基于DGKα-PA信号轴探讨扶正祛邪方对人肺癌H292细胞增殖、迁移的影响

目的探讨扶正祛邪方调节DGKα-PA信号轴对人肺癌H292细胞增殖、迁移的影响及可能机制。方法将H292细胞分为对照组和扶正祛邪方低、中、高浓度组,扶正祛邪方低、中、高浓度组分别予3、6、12 mg/mL扶正祛邪方干预48 h,对照组予等体积培养基常规培养。克隆形成实验观察H292细胞增殖情况,细胞划痕实验、Transwell实验观察细胞迁移和侵袭情况,ELISA检测细胞磷脂酸(PA)含量,Western blot检测细胞二酰甘油激酶α(DGKα)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT和雷帕霉素机械靶蛋白(mTOR)表达。结果与对照组比较,扶正祛邪方低、中、高浓度组细胞克隆形成数明显减少(P<0.05,P<0.01),细胞迁移率明显降低(P<0.01),侵袭细胞数明显减少(P<0.05,P<0.01),细胞PA含量明显减少(P<0.01),DGKα、p-AKT、mTOR蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),且以扶正祛邪方高浓度组抑制作用最明显(P<0.01)。结论扶正祛邪方可能通过DGKα-PA信号轴抑制人肺癌H292细胞增殖、迁移,其机制与抑制下游AKT/mTOR信号通路有关。

六神丸逆转人结肠癌耐阿霉素细胞株Lovo/Dox机制的初步研究

目的初步探讨六神丸逆转人结肠癌耐阿霉素细胞株Lovo/Dox的机制。方法设置对照组、阿霉素组(Dox)、六神丸组和阿霉素与六神丸联合用药组。用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测六神丸对人结肠癌耐药细胞株(Lovo/Dox、HCT116/L-OHP、Caco2/Dox)的影响;蛋白质免疫印迹法(Western Blotting)检测耐药蛋白P-gp、BCRP以及相关凋亡蛋白caspase-3、caspase-9、Cytochrome C和抑癌蛋白p53在人结肠癌Lovo/Dox细胞中的表达;免疫荧光实验检测P-gp的荧光表达。结果六神丸作用于人结肠癌3种耐药细胞24 h后,CCK-8结果显示其可抑制3种人结肠癌细胞株的活性,其中抑制人结肠癌耐阿霉素细胞株Lovo/Dox的效果最明显。六神丸联合阿霉素可上调caspase-3、caspase-9、p53蛋白表达水平以及减弱P-gp蛋白及荧光表达。结论六神丸可逆转人结肠癌耐阿霉素细胞株Lovo/Dox的P-gp表达,可能是通过激活相关凋亡途径和抑癌蛋白而引起该细胞株凋亡。

中药调节肠道肿瘤微环境中细胞因子的研究进展

结直肠癌是常见的胃肠道恶性肿瘤。在基因、饮食和环境等多种致病因素的综合作用下,结直肠黏膜的上皮组织转化成恶性肿瘤,其发病率及病死率分别位于全球恶性肿瘤的第三和第四位,并呈逐年上升趋势。在肿瘤的发生、发展过程中,肿瘤微环境起至关重要的作用,而肠道肿瘤微环境中的细胞因子来自微环境中的免疫细胞和肿瘤细胞,其可通过多种途径影响结直肠癌的发生、发展。其中,针对肠道肿瘤微环境中细胞因子的研究是抗结直肠癌免疫治疗的重要环节,中药因具有免疫抑制和免疫促进的双向调节作用等优势已在肿瘤治疗的研究中逐渐受到重视。因此,未来对中药靶向肠道肿瘤微环境中细胞因子的研究具有重要意义。

脂代谢重编程调控免疫微环境抗肿瘤的研究进展

目前,激活宿主抗肿瘤免疫应答的免疫治疗是肿瘤治疗领域的热点。但脂代谢重编程介导的微环境免疫抑制仍阻碍着肿瘤免疫治疗的进展。肿瘤细胞为满足自身快速增殖的需求而改变生物合成方式及代谢信号,其代谢产物可通过多种方式影响免疫细胞的激活及抗肿瘤免疫应答的发生。本文将从微环境条件下肿瘤脂代谢产物对免疫微环境的影响及治疗进展进行综述,以期为抗肿瘤治疗提供新的发展思路。

蟾毒灵对人结肠癌HCT8细胞凋亡及钙离子代谢的影响

目的探讨蟾毒灵对人肠癌HCT8细胞凋亡及钙离子代谢的影响及其机制。方法采用CCK-8法和Annexin V/PI双染凋亡试剂盒检测蟾毒灵对人肠癌HCT8细胞增殖和凋亡的影响,Ca^(2+)荧光探针Fluo-3 AM标记HCT8细胞内Ca^(2+)并检测蟾毒灵对细胞内Ca^(2+)的影响。结果蟾毒灵抑制人结肠癌HCT8细胞增殖呈剂量-时间依赖性;诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性;且蟾毒灵浓度越高,细胞内Ca^(2+)浓度越高。结论蟾毒灵诱导人结肠癌HCT8细胞凋亡,可能与细胞内Ca^(2+)代谢相关。

蟾毒灵对裸鼠人结肠癌血管新生相关VEGFA蛋白表达的影响

目的:通过实验研究观察蟾毒灵对人结肠癌血管新生的作用。方法:CCK-8法检测不同浓度蟾毒灵对人脐静脉内皮细胞增殖的影响;构建裸鼠人结肠癌移植瘤模型,随机分为对照组(0.9%生理盐水)、蟾毒灵组(1.5 mg·kg^(^(-1))·d^(-1)),药物干预4周后,观察各组裸鼠移植瘤瘤体生长情况,Western blot检测瘤体组织中血管内皮生长因子A(VEGFA)的表达。结果:蟾毒灵在2.5~320.0 ng/ml的浓度区间内,其对人脐静脉内皮细胞的生长抑制率为1.67%~95.40%,IC50为20.86 ng/ml,呈剂量依赖性。蟾毒灵组裸鼠移植瘤瘤体明显小于对照组(P<0.01),蟾毒灵组瘤体中VEGFA蛋白的表达明显低于对照组(P<0.05)。结论:蟾毒灵可抑制血管内皮细胞增殖,抑制裸鼠人结肠癌移植瘤瘤体的生长,其机制可能与下调VEGFA蛋白的表达有关。

蟾毒灵对人结肠癌HCT116细胞有氧糖酵解的影响

目的研究蟾毒灵对人结肠癌细胞株HCT116有氧糖酵解的影响。方法将人结肠癌细胞株HCT116分为蟾毒灵组和对照组,蟾毒灵组给予不同浓度的蟾毒灵(5,10,20,40 nmol·L^(-1)),对照组给予等量不含蟾毒灵的完全培养基,孵育48 h后,用试剂盒法测定细胞内ATP水平和细胞乳酸水平;用蛋白质印迹法检测细胞能量代谢相关蛋白C-myc的表达水平。结果 4个浓度(5,10,20,40 nmol·L^(-1))蟾毒灵对人结肠癌细胞株HCT116细胞内ATP水平的抑制率分别为91.69%,78.00%,68.55%,54.03%;这4个浓度蟾毒灵对人结肠癌细胞株HCT116细胞乳酸生成的抑制率分别为89.04%,77.27%,59.66%,47.52%;这4个浓度蟾毒灵组的人结肠癌细胞株HCT116细胞C-myc蛋白表达比值分别为0.95,0.84,0.73,0.68;这4个浓度蟾毒灵组的人结肠癌细胞株HCT116细胞乳酸脱氢酶A(LDH-A)的表达比值分别为0.95,0.90,0.79,0.60,上述所有指标与对照组(1.00)相比,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论蟾毒灵能抑制结肠癌细胞株HCT116的有氧糖酵解,其机制可能与下调C-myc蛋白的表达有关。