青蒿琥酯抑制人结肠癌LOVO细胞Wnt/β-catenin通路增强顺铂抗肿瘤活性

目的探讨青蒿琥酯(ART)能否增强顺铂(CDDP)对人结肠癌LOVO细胞的杀伤作用及可能机制。方法通过噻唑蓝法(MTT)计算ART和CDDP对LOVO细胞的IC50值后,分为对照组(等体积PBS)、ART组(10 mol/L)、CDDP组(1 mol/L)和ART(10 mol/L)+CDDP(1 mol/L)联合处理组,免疫荧光检测LOVO细胞β-catenin的表达,荧光素酶报告基因检测TCF-1活性,MTT法及克隆形成实验检测细胞的增殖情况;流式细胞术、比色法和免疫印迹检测细胞凋亡情况。结果 CDDP(1μmol/L)作用48 h后,LOVO细胞β-catenin表达升高且入核,且核内TCF-1活性增强。该现象可被联合使用的ART(10μmol/L)所逆转,同时ART可增强CDDP对LOVO细胞的生长抑制和凋亡诱导。与CDDP单独作用相比,联合使用ART后细胞活力由(89.74±12.13)%降至(47.56±4.15)%,凋亡率(9.25±2.16)%升高至(37.64±9.06)%,Caspase3活性由(130±28)%升高至(310±52)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ART能够增强CDDP对LOVO细胞的杀伤作用,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin通路及诱导细胞凋亡有关。

白介素-6在人结肠癌LoVo细胞奥沙利铂耐药中的作用

目的探讨白介素-6(IL-6)在人结肠癌细胞株奥沙利铂(L-OHP)耐药中的作用。方法通过L-OHP诱导建立人结肠癌L-OHP耐药细胞株Lo Vo/L-OHP,分别用MTT法、免疫荧光及蛋白印迹检测细胞生长、IL-6表达。L-OHP联合IL-6或IL-6R抗体作用后,MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖。结果与Lo Vo细胞相比,Lo Vo/L-OHP细胞的耐药指数为10.4,IL-6表达上调。阻断IL-6可增强L-OHP对耐药细胞的杀伤作用,但阻断IL-6R后耐药细胞对L-OHP敏感性无明显改变。结论 IL-6过表达与Lo Vo细胞L-OHP耐药相关,阻断IL-6而非IL-6R可增强耐药细胞对L-OHP敏感性。

基于cfb和scpb基因的无乳链球菌PCR检测方法比较及临床应用

目的比较基于cfb和scpb基因检测无乳链球菌(GBS)的两种PCR方法,建立合理的实时荧光PCR检测体系,实现快速检测生殖道无乳链球菌的目的。方法通过对60株临床分离的无乳链球菌和15株非无乳链球菌进行PCR扩增,对比和验证cfb和scpb基因的敏感性和特异性,选择检测性能更好的基因为靶标,建立实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测体系。对100份宫颈拭子、精液等常见临床标本进行检测,检测结果与传统的培养法进行比较。阳性率的比较采用卡方检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果cfb和scpb基因的特异性均为100%,敏感性分别为98.3%、66.7%,差异有统计学意义(P<0.005)。基于cfb基因的real-time PCR检测100份GBS临床样本的阳性率为35%,高于培养法(30%),差异无统计学意义,但这100份标本中有7份real-time PCR法扩增阳性但未培养出无乳链球菌。结论基于cfb基因的real-time PCR法检测GBS具有直接、快速、简便、高特异性等特点,且敏感性高于常规培养法,可应用于多种临床标本的检测,在临床上具有较大的应用前景。