乌司他丁对重症急性胰腺炎肺损伤的防治作用

目的探讨乌司他丁对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的防治作用。方法84例SAP患者随机分为乌司他丁治疗组和对照组,每组42例,对照组给予常规治疗,治疗组则在常规治疗基础上加用乌司他丁治疗。分别于治疗后第0、3、7、10、14天分析患者动脉血气,以呼吸频率、血PaO2、氧合指数和肺部X线检查等为观测指标,观察乌司他丁治疗组与对照组之间肺损伤发生率差异以及对肺损伤的疗效。结果治疗组SAP肺损伤的发生率为39.6%,对照组为65.9%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);乌司他丁对各阶段ALI都有较好的治疗作用(P<0.01)。结论乌司他丁可以显著减少SAP引起的ALI的发生,并能促进SAP的好转,对SAP引起的ALI有预防和治疗作用。

缺氧和高二氧化碳动物饲养箱的研制

目的 研制低氧和高二氧化碳动物模型饲养箱以制备缺氧和二氧化碳潴留大鼠模型。方法 采用单片机技术和反馈原理 ,自动调节饲养箱内氧和二氧化碳气体浓度。结果 缺氧和二氧化碳潴留大鼠的血气指标和血液流变学指标均能达到实验要求。

GABA_A受体在爪蟾卵母细胞的表达

目的 将鼠源γ 氨基丁酸A型 (GABAA)受体表达于爪蟾卵母细胞膜上并行功能测定。方法 微量注射仪将纯化的大鼠脑mRNA注入准备好的爪蟾卵母细胞内并于 19℃温浴 48h以上使其表达 ;使用常规双电极电压钳记录卵母细胞表达的受体特性。结果 爪蟾卵母细胞注射大鼠脑mRNA 48h后有GABAA 受体的表达 ,此受体具有天然GABAA 受体的氯通道特性。结论 爪蟾卵母细胞具有表达外源GABAA 受体的特性 ,是研究GABAA 受体生理和药理功能的一种重要工具。

慢性二氧化碳潴留大鼠脑GABA_A受体mRNA的变化研究

目的 观测慢性二氧化碳潴留大鼠脑组织γ 氨基丁酸A型 (Gamma aminobutyricacidA,GABAA)受体mRNA的变化情况 ,探讨GABAA 受体在呼吸衰竭中的作用。方法 建立慢性二氧化碳潴留大鼠模型 ,应用NorthernELISA测定不同脑区GABAA 受体亚单位α1 、α2 、β2 、γ2 的变化情况。结果 4种亚单位mRNA在脑干和海马区均非常显著的增高 ,大脑皮质显著增高 ,以α1 、β2 、γ2 明显 ,而小脑无明显变化。结论 二氧化碳潴留时GABAA 受体α1 、β2 、γ2 mRNA表达增强 ,GABAA 受体可能参与了中枢性呼吸衰竭的产生。

慢性缺氧和二氧化碳潴留对大鼠脑阴离子转运蛋白mRNA表达的作用

本实验通过向密闭舱内灌注混合气体的方法，分别复制慢性缺氧、慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒大鼠模型。以地高辛标记的脑阴离子转运蛋白（ＡＥ３）ｃＤＮＡ探针，应用核酸原位杂交及点杂交技术，对ＡＥ３ｍＲＮＡ的分布及变化进行检测，结果显示：（１）ＡＥ３ｍＲＮＡ广泛分布于脑组织，其中以呼吸调整中枢所在部位脑桥深部灰质最为富集；（２）慢性缺氧组ＡＥ３ｍＲ－ＮＡ的相对含量显著地低于对照组（Ｐ＜０．０５），慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒组均非常显著地低于对照组（Ｐ＜０．０１）；（３）慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒组均非常显著地低于慢性缺氧组（Ｐ＜０．０１），但二组之间无显著性差异。提示ＡＥ３在呼吸衰竭的发生及其导致的肺性脑病中可能具有一定作用。

慢性缺氧和二氧化碳潴留大鼠脑阴离子转运蛋白AE_3mRNA表达

通过向密闭舱内灌注混合气体的方法，分别复制慢性缺氧、慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒大鼠模型。以地高辛标记的脑阴离子转运蛋白（ＡＥ３）ｃＤＮＡ探针，用核酸原位杂交及点杂交技术，对ＡＥ３ｍＲＮＡ的分布及变化进行检测，结果显示：①ＡＥ３ｍＲＮＡ广泛分布于脑组织，其中以呼吸调整中枢所在部位脑桥深部灰质最为富集。②慢性缺氧组ＡＥ３ｍＲＮＡ的相对含量显著地低于对照组（Ｐ＜０．０５），慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒组均非常显著地低于对照组（Ｐ＜０．０１）；③慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒组均非常显著地低于慢性缺氧组（Ｐ＜０．０１），但二组之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。提示ＡＥ３在呼吸衰竭的发生及其导致的肺性脑病中可能具有一定作用。

慢性缺氧和二氧化碳潴留大鼠脑阴离子转运蛋白的研究

目的：观测慢性缺氧和二氧化碳潴留大鼠脑桥组织中脑阴离子转运蛋白（ＡＥ３）ｍＲＮＡ的变化。方法：采用密闭舱内灌注混合气体的方法，分别复制慢性缺氧，慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒大鼠模型，以地高辛标记的（ＡＥ３）ｃＤＮＡ探针，应用点杂交技术，对各实验组及对照组大鼠脑桥组织中ＡＥ３ｍＲＮＡ的相对含量进行测定。结果：（１）慢性缺氧组ＡＥ３ｍＲＮＡ的相对含量明显地低于对照组（Ｐ＜００５），慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒组的ＡＥ３ｍＲＮＡ降低更为明显；（２）慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒二组之间无显著差异（Ｐ＞００５），但都明显低于慢性缺氧组（Ｐ＜００１）。结论：提示ＡＥ３在呼吸衰竭及其导致的肺性脑病的发生中可能具有一定作用。

大承气汤治疗重症急性胰腺炎大鼠的实验研究

目的探讨大承气汤治疗重症急性胰腺炎(SAP)的作用机制。方法健康Wistar大鼠50只随机分成5组,分别为:假手术组(A组),SAP模型组(B组),SAP+乌司他丁治疗组(C组),SAP+大承气汤治疗组(D组),SAP+大承气汤+乌司他丁治疗组(E组)。采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠法建立SAP大鼠模型,于制模后24 h收集样本,检测大鼠肺组织、回肠和血浆中促炎因子白细胞介素-6(IL-6)、内毒素(ET)和抑炎因子白细胞介素-10(IL-10)的含量变化。结果SAP+乌司他丁治疗组、SAP+大承气汤治疗组、SAP+大承气汤+乌司他丁治疗组与SAP模型组比较血浆及组织ET、IL-6含量明显降低(P<0.05),IL-10含量明显升高(P<0.05);SAP+大承气汤+乌司他丁治疗组与SAP+乌司他丁治疗组、SAP+大承气汤治疗组比较血浆及组织ET、IL-6含量明显降低(P<0.05),IL-10含量明显升高(P<0.05)。结论大承气汤可能通过减少致炎因子ET、IL-6和增加抑炎因子IL-10来影响SAP的炎症反应,大承气汤和乌司他丁对大鼠SAP具有相加或协同的抗炎作用。

不同机械通气在重症急性胰腺炎合并急性呼吸窘迫综合征患者中的应用

目的:分析不同机械通气方案在重症急性胰腺炎(SAP)合并急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者呼吸道管理中的应用效果。方法:选择129例SAP合并ARDS患者,采用随机数字表将其分为A组、B组、C组,每组43例。所有患者均选择相同的控制模式、肺保护通气策略、肺复张、最低PEEP策略、俯卧位通气。3组患者分别选择有创正压通气、无创正压通气、有创和无创序贯机械通气方案辅助治疗,C组患者于ARDS得到控制后撤机行无创正压通气治疗。比较3组患者治疗前、治疗后72 h后呼吸系统顺应性、气道峰压、呼吸频率、氧分压(Pa O_2)、氧合指数(Pa O_2/Fi O_2)、APACHEⅡ评分的变化,统计并比较3组患者机械通气时间、住ICU时间、无辅助通气时间、气管切开率、气压伤发生率、28 d病死率。结果:治疗前3组患者呼吸系统顺应性、气道峰压、呼吸频率、Pa O_2、Pa O_2/Fi O_2、APACHEⅡ评分比较差异均无统计学意义(均P>0.05);治疗后72 h 3组患者的呼吸系统顺应性均获改善、Pa O_2、Pa O_2/Fi O_2均显著升高,气道峰压和APACHEⅡ评分均降低(均P<0.05),且B、C组患者上述指标的改善优于A组患者(P<0.05)。C组患者的机械通气时间、住ICU时间、无辅助通气时间、气管切开率、28 d病死率均低于A与B组,但差异均无统计学意义(均P>0.05);A组气压伤发生率明显高于B组和C组(均P<0.05)。结论:有创、无创序贯通气方案可降低SPA合并ARDS患者的气压伤发生率,对SAP合并ARDS患者具有一定的临床价值。

C-Jun氨基末端激酶信号通路在急性一氧化碳中毒迟发性脑病中的作用

目的探讨c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinas,JNK)信号通路在急性一氧化碳中毒迟发性脑病中的作用。方法 120只雄性SD大鼠随机分成空白对照组(BC组)、急性一氧化碳中毒迟发性脑病组(CO组)和JNK抑制剂SP600125组(SP组)3组,每组40只,采用静态吸入式染毒法复制急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠模型,选取染毒后1、3、7、14、28 d为时相点,应用Morris水迷宫试验检测平均潜伏期等学习记忆能力,免疫组化法检测海马区p-JNK表达,Tunel法检测海马区锥体细胞凋亡。结果 CO组大鼠平均潜伏期较BC组明显延长(P<0.01),SP组较CO组明显缩短(P<0.01),但仍比BC组延长(P<0.01);p-JNK在CO组大鼠海马区表达较BC组明显增强(P<0.01),SP组较CO组表达明显减弱(P<0.01),较BC组明显增强(P<0.01);CO组海马区锥体细胞第3天已经有凋亡增多(9.94%±1.22%),第7和14天增多最明显(39.77%±1.91%,29.72%±4.89%),第28天仍然增多(5.88%±0.55%),凋亡指数与BC组相比有明显增高(P<0.01),而SP组凋亡指数与CO组相比明显降低(P<0.01)。结论 JNK信号通路参与了急性一氧化碳中毒迟发性脑病的发生,应用其特异性抑制剂SP600125阻断其转导可减少海马区神经元的凋亡,减轻急性CO中毒对学习记忆能力的损害。

P13K／Akt／mTOR信号通路参与缺氧诱导因子-1α在急性胰腺炎大鼠的表达调节

目的探讨急性胰腺炎（AP）大鼠P13K／Akt/mTOR信号通路与HIF-1α表达的关系。方法56只雄性SD大鼠随机分为7组：空白对照组（n=8）、假手术组（n=8）、AP模型组（n=8）、wortmannin预处理组（n=8）、rapamycin预处理组（n=8）、wortmannin＋rapamycin预处理组（n=8）和溶剂对照组（n=8）。用逆行胰胆管注射5％牛磺胆酸钠制备大鼠AP模型，wortmannin预处理组、rapamycin预处理组、wortmannin＋rapamycin预处理组分别于AP模型复制前30min腹腔注射wortmannin、rapamycin、wortmannin＋rapamycin DMSO／PBS溶液，溶剂对照组仅注射DMSO／PBS溶液。模型复制成功后6h处死大鼠取胰头部胰腺组织，应用Westernblot检测HIF-1α、Akt、P—Akt、p70^s6k、P—p70^s6k蛋白的表达。结果Akt、p70^s6k蛋白在胰腺组织中表达稳定，各组间差异无统计学意义（P〉0．05），HIF—1α、P—Akt、P—p70^s6k蛋白在空白对照组和假手术组中均有极少量阳性表达，两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。AP模型组HIF-1α、P—Akt、P—p70^s6k蛋白含量与空白对照组相比明显升高（P〈0．01）；wortmannin预处理组、rapamycin预处理组、wortmannin＋rapamycin预处理组中HIF-1α、P—p70^s6k蛋白表达明显高于空白对照组（P〈0．01），但较AP模型组明显降低（P〈0．01），其中HIF-1α蛋白表达在wortmannin＋rapamycin预处理组比wortmannin预处理组、rapamycin预处理组降低更明显（P〈0．05）。HIF-1α、P—Akt、P—p70“蛋白含量在溶剂对照组和AP模型组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论P13K／Akt／mTOR信号通路阻断剂wortmannin、rapamycin能够显著降低急性胰腺炎大鼠HIF-1α的表达，P13K／Akt／mTOR信号通路参与了HIF-1α的表达调控，P13K／Akt／mTOR信号通路可作为AP防治中的新靶点。

大鼠心肌细胞阴离子交换蛋白免疫细胞化学定位的研究

目的：观察带３ 样蛋白（ Ａ Ｅ３）在成年大鼠心肌细胞的免疫细胞化学定位，并对其生物学意义作初步的探讨。方法：采用免疫细胞（组织）化学酶染色法及免疫荧光技术研究带３ 样蛋白在心肌细胞的定位，第一抗体为红细胞带３ 蛋白单克隆抗体。结果：免疫化学酶染色显示带３ 样蛋白存在于成年大鼠心肌细胞膜及膜的皱褶或折入处，免疫荧光法显示带３ 蛋白单克隆抗体标记了心肌细胞膜和肌纤维横纹结构的部位。结论：阴离子交换蛋白（ Ａ Ｅ）免疫细胞化学定位表明该蛋白分布于心肌细胞膜及肌纤维横纹结构的部位，这种分布特性提示 Ａ Ｅ在精确调节细胞内ｐ Ｈ、神经体液刺激的信号传导及将收缩蛋白和细胞骨架“铆定”到胞膜的过程中起着非常重要的作用。

机械通气联合支气管肺泡灌洗治疗31例重症呼吸衰竭临床分析

目的探讨机械通气必要时联合支气管肺泡灌洗(BAL)在ICU治疗呼吸衰竭的作用。方法选择常规治疗后病情缓解不明显的重症呼吸衰竭患者31例,建立人工气道行机械通气治疗,对机械通气24 h后,低氧血症纠正不理想、气道压力仍偏高、痰多者,应用生理盐水加氨溴索及爱全乐经纤支镜行BALF,清除呼吸道痰栓,每天1次,连续3d。结果31例患者中,27例通气24 h,经支气管肺泡灌洗后,气道压下降(P<0.05),临床症状好转,缺氧及二氧化碳潴留得到改善,病源菌得到明确,成功脱机出院。结论在机械通气基础上结合支气管肺泡灌洗是治疗呼吸衰竭安全有效的措施,值得推广。

全自动低氧高二氧化碳饲养舱的研制与临床应用

介绍一种全自动缺氧和高二氧化碳饲养舱。该舱可模拟常压下的低氧、高二氧化碳环境 ,自动测控舱内氧气浓度、二氧化碳浓度、温度与湿度 ,为临床研究慢性肺源性心脏病的机理提供设备支持。临床应用表明其测控准确。

SSAT2通过抑制HIF-1α表达增强肾癌Caki-1细胞化疗敏感性

目的探讨转染精脒/精胺N1乙酰基转移酶2(spermidine/spermine N1-acetyltransferase 2,SSAT2)在低氧条件下对肾癌Caki-1细胞增殖、凋亡和阿霉素敏感性的影响及机制。方法经X-treme GENE HP介导将真核表达质粒pcDNA3.1(D)/V5-His-SSAT2转入肾癌Caki-1细胞,细胞在1%氧浓度下培养,Western blot法检测SSAT2蛋白和低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)蛋白表达;流式细胞仪检测细胞的凋亡率、死亡率;MTT法检测细胞的增殖,以及不同浓度阿霉素对细胞的抑制率。结果 SSAT2成功转入肾癌Caki-1细胞,与空白细胞组及空载体组比较,转染SSAT2组HIF-1α蛋白表达明显下调(P<0.01),细胞增殖受到明显抑制(P<0.01),细胞凋亡率和死亡率均增加(P<0.05)。阿霉素浓度为2μg/ml时,转染组细胞抑制率可达(67.5±3.7)%,对空白细胞和空载体细胞的抑制率为(54.7±8.4)%、(56.8±7.7)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论转染SSAT2可以通过下调HIF-1α蛋白表达,减少肾癌细胞的增殖,增加肾癌Caki-1细胞的凋亡率、坏死率和对阿霉素的敏感性,针对SSAT2的基因治疗可能成为逆转肾癌耐药的方法之一。

白藜芦醇与乳腺癌相关研究进展

白藜芦醇（resveratr01）是广泛存在于葡萄、虎杖、花生等多种植物中的一种含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物，以新鲜葡萄皮中含量最高，其化学名称为3，5，4’-三羟基二苯乙烯（3，5，4＇-trihydrolystilbence），分子式为C14 H12O3，相对分子质量228．25。

重症急性胰腺炎患者治疗前后血清C反应蛋白和细胞间黏附分子-1的变化

目的观察乌司他丁(Ulinastatin,UTI)对重症急性胰腺炎的治疗疗效及治疗前后血清C反应蛋白(CRP)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的变化。方法采用随机对照的研究方法,收集本院41例重症急性胰腺炎患者,随机分为试验组21例(UTI 1,200000 U/d×10d+奥曲肽0.6mg/d×10d)和对照组20例(奥曲肽0.6mg/d×10d),分别监测于入院治疗前和治疗后第5、10天患者临床症状、体征和实验指标。结果试验组痊愈率和总有效率明显提高;试验组在治疗后第5、10天时CRP和ICAM-1等指标显著改善,差异有统计学意义(P<0.05)。结论UTI可明显提高重症急性胰腺炎治疗效果,与下调ICAM-1的表达有关。

白藜芦醇抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖的机制研究

目的:研究白藜芦醇对MCF-7乳腺癌细胞抑制效应及其作用机制。方法:以人MCF-7乳腺癌细胞株为研究对象,利用MTT方法研究白藜芦醇抑制MCF-7乳腺癌细胞的生物学效应;观察在ERK1/2抑制剂PD98059预处理情况下,白藜芦醇抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖效应的改变;利用免疫印迹方法观察白藜芦醇对MCF-7乳腺癌细胞中ERK1/2与AKT信号分子的蛋白表达。结果:白藜芦醇能够明显降低MCF-7乳腺癌细胞增殖能力,该作用呈一定的浓度依赖性关系。在ERK1/2抑制剂PD98059预处理情况下,白藜芦醇对MCF-7乳腺癌细胞增殖抑制效应能明显抑制,PD98059可明显减轻该效应。同时,白藜芦醇明显增加p-ERK1/2蛋白表达,降低p-AKT表达水平,但对ERK1/2与AKT蛋白表达无改变。结论:白藜芦醇能够有效抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖,该效应与白藜芦醇对ERK1/2及AKT信号途径的调节有关。