黄胸蓟马化学感受蛋白基因ThawCSP1克隆与表达分析

化学感受蛋白(chemosensory proteins,简称CSPs)除了具有感知化学分子的功能,还与昆虫个体生长与发育、生殖、杀虫剂抗性等密切相关。黄胸蓟马(Thrips hawaiiensis)广泛分布于亚洲热带、亚热带和北美南部,是一种重要的农业和园艺作物害虫。本研究克隆鉴定了黄胸蓟马化学感受蛋白基因ThawCSP1开放阅读框(ORF),然后利用MEGA 7.0软件以邻接法构建ThawCSP1系统发育树,最后利用RT-qPCR、免疫荧光、免疫电镜技术,从mRNA和蛋白水平分析黄胸蓟马ThawCSP1基因的表达情况。结果表明,黄胸蓟马ThawCSP1基因(GenBank登录号:OQ730210)ORF为405 bp,编码134个氨基酸,预测蛋白分子量为15.181 ku。分子进化树显示ThawCSP1与同属缨翅目的西花蓟马、花蓟马和牛角花齿蓟马CSPs序列同源性分别为79.55%、80.30%、76.52%。ThawCSP1基因在黄胸蓟马各个发育阶段均有表达,其中羽化1、5、10 d的成虫相对表达量最高,其次是1龄、2龄若虫和羽化15 d的成虫,蛹期的表达量最低;在黄胸蓟马成虫不同组织中,ThawCSP1表达量最高的是触角,其次是足和头部,分别是腹部表达量的222.33、181.60、79.03倍。免疫荧光和免疫电镜观察也表明,ThawCSP1蛋白在黄胸蓟马触角高表达。研究结果将为解析ThawCSP1基因功能提供试验依据,也为基于昆虫CSPs研发高效引诱剂提供了理论依据。

生产建设项目水土保持监测综述

本文简述了我国生产建设项目水土保持的监测现状并分析了目前水土保持监测存在的主要问题,对水土保持常规监测技术方法与新技术方法的优缺点进行了对比分析并提出加强我国水土保持监测的有效措施。

黄胸蓟马触角感器的形态和分布

【目的】本研究旨在明确黄胸蓟马Thrips hawaiiensis各个发育阶段触角感器类型、形态和分布。【方法】运用扫描电镜技术观察黄胸蓟马雌雄成虫、若虫、预蛹、蛹触角的形态结构以及触角上感器类型、形态和分布。【结果】黄胸蓟马成虫触角由柄节、梗节和鞭节3个部分组成,其中长的鞭节分为5个鞭小节(Ⅰ-Ⅴ)。雌成虫触角平均长度为263.70±5.78μm,雄成虫触角平均长度为225.79±8.92μm。触角长度随着虫龄的增长而显著增加。雌雄成虫触角上共发现B hm氏鬃毛、钟形感器、刺形感器(Ⅰ和Ⅱ)、毛形感器、锥形感器(Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ)、腔锥形感器和腔形感器7种触角感器以及微毛和表皮齿2种表皮结构。预蛹触角呈锥形,无明显分节,可以自由活动,平均长138.81±6.29μm。蛹触角紧贴头胸背部,圆柱形、无明显分节,不能自由活动,平均长213.07±6.30μm。1龄和2龄若虫触角由柄节、梗节和鞭节组成,其鞭节分为4个鞭小节(Ⅰ-Ⅳ),触角平均长度分别为122.48±1.72和134.58±3.75μm。1龄若虫触角上分布有B hm氏鬃毛、钟形感器、刺形感器(Ⅰ和Ⅱ)、锥形感器(Ⅰ和Ⅱ)、腔锥形感器、腔形感器、毛形感器和特殊结构感器共8种类型感器,表面分布表皮齿和舌状结构2种表皮结构;2龄若虫触角上分布有B hm氏鬃毛、钟形感器、刺形感器(Ⅰ和Ⅱ)、毛形感器、锥形感器(Ⅰ和Ⅱ)、腔锥形感器、腔形感器7种类型感器以及表皮齿1种表皮结构。【结论】本研究较全面地对黄胸蓟马各个发育阶段的触角及触角感器形态和分布进行了观察和描述,并对其功能进行了推测。研究结果为进一步研究蓟马类昆虫触角感器的生理功能奠定了理论基础。

西花蓟马不同RNA干扰技术比较研究

【目的】西花蓟马Frankliniella occidentalis (Pergande)是一种重要的外来入侵害虫,其繁殖能力强、寄主范围广、抗药性强,给我国蔬菜、花卉等经济作物造成了严重危害。本研究旨在评估膜饲喂和显微注射dsActin对西花蓟马Actin基因的沉默效率,以期为蓟马类等小型昆虫基因功能的研究提供方法和依据。【方法】通过膜饲喂和显微注射的方法将体外合成的dsActin导入西花蓟马二龄若虫体内,用RT-qPCR方法检测Actin基因的mRNA表达;通过单头饲养方法观察统计西花蓟马成虫体长、成虫翅膀或胸腹部畸形率及死亡率。【结果】dsActin膜饲喂后24、48、72 h,Actin基因的相对表达量分别为对照组的97%、91%和98%;通过显微注射将dsActin注入西花蓟马体腔,在注射后24、48、72 h,Actin基因的表达量分别为对照组的68%、56%和53%。注射dsActin的西花蓟马在第24~120 h死亡率为44%~98%,显著高于ds GFP对照组;此外,dsActin组个体体长仅为ds GFP对照组的90%,且翅膀或胸腹部出现畸形率为41%。【结论】显微注射dsActin能显著沉默西花蓟马Actin基因mRNA水平的表达,并引起西花蓟马个体不正常发育和死亡,从而建立蓟马类小型昆虫RNAi体系。

西花蓟马几丁质合成酶UAP基因克隆及功能分析

【目的】阐明几丁质合成通路中的关键基因UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶(UDP N-acetylglucosamine pyrophosphorylases,UAP)对西花蓟马Frankliniella occidentalis生长发育的影响。【方法】基于西花蓟马转录组数据,克隆验证了UAP基因的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)全长序列,命名为FoccUAP。利用RT-qPCR方法分析FoccUAP在各个组织和不同龄期的表达情况。最后通过向西花蓟马蜕皮24 h的2龄若虫显微注射dsUAP,检测沉默效率,观察其对西花蓟马生长发育的影响。【结果】FoccUAP基因开放阅读框全长1545 bp,编码514个氨基酸,预测蛋白分子量为56.738 kDa,具有Glyco-tranf-GTA-type Super family家族的保守结构域,与等翅目、蜚蠊目、直翅目和半翅目昆虫的UAP基因亲缘关系较近。FoccUAP基因在西花蓟马各个组织都有表达,在头部和腹部相对表达量最高,触角、胸部和足相对表达量较低。该基因在虫体生长发育的各个阶段均有表达,其中2龄幼虫、蛹以及羽化后24、48、168、240 h的成虫表达量分别是1龄幼虫的1.30、2.50、1.56、2.0、2.43和2.56倍。RNAi结果表明,注射dsUAP的西花蓟马羽化率(36.3%)和注射后120 h的存活率(5.0%)均显著低于dsGFP对照组,且注射dsUAP的西花蓟马成虫出现翅膀发育不完整、胸腹部皱缩不规则等畸形现象。【结论】FoccUAP基因对西花蓟马生长发育具有重要的作用。

高中语文教学中学生自主学习能力的培养

自主学习，是指学习主体有明确的学习目标，对学习内容和学习过程具有自觉的意识和反应的学习方式。在高中语文课堂教学过程中，要给学生大量的时间用于自主学习，培养学生良好的自学习惯，经常组织活动，在实践中提高学生的自主学习能力，真正实现素质教育，让学生成为课堂的主人。