鲈血清免疫球蛋白分离纯化及部分特性分析

采用硫酸铵盐析、透析和SephadexG 2 0 0凝胶过滤的方法纯化出鲈 (Lateolabraxjaponicus)血清免疫球蛋白 ,利用高效液相色谱 (HPLC)结合SDS PAGE的方法分析其性质。HPLC结果表明 :纯化得到的IgM在经巯基乙醇处理后解离形成轻链和重链两个亚单位 ,SDS PAGE确定其分子量分别为 72ku和 2 8ku。实验说明 ,HPLC的检测方法具有广阔的应用前景 ;而对鲈IgM的分析为鱼类免疫球蛋白的比较研究提供了基础资料。

黄鳝血清、肠黏液免疫球蛋白的分离纯化及部分特性分析

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-200凝胶层析等方法从黄鳝血清和肠道黏液中分离纯化出黄鳝血清和黄鳝肠黏液免疫球蛋白。SDS-PAGE分析表明,二者的理化性质相同;经β-巯基乙醇处理后解离形成重链和轻链两个亚单位,分子量分别为74 kD和29 kD。试验结果表明,黄鳝血清和肠黏液中存在免疫球蛋白,二者具有相同的层析和SDS-PAGE电泳特性。

绿茶提取物及表没食子儿茶素没食子酸酯对免疫细胞的作用研究

目的研究绿茶提取物和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对脾脏细胞增殖和巨噬细胞NO分泌的影响。方法采用MTT法检测脾脏细胞增殖变化,用G riess试剂法检测NO产量的变化。结果绿茶提取物和EGCG都能够促进脾脏细胞增殖,并能够协同conA刺激脾脏细胞的增殖;还能够抑制LPS激活的巨噬细胞RAW 264.7的NO产量。结论绿茶提取物和EGCG具有免疫调节和减轻炎症反应的有益作用。

反相HPLC色谱法测定盐芥和菠菜中的甜菜碱含量

本实验利用反相HPLC色谱法测定了盐芥和菠菜中的甜菜碱含量,实验分别以菠菜和盐芥的叶组织为材料,用去离子水提取甜菜碱.提取液经浓缩后依次通过阳离子交换树脂柱和阴离子交换树脂柱进行纯化,用NH4 OH洗脱阳离子交换树脂柱,洗脱液收集浓缩干后用磷酸盐流动相溶解.样品用C1 8反相色谱柱进行分离,流动相为5 0mmol/L的KH2 PO4 溶液(pH 4.5 6) ,色谱条件为0 .7ml/min ,192nm波长测定;此色谱条件能使甜菜碱与其它组分很好的分离,甜菜碱加样回收率达到90 %～98% .经测定,盐芥叶片中的甜菜碱含量为1.3 67mg/g ,菠菜叶片中的甜菜碱含量为1.65 6mg/g .

RP-HPLC法测定芦笋中黄酮类化合物芦丁的含量

以芦丁标准品为对照，利用反相高效液相色谱法对芦笋中黄酮类化舍物芦丁的含量进行定量测定。采用Agilent Eclipse XDB—C18色谱柱，柱温25℃，流动相由甲醇-水-磷酸（55：44．5：0．5）组成，流速为0．7mL/min，检测波长390nm。结果表明黄酮类化合物中各组分基线分离良好；进样量在0．07—0．7μg／20μL范围内，峰面积A与进样浓度C呈良好的线性关系，回归方程为A=15176C-10．388，相关系数R^2=0．9994；加样回收率为101．051％，RSD=3．306％；以保留时间和峰面积作精密度试验，RSD分别为0．199％和1．24％。该方法样品处理简单．准确度高．精密度好．适合于芦笋中芦丁含量的测定。

鲤鱼NOD1基因克隆与组织特异性表达分析

利用RT-PCR技术在鲤鱼(Cyprinus carpio)中首次克隆得到了NOD1基因编码序列全长。生物信息学分析发现,鲤鱼NOD1具有3个保守结构域和相应的保守位点,在进化中与草鱼亲缘关系最近;半定量RT-PCR分析NOD1基因在鲤鱼不同组织中分布发现,NOD1在头肾和血液中表达最高,在肌肉、皮肤和性腺中表达量最少;鳗弧菌(V.anguillarum)刺激后NOD1基因在肝脏、脾脏、头肾和前肠中表达量都有明显上升。研究结果显示NOD1在鲤鱼应对鳗弧菌刺激天然免疫过程中可能发挥着重要作用。