蓖麻种子cDNA-AFLP反应体系的优化

以蓖麻种子为研究对象,优化其cDNA-AFLP反应体系,为研究不同蓖麻材料或不同发育阶段的蓖麻种子内脂肪酸基因表达差异奠定理论基础。试验结果表明:提取蓖麻种子总RNA;将RNA逆转录为cDNA,用高频限制性内切酶EcoRⅠ和MseⅠ进行酶切,并与EcoRⅠ、MseⅠ接头连接,得到连接产物;连接产物稀释40倍作为预扩增模板,进行预扩增;优化选择性扩增反应体系,得到最佳反应体系为:10×PCR Buffer 2.0μL、dNTPs(10 mmol/L)1.4μL、Mg2+(25 mmol/L)1.4μL、模板稀释80倍1.0μL、Ex扩增引物(50 pmol/μL)1.2μL、My扩增引物(50 pmol/μL)1.2μL、LA Taq(5 U/μL)0.2μL、ddH2O 11.6μL。采用优化后的体系,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对256对选择性引物进行筛选,得到适合蓖麻种子cDNA-AFLP分析的选择性扩增引物10对。

蓖麻3种类型花序发育过程的显微学比较研究

试验以Lm型蓖麻—矮秆Lm型雌性系的两用系aLmAB2为研究对象,在显微学水平上研究其后代两性、单雌、标雌系3种类型花序分化过程中的差异,确定植株由营养生长到生殖生长转变的关键时期,以期为东北生态型蓖麻的栽培育种研究提供参考依据。试验结果表明：aLmAB2蓖麻的3种花序类型花芽分化的转变期在5~6片真叶期;花序为圆锥花序,花序上的小花排列紧密程度为两性系〉单雌系〉标雌系,锥底直径大小排序为两性系〉单雌系〉标雌系,不完全花;在7片真叶期时开始出现柳叶状功能叶。