77种植物提取物对植物病原菌的生长抑制作用

以稻瘟病菌(Pyricularia grisea),水稻恶苗病菌(Fusarium moniliforme),玉米大斑病菌(Exserohilum turci-cum)等12种植物病原菌为供试菌种,采用生长速率法对77种植物的95%乙醇提取物在200μg/mL下进行室内抑菌试验。结果表明有15种植物提取物对植物病原菌有抑制作用,其中华山姜、硬骨藤、龙舌兰、红蒜、大花哥纳香、海南草珊瑚对至少一种菌的抑制率在50%以上,版纳青梅、大果巴戟、华山姜等8种植物提取物对至少三种病原菌均有不同程度的抑制作用。红蒜提取物对百合炭疽病菌、海南草珊瑚提取物对番茄灰霉病菌,以及龙舌兰提取物对玉米大斑病菌的抑制率分别为61.4%、70.7%、76.6%,与阳性对照抑制率相比效果明显。

四种无机盐对荷叶离褶伞菌丝生长的优化试验

以荷叶离褶伞菌株为试材,采用L9(34)正交实验设计,在PDA基础培养基上测定了4种无机盐及其正交组合对其菌丝生长的影响,以期为其优质栽培提供理论依据。结果表明:荷叶离褶伞菌丝萌发与生长的最适组合为ZnSO42.0g/L、MgSO44.0g/L、KH2PO44.0g/L、FeSO41.5g/L;高浓度的ZnSO4、MgSO4、KH2PO4以及FeSO4对菌丝生长有抑制作用,其中MgSO4浓度≥10.0g/L时,菌丝停止生长;4种无机盐协同作用对荷叶离褶伞菌丝生长影响的大小依次为FeSO4>MgSO4>KH2PO4>ZnSO4;各组合之间的菌丝生长速度差异极显著,不同组合间有明显的交互作用,最佳组合为2.0g/L ZnSO4+6.0g/L MgSO4+6.0g/L KH2PO4+1.0g/L FeSO4。

荷叶离褶伞发酵液制作保健饮料的工艺研究

为降低生产成本、提高荷叶离褶伞产品的附加值,以黄豆、玉米粉为主要原料,分别经中性蛋白酶与α-淀粉酶液化,然后将荷叶离褶伞菌接种于以豆浆、玉米汁为天然培养基的原料发酵培养,得到荷叶离褶伞豆浆玉米汁发酵液。以此发酵液为主要配料进行保健饮料研制,优化得到荷叶离褶伞饮料配方为发酵液40%、柠檬酸0.12%、羧甲基纤维素钠0.02%、白砂糖4%,在饮料中添加1%蜂蜜可增加饮料香气。各组合之间的感官质量得分差异显著,不同组合间有明显的交互作用。

黄鸡枞子实体多糖提取工艺优化研究

以多糖得率为评价指标,采用水提醇沉法对黄鸡枞多糖的提取工艺条件进行优化,选用单因素试验和正交试验法,考察料液比、提取温度、浸提时间3个因素对该菌多糖得率的影响。结果表明,影响黄鸡枞水溶性多糖提取率的主要因素依次为料液比>提取温度>浸提时间,通过正交试验确定该菌多糖的最佳提取条件为料液比1∶30,浸提温度60℃,浸提时间2 h,在此条件下,其多糖得率可达4.7%,为改善黄鸡枞多糖的提取方法提供了试验基础。

一株临沧野生灵芝的鉴定与驯化栽培

从采集于云南临沧的野生灵芝子实体中分离纯化获得纯培养物,编号为YAASM4672,结合形态学与ITS序列分析鉴定其分类学地位,并设计了9种栽培种培养基,测定其栽培特性。结果显示,采集到的菌株YAASM4672为灵芝(Ganoderma lingzhi),其形态特征与分子鉴定结果一致。该菌在2号栽培种配方上,菌丝生长和子实体农艺性状(覆土组优于露地组)表现最好。菌丝体白色,长势浓密,38 d满袋,平均生长速度达(5.89±1.01)mm/d;菌盖黄色,直径达66.00 mm,平均生长速度最快为(4.14±1.07)mm/d,与其他配方相比,达到显著(P<0.05)或极显著差异(P<0.01);菌柄褐黄,其长度、直径分别达到84.00 mm、18.00 mm。驯化的野生灵芝菌株YAASM4672人工栽培最优配方为:78%玉米芯、18%米糠、2%高粱粉、1%石膏粉、1%白砂糖,覆土能促进其子实体的生长发育。

红葱抑制植物病原菌活性成分研究

采用平皿生长速率法测定了云南特色植物红葱(Eleutherine plicata)对百合炭疽病菌(Colletotrichum liliacearum)、香蕉炭疽病菌(Colletotrchum musae)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)等几种植物病原菌的抑制作用。结果表明,红葱甲醇提取物在浓度为200μg/mL时对百合炭疽病菌有较好的抑制作用,强于阳性对照;并从中分离出其抗菌活性成分为异红葱甲素isoeleutherol(C14H12O4)。

一株野生花脸香蘑的生物学特性及其栽培

从采集自云南省临沧市的野生子实体上分离纯化获得菌株YAASM4210,采用形态学法结合ITS序列分子法鉴定为花脸香蘑(Lepista sordida)。对该菌株生物学特性进行研究并对其栽培料进行筛选。试验结果表明:该菌株菌丝生长的最适温度、培养基pH、光照条件、碳源和氮源分别为25℃、6.0~7.0、黑纸包裹、可溶性淀粉和蛋白胨。该菌株在4号配方培养料(40%新鲜牛粪,20%草坪粉,20%米糠,18%木屑,1%蔗糖和1%石膏)上生长优于其它参试培养料:菌丝萌发(2d)、封口(12d)、满袋(40d)以及子实体的采收(9d)均用时最短,头潮菇产量最高(每袋21.1g),但覆土后出菇时间(42d)最长。相对于野生子实体,人工栽培子实体菌盖的紫色减弱,采收后紫色消失较快。

荷叶离褶伞液体发酵菌株筛选研究

依据菌丝体生物学特性，从137株荷叶离褶伞液体发酵菌株中筛选出11株典型的菌株，并采用液体培养方式，测定了各菌株的液体培养特性，以期为探索荷叶离褶伞工厂化发酵奠定基础。结果表明：11株菌株在22℃下均能形成菌球，以白色，不规则形为主；培养液为苦杏仁味，除菌株‘ZY02’、‘ZY05’为褐色外，其它菌株均为淡黄色，含糖量在1．0%-2．3％之间，82％的菌株pH值在6．5～7．5；其中菌株‘ZY05’菌球数量最大，为1．51×10^4CFU／L，菌株生物量为5．4173g／L，菌株‘ZY09’菌株生物量为8．0937g／L最大，菌球数量为1．31×10^4CFU／L，培养液pH最低，为4．91，菌株‘ZY10’粗多糖含量最高，为1．1053g／L；该菌的培养特性因不同菌株而存在差异，菌株‘ZY05’、‘ZY09’、‘ZY10’是分别以茵球数量、菌株生物量、粗多糖含量为筛选指标的最佳菌株。

一株斑玉蕈高产菌株生物学特性研究

研究了不同温度、碳氮、氮源、C/N及pH值对斑玉蕈高产菌株3011菌丝的影响.结果表明,斑玉蕈菌丝体在5～30℃均能生长,最适温度为25℃;能利用葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、甘露糖、果糖做碳源,但麦芽糖为碳源生长势强,乳糖生长势弱;能利用牛肉膏、蛋白胨、硫酸铵、硝酸铵作为氮源,最适氮源为牛肉膏;C/N在10/1 ～ 60/1范围内均可生长,最适C/N为30/1;菌丝在pH为4.0～8.5条件下均能生长,最适pH为5.0 ～7.0,以pH =6.5生长速度最快.因此,斑玉蕈高产菌株3011利用多糖和有机氮的能力较强,是一种低温、弱酸培养的食用真菌.

黄硬皮马勃子实体提取物抑菌活性

采用丙酮、正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚、95%乙醇6种不同溶剂分别提取黄硬皮马勃(Scleroderma sinnamariense)子实体活性物质,并用纸片琼脂法测定黄硬皮马勃子实体提取物对4种细菌的抑菌活性。结果表明:提取物对大肠杆菌(Escherichia coli)的抑菌效果最好,其次是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)抑菌效果较弱,对四叠球菌(Micrococcus tetragenus)无明显抑菌效果;6种不同溶剂提取物对不同的细菌表现出相同抑菌规律,其中95%乙醇提取物的抑菌效果相对较强,抑菌圈直径可达30.83 mm,该溶剂的提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度分别为0.15、0.23mg/mL。

1株巨大口蘑的鉴定及培养基中无机盐优化

为筛选巨大口蘑菌丝生长的最优培养基,从采集自云南临沧的野生口蘑子实体中分离获得菌株YAASM4295,利用形态学与ITS序列分析的方法对其进行分类学鉴定;并以不同的无机盐为基础,通过单因素试验,各筛选出2种大量元素和微量元素,采用L9(34)正交试验设计,分析4种无机盐及其正交组合对该菌菌丝生长的影响。结果表明,采集到的菌株为巨大口蘑,供试无机盐对其菌丝生长在不同程度上均有促进作用,其中0.1 mg·m L^(-1)MgSO_4、0.1 mg·m L^(-1)K_2HPO_4、0.05 mg·L^(-1)CoCl_2、0.05 mg·L^(-1)Mn Cl_2对该菌生长与生长势的促进作用最大,且与其它处理相比达到了极显著水平。4种无机盐协同作用对该菌菌丝生长影响的大小依次为Mg SO4>CoCl_2>MnCl_2>K2HPO4;最佳组合为0.2 mg·m L^(-1)Mg SO4+0.1 mg·m L^(-1)K_2HPO_4+0.01 mg·L^(-1)MnCl_2+0.01 mg·L^(-1)CoCl_2。综上,该野生巨大口蘑菌株在各无机盐培养基组合之间的菌丝生长速度差异极显著,不同组合间有明显的交互作用,这为其优质栽培提供了理论依据。

鸡枞发育生理研究进展

鸡枞菌(Termitomyces aurantiacus)是珍贵的药食兼用菌,具有较大的开发价值。结合其生活史,从胞外酶的种类与作用机理、菌丝体培养的营养与环境条件、白蚁菌圃的特殊环境三个方面介绍了目前国内外对该菌发育生理的最新研究进展,阐述了目前的研究热点、存在的问题及发展方向。

斑玉蕈高产菌株3011最适培养料配方筛选

以棉子壳、木屑、玉米芯等主料的11个配方料,栽培斑玉蕈3011。结果表明,木屑为主料3011菌株菌丝体生长优于以棉子壳、玉米芯为主料,棉子壳为主料有利于子实体的形成,特别是棉子壳添加少量木屑、阔叶、腐殖土(配方5)更利于子实体形成,出菇周期为83 d,产量最高(83.5 g/袋)。因此,最适培养料配方:棉子壳40%,木屑20%,阔叶26%,腐殖土3%,石膏粉1%。

野生鸡瑽菌鉴定及最适菌株、培养基的筛选

为保护和利用鸡瑽菌(Termitomyces)野生种质资源,在广泛收集临沧鸡瑽菌菌株的基础上,通过测定ITS序列,结合Gen Bank已有序列,分析了供试菌株的分类地位,并进行了最适菌株及其培养基初步筛选研究。结果证明,供试菌株与Termitomyces属内的其他物种能很好地聚在一起,但又被分为明显的两大类和四小类。在YPD培养基上其生长特性存在差异,其中菌株4279表现最优,随后依次是2871与2878,而4288表现最差。菌株4279在供试的11种培养基上均能生长,且在牛粪培养基上菌丝生长浓密,生长速度最快,达(0.77±0.04)mm/d,与在其他培养基上的生长速度相比差异达到显著水平。总之,ITS序列分析能够解决鸡瑽菌属种类混淆的问题,可用于真菌的分类鉴定;优良菌株4279的最适培养基配方为150 g牛粪+20 g葡萄糖+15 g琼脂+2 g蛋白胨,培养基成分对菌丝生长的影响较大。

杨柳田头菇YAAS711菌株F1子代胞外酶活性分析

【目的】探究杨柳田头菇YAAS711菌株的单孢菌株及其自交个体的胞外酶活性变化规律,为其遗传育种提供理论依据。【方法】以杨柳田头菇YAAS711的18个单核体与22个自交双核体为试验材料,分别采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法、福林法、愈创木酚法等测定羧甲基纤维素酶、滤纸纤维素酶、β-葡萄糖苷酶、半纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、漆酶、多酚氧化酶、过氧化物酶9种胞外酶活性,并对这9种胞外酶与子代生长速度、极性和交配因子进行相关性分析。【结果】单核体和双核体绝大多数都具有较高的淀粉酶、滤纸纤维素酶、半纤维素酶、β-葡萄糖苷酶、羧甲基纤维素酶及蛋白酶活性,过氧化物酶、多酚氧化酶及漆酶活性却较低。9种胞外酶平均活力与单核体和双核体的菌丝生长速度均存在一定程度的相关性,除部分类型Ⅱ单核体外,菌丝生长速度较快的单核体具有较高的胞外酶活性;反之,胞外酶活性较低。相比单核体菌丝生长速度“快-快”的组合,单核体菌丝生长速度“快-慢”的组合除半纤维素酶、蛋白酶和多酚氧化酶外,其他胞外酶活性都较高。具有类型Ⅱ单核体参与形成的双合体胞外酶活性却各不相同且无规律。多酚氧化酶对单核体菌丝生长速度的间接影响大于漆酶,但漆酶对单核体菌丝生长速度的综合作用最大;胞外酶之间的协同作用对双核体菌丝生长速度影响较小,其中漆酶对其菌丝生长速度直接作用最大。多重比较结果显示,在显著水平为0.05上,极性对胞外酶平均活力的影响大于交配因子。【结论】单核体菌丝生长速度与本极性异常和杨柳田头菇YAAS711子代个体胞外酶活性差异存在显著相关性,除部分类型Ⅱ单核体和双核体外,类型Ⅰ菌株胞外酶活性具有相同的规律。单核体菌丝生长速度、极性、胞外酶三者之间具有一定的相关性,但交配因子与胞外酶没有直接相关性。

灵芝原种及栽培种培养基配方筛选初探

筛选适合灵芝人工栽培的最优培养基,为其推广利用奠定基础。以小麦、澳洲坚果壳、玉米芯等为主料,分别设4种原种和栽培种培养基,测定菌株Ling1的栽培特性。结果显示,菌株Ling1在原种配方2上,菌丝体雪白,长势浓密,平均生长速度最快(7.53±0.99 mm/d),与其它配方相比达到极显著水平。栽培种配方(2)在菌丝萌发(1d)、封口(4d)、满袋时间(35d)方面表现最优,但其平均生长速度与配方(1)无显著差异,子实体农艺性状弱于配方(1)。因此,原种培养基2和栽培种培养基(1)可作为菌株Ling1的推广配方。

一株临沧覆土栽培盖囊菇高温品种可控环境因子优化研究

在马铃薯蔗糖琼脂培养基的基础上,采用单因素与L_(16)(4^(5))正交优化试验的方法,研究5种环境条件对盖囊菇菌丝体生长与孢梗束形成的影响。结果表明:盖囊菇菌丝体在温度10~30℃、琼脂浓度0.5%~3.0%、pH 4.00~10.00、培养皿直径60~100 mm、光照时间0~24 h的范围内均能生长,其中在温度25℃、琼脂浓度3.0%、pH 5.80、培养皿直径100 mm、黑暗条件下菌丝体生长最快。盖囊菇孢梗束在15~30℃温度范围内均能形成,其余环境条件与其菌丝体相同,在温度27℃、琼脂浓度2.0%、pH 8.00、培养皿直径100 mm、光照时长24 h下孢梗束形成数量最多。正交优化试验表明,盖囊菇菌丝体生长最适环境条件组合为:温度25℃、琼脂浓度3.0%、pH 5.80、培养皿直径100 mm、光照时长0 h;其孢梗束形成最适环境条件为:温度25℃、琼脂浓度2.0%、pH 8.00、培养皿直径100 mm、光照时长14 h。总之,环境条件对盖囊菇菌丝体生长与孢梗束形成的影响较大且存在交互作用。

一株临沧野生黄鸡■的鉴定与生长条件研究

为筛选黄鸡[土從]菌丝生长的最优培养条件,为其仿生栽培奠定基础,从采集于云南临沧的野生鸡子实体中分离纯化获得纯培养物LCT10,结合形态学与ITS序列分析鉴定其分类学地位,并设计了不同培养条件,研究不同温度、pH、光照强度、通气性、碳氮源与碳氮比对野生黄鸡菌丝生长的影响。试验表明,采集到的菌株LCT10为黄鸡[土從](Termitomyces aurantiacus),其形态特征与分子鉴定结果一致。该菌菌丝体在5~30℃均能生长,最适生长温度为25℃;菌丝在pH4.0~12.0均能生长,当pH为8.0,培养皿在黑纸包裹下培养菌丝生长速度最快;在5种通气处理下均能生长,不做任何通气处理的菌丝生长最快。能利用可溶性淀粉、玉米粉、蔗糖、蜂蜜、葡萄糖作为碳源,蛋白胨、甘氨酸、硝酸铵、尿素作为氮源,其中,在蜂蜜上生长浓密且生长快,最适氮源为蛋白胨,最适C/N为(20~30)∶1。LCT10在最适培养条件下的生长情况与其他处理相比有显著差异(P<0.05)。

四种植物提取物对烟草赤星病菌抑菌活性研究

以烟草赤星病菌为供试靶标,采用孢子萌发及生长速率测定法,对华山姜、毗黎勒、团花树和金钮扣的95%乙醇粗提物进行了抑菌活性测定。结果表明:在终浓度为200μg/mL下,华山姜对该菌的孢子萌发及菌丝生长的抑制率最高,分别为72%、53%,其次为毗黎勒。团花树和金钮扣只对该菌的孢子萌发有低抑制活性。因此,华山姜对烟草赤星病菌孢子萌发及菌丝生长的抑制效果显著优于另外3种提取物,与75%百菌清WP阳性对照在相同浓度下达到同一显著水平。

甘蔗ShSAP1基因的启动子克隆与序列分析

启动子在转基因育种中具有重要地位,为了发掘高效的胁迫诱导和组织特异型启动子,提高目的基因的表达效率,根据甘蔗逆境相关蛋白家族基因ShSAP1的基因组序列,利用Genome Walking法对ShSAP1的启动子进行了分离,并对其序列进行了生物信息学分析。分离获得了1243 bp的启动子序列,该序列具有启动子的核心元件,还包含了干旱等胁迫相关的应答元件、MYB/MYC转录因子识别与结合元件、光应答元件及组织特异性相关元件,说明ShSAP1的启动子可能具有逆境应答及组织特异表达特性,值得开展进一步的功能研究。