延时摄像在人类辅助生殖技术中的应用

体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)是广泛应用于不孕治疗的人类辅助生殖技术之一。由于单次促排卵治疗可以获得多个胚胎,临床上如何选择具有发育潜能的胚胎进行移植,以保证在一定临床妊娠率的前提下减少移植胚胎数目,一直是辅助生殖技术研究的一大热点。目前评价胚胎质量的方法主要是选取特定的时间点观察胚胎,依据形态学指标对胚胎质量进行评估。而近年来出现的胚胎延时摄像技术(time-lapse)能够对胚胎体外发育过程进行全程监控,获取胚胎发育的动态信息,建立胚胎行为学指标从而更有效地评估胚胎的发育潜能。延时摄像技术在临床上的应用优势正在逐渐彰显。

封闭式载杆玻璃化冷冻和程序化冷冻的临床效果比较

目的回顾性分析封闭式玻璃化冷冻技术与程序化冷冻技术在胚胎冷冻解冻及移植临床效果的差异。方法首先比较2010年11～12月采用三种开放式载杆和一种封闭式载杆对卵裂期胚胎进行的玻璃化冷冻。然后对2010年11月至2011年11月采用封闭式载杆行玻璃化冷冻和2009年1月至2010年12月采用程序化冷冻的数据进行对比,比较两组的复苏率、着床率和临床妊娠率等。结果三种开放式载杆与封闭式载杆的复苏率及着床率、临床妊娠率无显著性差异(P>0.05)。封闭式玻璃化冷冻和程序化冷冻两种冷冻方法比较显示:卵裂期胚胎采用玻璃化冷冻共2,61 9周期,解冻6,627枚胚胎,复苏6,276枚,复苏率为94.7%(6,276/6,627),1,522枚胚胎着床,着床率为24.3%(1,522/6,276),共1,1 35周期获得临床妊娠,移植妊娠率为43.3%(1,1 35/2,619),均显著高于程序冷冻组(P<0.05),后者的复苏率、着床率和移植妊娠率分别为59.9%(7,797/1 3,01 6),20.6%(1,603/7,797)和39.3%(1,224/3,11 7)。玻璃化冷冻囊胚共331周期,解冻677枚胚胎,复苏589枚,复苏率为87.0%(589/677),21 4枚胚胎着床,着床率为36.3%(214/589),168周期获得临床妊娠,移植妊娠率为50.8%(1 68/331),均显著高于程序冷冻组(P<0.05),后者共114周期,解冻21 7枚胚胎,140枚复苏,复苏率为64.5%(140/217),着床率为22.1%(31/140),妊娠率23.7%(27/114)。结论采用封闭式载杆玻璃化冷冻胚胎是一种较程序化冷冻更有效、更安全的胚胎冷冻方法。

降钙素基因相关肽对卵母细胞体外成熟的影响

目的：探讨降钙素基因相关肽（calcitoningene．relatedpeptide，CGRP）对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。方法：6周龄雌性昆明小鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素（pregnantmareserumgonadotropin，PMSG）10U48h后处死，取出卵巢收集卵母细胞以30～40枚／孔的密度接种于培养板内，以不同浓度CGRV（0，10^-10，10^-9，10^-9mol／L）处理24h后检测生发泡破裂（germinalvesiclebreakdown，GVBD）率和第一极体（polarbodyI，PBI）排出率；收集、培养人卵巢颗粒细胞，以不同浓度CGRV（0，10^-10，10^-9，10^-8mol／L）处理24h后测定颗粒细胞内cAMP浓度。结果：外源性CGRP处理小鼠卵母细胞可浓度依赖性地降低GVBD率及PBI排出率；外源性CGRP处理人颗粒细胞，可浓度依赖性地增高细胞内cAMP浓度。结论：CGRP抑制小鼠卵母细胞成熟可能与其增加颗粒细胞内cAMP浓度有关。

卵母细胞透明带异常及其对助孕结局影响的研究进展

人类透明带(zona pellucida,ZP)是在卵泡发生过程中由卵母细胞和颗粒细胞共同分泌的由ZP1-ZP4四种糖蛋白分子组成的高度有序结构,它与卵母细胞的成熟、受精、胚胎发育及妊娠结局等预后紧密关联。许多生殖中心实验室发现有些患者的卵出现全部或部分的透明带异常,而且不同实验室发现的透明带异常类型各异。研究发现这些透明带异常与卵母细胞受精、胚胎发育及临床结局有一定的相关性。本文综述了关于透明带异常及其对卵母细胞受精、胚胎发育潜能和临床结局的影响的研究进展。

体外受精-胚胎移植中完全受精失败的原因分析

受精是生命起源至关重要的一个步骤。在辅助生殖的过程中,完全受精失败发生具有其复杂性和不可预见性。受精失败常伴随着一些胞间调控机制异常,其中,可能阻滞在与精子穿越卵冠丘复合体、精子-透明带结合/穿透、精子-卵膜结合、卵子激活、精子去浓缩或原核形成等任一阶段。通过卵胞浆内单精子注射可以避免大部分受精失败现象,但某些患者仍无法成功受精,即使采用辅助人工激活也无法完全避免其发生。对于在辅助生殖过程中完全受精失败患者,结合其卵子成熟情况、精子质量及相关检测结果,在后续周期调整临床方案可有效避免受精失败的再次发生。

两种激素启动方案对多囊卵巢综合征患者行卵母细胞体外成熟周期治疗效果的比较

目的比较两种激素启动方案对多囊卵巢综合征（PCOS）患者行未成熟卵母细胞体外成熟（IVM）的治疗效果。方法将2010年4月至2010年8月在本院行IVM周期治疗的PCOS患者随机分为短期FSH刺激组（A组），共20个周期；及HCG刺激组（B组），共31个周期。比较两组患者的获卵数、卵子成熟率、受精率、卵裂率、优胚率、着床率、取卵妊娠率、移植妊娠率和流产率有无差异6结果两组的获卵数、卵子成熟率、卵裂率、流产率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。短期FSH刺激组受精率为73．9％，优胚率为35．4％，着床率为12．5％，取卵妊娠率为25．0％，移植妊娠率为25．O％；HCG刺激组受精率为80．3％，优胚率为49．8％，着床率为31．5％，取卵妊娠率为54．8％，移植妊娠率为63．O％，其差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论行IVM周期治疗的PCOS不育患者，采用HCG刺激的方案优于短期FSH刺激的方案，其疗效更好，具有较好的应用前景。

卵母细胞体外成熟培养技术治疗多囊卵巢综合征患者的初步探讨

目的研究通过未成熟卵母细胞体外成熟（IVM）技术治疗多囊卵巢综合征（PCOS）患者的效果。方法对PCOS患者在月经周期3～4d开始给予小剂量（100—150IU）FSH刺激3d。周期8～10d，当出现直径为10—14mm卵泡，子宫内，膜厚度〉5mm，阴道B超引导下穿刺获取不成熟卵母细胞。将其行体外成熟培养28～31hrs，待排出第一极体后行常规单精子卵胞浆内显微注射（ICSI）-胚胎移植治疗。结果12例体外成熟培养周期中，3例获得临床妊娠，妊娠率为25．0％。结论未成熟卵母细胞体外成熟培养技术是使PCOS患者获得妊娠的可行方法。

单基因病临床意义不明变异实施植入前遗传学检测的策略研究

目的探讨单基因病临床意义不明变异(variants of uncertain significance,VUS)实施胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)的策略。方法招募2018年至2020年期间因携带VUS前来中信湘雅生殖与遗传专科医院进行生育咨询的单基因病病例,根据美国医学遗传学与基因组学学会(American College of Medical Genetics and Genomics,ACMG)发布的《ACMG遗传变异分类标准与指南》(以下称ACMG指南)及贝叶斯分析法,对VUS致病性进行重分析,分类为"致病/可能致病变异""倾向于致病的VUS""致病性仍不明确的VUS"及"倾向于良性的VUS"。在夫妻双方自主自愿并充分理解风险的原则下,对VUS升级为"致病/可能致病变异"及分类为"倾向于致病的VUS"的家系实施胚胎植入前单基因遗传学检测(preimplantation genetic testing for monogenic disorders,PGT-M)。追踪随访妊娠胎儿、出生孩子的生长发育状况。结果①16例单基因病家系共检出25个变异,其中1个为致病变异(pathogenic variation,P),3个为可能致病变异(likely pathogenic variation,LP),21个为VUS。重分析后,11个VUS升级为LP(52.4%),7个重分类为"倾向于致病的VUS"(33.3%),2个VUS重分类为"致病性仍不明确的VUS"(9.5%),1个VUS重分类为"倾向于良性的VUS"(4.8%)。②14例单基因病家系进入PGT-M,包括VUS均升级为LP的家系9例,携带1个LP/P及1个"倾向于致病的VUS"家系2例,只携带"倾向于致病的VUS"家系3例。③PGT-M术后出生12个健康婴孩。根据疾病发病年龄随访出生后代,8个子代未表现出与先证者相同的症状,4个子代暂未见疾病症状,因尚未到发病年纪还需要持续随访。结论针对临床上的VUS,需要按ACMG指南主动寻找新证据并进行重新分析。升级为P/LP的VUS以及升级为倾向于致病的VUS可以在患者知情同意前提下开展PGT-M,为VUS携带者夫妇降低生育单基因病患儿的风险。