抗凝治疗在体外膜肺氧合中的应用现状与挑战

体外膜肺氧合(ECMO)是一种应对严重心、肺功能衰竭的疗法。主要有两种模式:用于难治性心源性休克或合并心肺功能衰竭患者的静脉⁃动脉ECMO;用于潜在可逆性呼吸衰竭患者的静脉⁃静脉ECMO。接受ECMO治疗的患者经常出现凝血障碍,包括促凝和抗凝因子的改变、血小板消耗和血小板功能障碍、纤溶亢进等,可以导致血栓和出血并发症,增加患者死亡率。因此,ECMO期间合理的抗凝策略对预防血栓和出血并发症至关重要。本文就ECMO治疗过程并发症、抗凝治疗策略及抗凝监测研究进展进行综述,探讨当前ECMO治疗过程所面临的挑战。

抗鸡传染性法氏囊病病毒抗体Fab的表达及其中和活性的测定

为表达抗鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体Fab并检测其中和活性,本研究将抗IBDV抗体的轻链(L)和重链片段(Fd)基因分别克隆于p ET-27b(+)载体中,并转化于大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达。将L和Fd片段包涵体蛋白变性后等量混合于复性液中,制备Fab并对其进行活性鉴定。结果显示L和Fd蛋白相对分子质量大小分别为25 ku和28 ku。Western blot和ELISA检测结果表明,获得的抗体Fab大小约为50 ku,并且与VP2蛋白和不同病毒株均具有特异性结合能力。体外中和试验结果表明,获得的IBDV抗体Fab具有中和活性,可以有效阻断IBDV(B87株)对鸡胚成纤维细胞(DF1)的感染。本实验获得的IBDV抗体Fab有望成为治疗IBD的候选生物制剂,为研制治疗IBD抗体制剂奠定了基础。

长期注射成纤维细胞生长因子21对二乙基亚硝胺诱发肝癌的预防作用

研究成纤维细胞生长因子21(FGF21)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导肝癌模型的预防作用及机制。健康雄性wistar大鼠随机分3组:FGF21组,模型对照组及正常对照组。FGF21组大鼠每天注射一次FGF21,注射20周。2周后,FGF21组大鼠和模型组大鼠同时每3 d注射一次DEN,直至试验结束。给药结束后,取各组大鼠血清样本测定肝功,统计各组大鼠肝癌发生率,比较各组大鼠肝脏内氧化应激水平。结果表明,FGF21治疗组肝功显著低于模型对照组,接近正常水平。通过分析各组大鼠肝脏变化发现,FGF21治疗组大鼠肝癌发生率为18.1%,而注射生理盐水的模型对照组肝癌发生率为60.0%。FGF21治疗组肝脏内的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量显著低于模型对照组,接近正常对照组;FGF21治疗组肝脏内超氧化物歧化酶(SOD)活性与正常对照组持平,显著高于模型对照组。Real-time PCR结果显示,FGF21治疗组肝脏的抗氧化酶基因(G6pdh,GCL-c,Gpx-1,Sod2)表达水平显著高于模型对照组。结果表明,长期注射FGF21可通过抑制肝脏内氧化应激水平预防DEN诱导的肝癌。

抗鸡传染性法氏囊病病毒单链抗体库的构建及其中和抗体的筛选

为构建抗鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）的细菌展示单链抗体（scFv）库并筛选出具有高亲和力和中和活性的scFv。本研究从IBDV免疫鸡的法氏囊提取总RNA，采用RT-PCR的方法分别扩增鸡抗体的VH和VL编码序列，插入含有（Gly4Ser）3 linker的pTlinker载体中，再将VH-linker-VL片段亚克隆到细菌展示载体pBSD中。以FITC标记的VP2 蛋白为诱饵，通过流式细胞术筛选出5株阳性scFv，其氨基酸同源性为82.16 %～87.27 %。将5株scFv基因分别插入原核表达载体pET-27b（＋）中，构建重组表达质粒pET-IBDV-scFv。将其转化大肠杆菌Rosetta进行诱导和表达，该5株scFv相对分子质量均约为28 ku。此外，利用纯化的scFv包被于ELISA检测板中作为扑捉抗体，检测结果显示scFv对VP2蛋白和不同IBDV株均具有特异性结合能力。而且通过体外中和试验结果表明，仅有一株scFv具有病毒中和活性，可以有效阻断IBDV（B87 株）对鸡胚成纤维细胞（DF1）的感染。该研究结果为进一步研制IBDV治疗性抗体奠定了基础。

Anti-hEGFR轻、重链共表达及高表达细胞株快速筛选

为实现h EGFR全长抗体(anti-h EGFR)轻、重链共表达以及建立快速、高效筛选方法并获得共表达细胞株。采用分子克隆技术获得重链和轻链基因,将之连入peedual真核表达载体;经GS-Neo加压及流式细胞术筛选获得稳定表达细胞株;通过protein A亲和层析技术纯化出目标抗体;应用cck-8法、Annexin V/PI法以及q PCR技术检测anti-h EGFR对A431细胞增殖、凋亡影响。SDS-PAGE分析结果显示,纯化后抗体纯度为95.0%、分子质量约为150 ku。cck-8试验中不同浓度anti-h EGFR对A431细胞增殖均有极显著抑制作用,且与商品化Cetuximab效果相近;anti-h EGFR与Cetuximab均可诱导A431细胞产生凋亡,作用效果相近,均达极显著。全长抗体轻、重链的共表达,省去分别表达的重组过程,保证抗体天然结构;GS-Neo双加压结合流式筛选,实现阳性细胞株快速、高效分离;建立省时、高效抗体共表达平台,为抗体类药物真核构建及筛选提供新思路。

浅析行政赔偿中的职务行为

职务行为是行政赔偿的要件之一,所以对职务行为的界定涉及到受害人求偿权的实现。由于对职务行为缺乏相关的科学的法律界定,实务中认定不一,影响法律适用的稳定性和统一性,因此,如何判断职务行为成为能否给予行政赔偿的关键。

浅析迁徙自由权

迁徙自由是国际人权法的基本内容,在国际人权公约中占有举足轻重的地位。我国虽然在国际公约上签字,但我国现行宪法中并未明确赋予公民的迁徙自由权,并在出台的法律法规中也不断限制公民的迁徙自由,这对就业、教育等产生了不利影响。

司法改革中的司法公正问题研究

司法公正和司法改革现在已经成为众多专家学者探讨的问题,并且在不同的方面进行研究。指出我国现行的司法体制不利于司法公正,必须按照社会主义市场经济的客观需要和法治原则的要求对司法体制进行改革,在进行司法改革进程中改革和完善司法公正,实现司法公正的对策和制度。

利用细菌展示技术系统地筛选猪圆环病毒2型衣壳蛋白的线性抗原区域

为了系统的筛选位于猪圆环病毒2型（PCV2）Cap蛋白上的抗原优势区域,本研究将缺少N端核定位信号的Cap蛋白基因分成7个连续重叠的DNA片段cap（1~7）,然后分别克隆于细菌展示载体APEx中,IPTG诱导重组蛋白片段表达于细菌内膜外侧,采用流式细胞仪检测各片段和抗PCV2 Cap蛋白的多克隆抗体的结合能力。结果表明,cap（1~7）均可以和抗该Cap蛋白的多抗结合,并且cap6的结合能力最强。将cap6片段进一步分为连续不重叠的3段（cap6-1、cap6-2、cap6-3）,以同样的方法鉴定抗原表位。结果显示,cap6-2与抗PCV2 Cap蛋白的多抗结合能力最强。此外,应用western blot的方法对细菌展示结果进行了验证。本研究利用细菌展示技术以及流式细胞仪快速的筛选了PCV2b Cap蛋白上的抗原优势区域,cap（1~7）片段均包含抗原表位,并且cap6是Cap蛋白上的抗原优势区域,cap6-2可能是抗原优势表位。

表达抗鸡传染性法氏囊病病毒重组鸡源抗体CHO细胞的悬浮驯化

为将贴壁生长的表达抗鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)重组鸡源抗体的CHO细胞株驯化为在无血清培养基中悬浮生长、高产的工程细胞株,本研究利用流式细胞仪筛选得到高产贴壁细胞株;以快速降低血清法进行驯化,使其适应悬浮培养,经过摇瓶无血清培养扩增,持续监测葡萄糖消耗情况,最终检测抗IBDV抗体的表达量。结果显示,悬浮驯化培养的CHO细胞能够在无血清培养基中稳定生长,生产周期短,接种密度为4.8×10~5cells/m L,无血清单细胞悬浮培养120 h后最大活细胞密度可达6.0×10~6 cells/m L,相同体积下抗体表达量较贴壁生长的高3倍,平均每个细胞每24 h表达量达到15 pg^20 pg。以上结果表明,贴壁生长的CHO细胞经过悬浮适应,不仅可以在无血清培养条件下快速生长,而且细胞对葡萄糖的利用率高,抗体表达量高。本研究筛选获得的细胞株节省了工艺生产中原料成本,操作方便,减少污染,易于放大,为工业化大批量生产奠定了基础。

脑血管后遗症重症肺炎42例使用呼吸湿化治疗仪护理体会

脑血管疾病是危害我国人民健康的常见慢性病之一。常引发患者肢体瘫痪、吞咽困难,甚至意识丧失,因此患者多需长期卧床。长期卧床患者容易发生误吸、排痰不畅、肺功能差、反复发生肺部感染等繁杂的并发症,严重威胁患者生命健康。近年来,有临床研究显示,对脑血管后遗症肺部感染患者实施湿化呼吸治疗仪辅助治疗,同时结合标准化措施护理气道,能够有效减少患者鼻腔部出现死腔现象,改善患者的呼吸通气效率,

重症肺炎患者采用高流量湿化仪及无创呼吸机吸氧对比分析

重症肺炎病情危重,进展快,并可导致严重的并发症,加重经济负担,其主要表现为咳嗽、气喘、呼吸困难加重,后期可出现脑水肿、脑疝表现,但常规吸氧难以纠正。普通气泡式氧气湿化所吸人氧气的湿度不够,易导致鼻咽部不舒适,痰液排除效果较差;应用无创呼吸机治疗重症肺炎的不良反应多,患者依从性差。近年来发现,高流量湿化仪可以弥补以上不足,成为非高碳酸血症的重症患者供氧的选择之一,但是与无创呼吸机相比,其疗效仍有争议。2016-07至2018-07对重症肺炎患者60例分别采用高流量湿化吸氧与无创呼吸机治疗,并对相关指标进行比较。

基于人脸和声纹的多生物特征融合技术研究

生物特征认证技术作为一门新兴技术现已应用于多个领域,然而单一模态的生物特征认证技术易受外界因素影响,为了提高身份认证的鲁棒性和安全性,文中提出一种基于最小最大概率机的多生物特征融合算法。该方法首先对人脸和声纹分别进行特征提取及匹配,然后在匹配层对两种单生物特征的匹配得分值进行了融合。通过在Vidtimit多模态库上的实验结果表明,融合系统的等错误率降低到0.97%,证明了该融合算法的有效性。

肥胖患者行非体外循环冠状动脉旁路移植术后低氧血症危险因素分析

目的探讨肥胖患者行非体外循环冠状动脉旁路移植(CABG)术后低氧血症的相关危险因素。方法连续入选2018年11月至2019年11月在北部战区总医院心血管外科择期行单纯非体外循环CABG手术的肥胖患者179例,根据术后是否发生低氧血症将全组患者分为低氧血症组(n=62)与非低氧血症组(n=117),记录并分析两组年龄、性别、合并疾病、超声心动图指标、实验室检测结果及围术期参数,比较两组各项指标的差异性。对具有统计学意义的指标进行多变量logistic回归分析,得出肥胖患者行非体外循环CABG术后低氧血症的独立危险因素。结果共62例患者术后发生低氧血症,发生率为34.6%(62/179)。低氧血症组与非低氧血症组的平均年龄分别[(62.9±5.9)岁比(60.0±9.4)岁,P=0.026],吸烟史占比(58.1%比37.6%,P=0.009),糖尿病占比为(56.5%比39.3%,P=0.028)相比,差异有统计学意义。两组的左心室射血分数(LVEF)[(54.4±5.6)%比(56.6±4.2)%,P=0.003],间接胆红素(TBIL)[(9.9±4.1)mmol/L比(8.8±3.1)mmol/L,P=0.036],总胆红素(IBIL)[(6.7±2.8)mmol/L比(5.6±2.2)mmol/L,P=0.007],N末端B型利钠肽原(NT-ProBNP)[389.0(184.9,780.5)pg/ml比190.6(75.2,327.4)pg/ml,P<0.001]相比,差异有统计学意义,两组之间的其他因素差异无统计学意义(P>0.05)。单因素分析显示,年龄、合并糖尿病、吸烟史、LVEF、TBIL、IBIL、NT-ProBNP、术后血红蛋白等8个因素具有统计学意义(P<0.05),多变量logistic回归分析显示,肥胖患者行非体外循环CABG术后低氧血症的独立影响因素分别是吸烟史、糖尿病、术后血红蛋白。结论吸烟史、糖尿病、术后血红蛋白是肥胖患者行非体外循环CABG术后低氧血症的独立影响因素。

老年重症肺炎应用湿化呼吸治疗仪的护理体会

目的:研究并总结湿化呼吸治疗仪应用于老年重症肺炎患者的护理要点。方法:选取2015年1月-2016年7月期间,我院收治的采用湿化呼吸治疗仪治疗的老年重症肺炎患者作为研究对象。采用标准化方式护理气道,主要护理内容包括:高流量氧疗,持续湿化气道,超声雾化药物,指导患者有效咳嗽,扣背辅助患者排痰,吸痰等,总结对于老年重症肺炎患者应用呼吸湿化治疗仪结合标准化方式护理气道的护理要点。结果:对于老年重症肺炎患者应用呼吸湿化治疗仪结合标准化方式护理气道的效果较好。患者的症状明显缓解,证明呼吸湿化治疗仪结合标准化方式护理气道是一项有价值的辅助方法。结论:对于采用湿化呼吸治疗仪方式治疗老年重症肺炎的患者,在其治疗期间采用呼吸湿化治疗仪结合标准化方式护理气道,呼吸困难症状明显缓解,有效加快了患者的恢复进程,值得在临床上推广及应用。

冷冻消融迷宫术治疗风湿性二尖瓣病变合并心房颤动及巨大左心房的安全和有效性

目的:评估冷冻消融迷宫手术和二尖瓣手术治疗风湿性二尖瓣病变合并心房颤动及巨大左心房患者的安全性和有效性。方法:选取2014年10月至2018年6月,在我院行冷冻消融迷宫手术的心房颤动合并风湿性二尖瓣病变的162例患者,分为两组:大左心房组(LAD≥60 mm)62例,非大左心房组(LAD<60 mm)100例,于出院时,术后1、3、6、9、12、24个月进行随访。用倾向性评分(PSM)的方法匹配后对比其安全性及疗效指标。结果:大左心房组有1例患者(0.6%)在围术期死亡,其余患者完成2年随访。安全性指标:体外循环时间、主动脉阻断时间、术中出血量间,差异无统计学意义(P>0.05),应用临时起搏器比例,差异有统计学意义(P<0.05);早期并发症总发生率:两组分别为18.2%(8/44)和11.1%(5/45),差异无统计学意义(P>0.05);术后疗效指标:两组术后窦性心律恢复率:两组分别为79.5%(35/44)和84.4%(38/45),左心房收缩功能恢复率:术后2年两组分别为68.2%(30/44)和68.9%(31/45),组间,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:冷冻消融迷宫手术和二尖瓣手术治疗风湿性二尖瓣病变合并心房颤动及巨大左心房安全性较好,近期疗效满意。

跨境电商物流成本控制的研究

目前,经济全球化趋势的不断增强,经济的飞速发展,科技水平的不断进步以及我国的"一带一路"倡议提出后顺利得到了沿线许多国家的积极响应,这些都为我国跨境电子商务企业的兴起与蓬勃发展创造了良好的条件。然而,对于我国的跨境电子商务企业来说,跨境物流成本是一个影响跨境电子商务企业的销售利润和消费者体验的关键因素。这也就意味着跨境电商企业需要对物流成本的控制引起高度重视,需要综合考虑各种因素,结合自身情况,制定一个具有企业特色、适合本企业自身发展状况的跨境物流策略,以此来实现对于物流的成本的控制。本文对我国目前跨境电商企业在控制物流成本方面所面临的困境做出了分析,并提出了一些相应的解决措施。

解决企业培训难题的关键

企业培训一直是人力资源主管面临的一个难题:员工对待培训的态度、企业对培训的重视程度、培训效果的评估等都让人力资源主管焦头烂额,在某企业的人力资源体验会上,很多企业的人力资源主管都表示在这方面力不从心。其实,这些难题并非无法解决,只要掌握以下几点,有关企业培训的问题都会迎刃而解。

改善邮政服务 要抓根本抓关键

优质服务是企业在激烈的市场竞争中立于不败之地的重要法宝之一。国内外许多知名企业如中国的海尔集团、美国的宝洁公司等无不将“为客户提供一流服务”作为企业的根本宗旨。中国邮政作为百年老企由于受长期计划经济下传统体制的影响,无论从人员素质、服务质量、服务方式、服务手段。

掌握开启农村邮储市场的金钥匙——河北省沧县邮政分局经营之道

地处河北省沧州市区的沧县邮政分局,由于历史的原因形成了有县无城,没有现实各业的现状,自邮电分营以来,沧县分局立足实际,因地制宜,积极开拓农村市场,努力实现邮政储蓄余额的快速增长。邮储余额也由1998年分营时的5500万元上升到2001年的1.75亿元。列沧州各县(市)局首位。沧县分局邮储余额增长如此之快,得益于以下举措。