意。结论:重症胸外伤患者及时行手术内固定治疗,辅以呼吸机辅助呼吸,可大大改善患者的缺氧状况,避免气管切开,减少呼吸机辅助时间,明显缩短恢复期,并未加重肺损伤,增加致残率和病死率。

44例食管破裂患者的临床诊疗研究

目的探索不同病因及不同就诊时间食管破裂的最佳诊疗方法。方法总结分析医院胸外科44例食管破裂患者临床资料,其中食管异物26例,自发性食管破裂11例,外伤5例,医源性2例;36例患者行手术治疗,8例行保守治疗。手术采用I期缝合24例;胸膜粘连松解术+纵隔切开引流术+抗感染治疗13例;内镜取出+纵隔引流营养支持+抗感染6例,营养支持+抗感染1例。结果手术患者治愈34例,1例死于纵隔感染,1例死于胸腔内出血;保守治疗治愈6例,1例死于纵隔感染和多器官功能衰竭,1例死于纵隔感染和胸腔出血。结论食管破裂的主要原因是食管异物,以老人和儿童为主,大部分食管破裂可以避免;早期诊断、早期治疗是食管破裂治疗的关键;及时采取合适的手术方式是减少死亡的主要手段。

血清肿瘤标志物对SCLC和NSCLC的Fisher判别分析

目的:探讨血清肿瘤标志物对SCLC和NSCLC的鉴别诊断价值。方法:采用电化学发光免疫法检测25例患者血清中CEA、CYFRA21-1、NSE、CA125、CA199及SCCAg的水平;对NSCLC组和SCLC组间统计检验有差异(P<0.05)的血清肿瘤标志物用Fisher判别方法建立判别函数鉴别诊断模型;用该模型回代相应变量对SCLC和NSCLC进行预测分组,检验该判别函数模型的鉴别诊断效果。结果:6种血清肿瘤标志物在NSCLC组和SCLC组间有统计学差异(P<0.05)的变量分别是:CYFRA21-1、NSE和SCCAG;建立的判别函数鉴别诊断模型,在NSCLC组判别正确率89.87%,SCLC组判别正确率87.37%,两组合计判别正确率88.93%。结论:应用Fisher判别法对血清肿瘤标志物建立的判别函数鉴别诊断模型可简便、快速、有效地对NSCLC和SCLC进行鉴别诊断,值得临床借鉴。

非小细胞肺癌血清miR-191的表达及意义

目的:探讨血清miR-191对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的诊断价值及临床特征。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测65例非小细胞肺癌患者血清和65例健康人血清中miR-191的表达量,分析血清miR-191的表达与非小细胞肺癌临床病理参数的关系,通过绘制ROC曲线分析其诊断非小细胞肺癌的价值。结果:非小细胞肺癌患者血清miR-191相对表达水平高于正常对照组(P<0.05),其表达与临床分期、病理类型及淋巴结转移显著相关(P<0.05),而与性别、年龄及吸烟史无相关性(P>0.05);miR-191的ROC曲线下面积AUC=0.951,其诊断非小细胞肺癌的灵敏度为87.3%,特异度为92.3%。结论:血清miR-191测定的诊断性能较高,有望作为诊断非小细胞肺癌的潜在分子标志物。

siRNA靶向抑制PKR基因及其对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

目的研究siRNA(small interfering RNA,siRNA)对宫颈癌Hela细胞中双链RNA(dsRNA)激活的蛋白激酶(protein kinase regulated by dsRNA,PKR)基因的抑制作用,观察其对dsRNA诱导的细胞凋亡的影响。方法采用RNAi技术,对宫颈癌Hela细胞PKR基因进行特异性抑制;用阳离子脂质体与化学合成的Pre-designed anti-PKR siRNA构建转染复合体,反转染Hela细胞72h后提取总蛋白,用Western blot检测PKR蛋白表达水平的变化,用流式细胞仪检测细胞的凋亡率,激酶活性检测法测定半胱氨蛋白水解酶-3(caspase-3)活性变化。结果 siRNA能降低PKR基因的蛋白表达;未转染组的Hela细胞在加入dsRNA后,细胞凋亡明显增加,caspase-3激酶活性增强(P<0.05)。与对照组相比,转染组的Hela细胞在加入dsRNA后,细胞凋亡显著减少,caspase-3激酶活性降低(P<0.05)。结论 siRNA可特异有效地干扰宫颈癌Hela细胞内PKR基因的表达,从而影响肿瘤细胞凋亡。dsRNA可通过激活PKR,增强caspase-3激酶活性,而促进Hela细胞的凋亡。