核壳温敏型药物载体负载槲皮素对SiO_(2)诱导的大鼠巨噬细胞极化的抑制作用

目的:探讨核壳温敏型药物载体负载槲皮素(QC@mSiO_(2)-NIPAM)对SiO_(2)诱导的巨噬细胞极化的作用。方法:大鼠肺泡巨噬细胞NR8383分为空载体组、SiO_(2)+空载体组、SiO_(2)+载体药组,分别给予25μmol/L mSiO_(2)-NIPAM,25μmol/L mSiO_(2)-NIPAM+50 mg/L SiO_(2)混悬液,25μmol/L QC@mSiO_(2)-NIPAM+50 mg/L SiO_(2)混悬液,均孵育24 h。采用Western blot法、免疫细胞化学染色检测M1型、M2型巨噬细胞标记蛋白及MAPK信号通路蛋白的表达。结果:与空载体组比较,SiO_(2)+空载体组M1型巨噬细胞标记蛋白(iNOS、IL-1β、TNF-α),M2型巨噬细胞标记蛋白(精氨酸酶1、IL-10、TGF-β1),MAPK信号通路蛋白(p-ERK1/2、p-JNK、p-P38)表达上调(P<0.05);与SiO_(2)+空载体组比较,SiO_(2)+载体药组M1、M2型巨噬细胞标记蛋白及MAPK信号通路蛋白表达均下降(P<0.05)。结论:QC@mSiO_(2)-NIPAM可能通过调控MAPK信号通路抑制SiO_(2)诱导的NR8383细胞极化。

QC@mmSiO_(2)-NIPAM对矽肺纤维化病变中M1型巨噬细胞极化的调节作用

目的 探讨负载槲皮素的核壳温敏型药物载体(QC@mmSiO_(2)-NIPAM)通过Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路对矽肺纤维化形成过程中M1型巨噬细胞极化及炎症反应的作用与机制。方法 C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、mSiO_(2)-NIPAM低剂量组(50mg/kg)、中剂量组(100mg/kg)、高剂量组(200mg/kg),每组5只小鼠,苏木素-伊红(HE)染色法观察不同浓度mmSiO_(2)-NIPAM溶液对小鼠各脏器的影响。C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、矽肺模型组(SiO_(2)悬液100mg/kg)、QC@mmSiO_(2)-NIPAM组(SiO_(2)悬液100mg/kg,QC@mmSiO_(2)-NIPAM溶液100mg/kg),每组5只小鼠,HE及Van Gieson(VG)染色法观察各组小鼠肺组织的形态学变化,Western blot法及免疫荧光染色法检测I型胶原蛋白、M1型巨噬细胞标记蛋白以及TLR4/NF-κB信号通路蛋白的表达。结果 HE及VG染色结果显示,各浓度mmSiO_(2)-NIPAM溶液对小鼠各脏器均无影响,矽肺模型组小鼠肺组织有明显的矽结节形成,并可见粗大的胶原纤维分布,给予QC@mmSiO_(2)-NIPAM溶液灌胃治疗后,矽结节明显减少,且胶原沉积显著下降。Western blot结果显示,矽肺模型组小鼠肺组织内I型胶原蛋白、M1型巨噬细胞特异性标记蛋白诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、TLR4/NF-κB信号通路蛋白TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、p-核因子-κB抑制蛋白α(IκBα)、p-NF-κB表达水平明显上调;而QC@mmSiO_(2)-NIPAM组小鼠肺组织内I型胶原蛋白、M1型巨噬细胞标记蛋白、TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达水平明显降低。免疫荧光染色法结果显示,矽肺模型组小鼠肺组织内的iNOS与TLR4蛋白共表达。结论 QC@mmSiO_(2)-NIPAM可能通过调控TLR4/NF-κB通路抑制M1型巨噬细胞极化与炎症因子表达,从而发挥抗矽肺纤维化的作用。