空心莲子草乙酸乙酯部位体内外抗H9N2亚型禽流感病毒活性的研究

[目的]探究空心莲子草乙酸乙酯部位(ethyl acetate extract from Alternanthera philoxeroides,AETAC)体内外抗H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 subtype Avian influenza virus, AIV-H9N2)活性及其作用机制。[方法]利用CCK-8法检测不同浓度AETAC作用不同时间对鸡胚成纤维细胞(DF-1)的抑制作用,通过预防感染、影响复制、阻止吸附及直接杀灭4种方式作用后检测AETAC对DF-1细胞的毒性,选择体外最佳抗AIV-H9N2作用方式。尿囊腔接种不同浓度AETAC确定其对鸡胚的最大安全浓度;将AETAC以3种不同给药方式作用于AIV-H9N2感染后鸡胚,选择体内最佳给药方式。经尿囊腔同时接种AETAC和AIV-H9N2,统计各组鸡胚存活数,测定血凝效价,并观察胚胎的发育情况和鸡胚法氏囊病理组织变化。[结果]在一定范围内,随着AETAC浓度升高或作用时间延长,AETAC对DF-1细胞的抑制率升高。与空白对照组相比,4种抗AIV-H9N2作用方式下,病毒对照组和药物组细胞存活率均显著降低(P<0.05);与病毒对照组相比,AETAC浓度为5~30μg/mL时,4种抗AIV-H9N2作用方式下,药物组细胞存活率均显著升高(P<0.05)。4种作用方式下,DF-1细胞存活率分别为8.15%~64.96%(预防感染)、8.56%~83.83%(影响复制)、1.82%~5.90%(阻止吸附)和6.90%~40.12%(直接杀灭)。AETAC对鸡胚的最大安全浓度为16.41 mg/mL,对感染鸡胚的最佳给药方式为AETAC和病毒混合后接种。以最佳体内作用方式给药后,AETAC中、低浓度组鸡胚存活率为40%~60%,高浓度组鸡胚全部存活,胚胎喙部发育明显,鸡胚法氏囊淋巴滤泡发育完整,滤泡大小和数量正常,充血量少,组织病理状态改善。[结论]AETAC在体内外对AIV-H9N2均具有显著的抑制作用,且主要与影响病毒复制作用方式相关。

獐牙菜中酮类提取物抗HBV体外实验研究

目的：通过体外实验，探讨獐牙菜属植物抗HBV作用物质基础。方法：将贵州獐牙菜口山酮类提取物4、6分别作用于HBV DNA转染人肝癌细胞系2215细胞，通过检测第8d的细胞培养液中HBsAg、HBeAg的变化来评价其抗HBV效果。结果：提取物4多数浓度对HBsAg、HBeAg表达有显著抑制作用（P〈0．05-0.01），测得对HB-sAg、HBeAg的IC50分别为18．4μg／ml、22．8μg／ml；TI值分别大于6．8、5．5；提取物6多数浓度对HBsAg、HBeAg表达有极显著抑制作用（P〈0．01），测得对HBsAg、HBeAg的IC50分别为16．1μg／ml、32．7μg／ml，TI值分别大于15．5、7．6。结论：（口山）酮类提取物4、6为体外杭HBV的活性成分。

大叶蛇葡萄化学成分的研究

目的研究大叶蛇葡萄Ampelopsis megalophylla的化学成分。方法采用硅胶柱、Sephadex LH-20柱色谱等技术提取分离其化学成分，用UV、^H-NMR、^13C-NMR、HSQC及HMBC等光谱方法鉴定化合物结构。结果得到9个化合物，鉴定了其中8个化合物，分别为大黄素（I）、β-谷甾醇（Ⅲ）、花旗松素（Ⅳ）、杨梅素（Ⅴ）、蛇葡萄素（Ⅵ）、槲皮素（Ⅶ）、槲皮素-3-O-α—L-鼠李糖苷（Ⅶ）、杨梅苷（Ⅸ），其中化合物Ⅱ结构待定。结论化合物I、Ⅲ～Ⅴ、Ⅶ～Ⅸ等7种成分均为首次从该植物中分离得到。

三黄泻心汤传统饮片汤剂与中药配方颗粒汤剂药效比较

目的:探讨中药配方颗粒汤剂替代传统饮片汤剂的可能性。方法:对比研究了三黄泻心汤传统饮片汤剂与中药配方颗粒汤剂对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、对小鼠断尾止血以及对小鼠小肠运动的影响。结果:除中、高剂量组对小鼠小肠运动的影响有差异外,其余指标两种汤剂低、中、高剂量组间均无显著性差异。结论:经典方的中药配方颗粒汤剂具研究、开发意义。

紫红獐牙菜高效液相色谱指纹图谱的研究

目的:建立紫红獐牙菜药材甲醇溶解部分的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:HPLC色谱法,色谱柱为Kro-masil C18(250mm×4.6mm,5μL),流动相为甲醇-水(水中含0.05%磷酸)-乙腈,梯度洗脱,流速为0.8mL·min-1,检测波长为254nm,柱温为30℃。结果:初步建立紫红獐牙菜药材的HPLC指纹图谱,标定了13个共有特征峰,并利用对照品对4个特征峰进行了鉴定。结论:该方法简便、可靠,进一步完善了紫红獐牙菜药材的质量标准。

紫红獐牙菜中3种苷类成分RP-HPLC含量测定

目的:建立反相高效液相色谱法测定紫红獐牙菜药材中3种苷类成分含量的方法。方法:色谱柱为Alltimal C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水(水中含0.05%磷酸),梯度洗脱,流速1 mL.min-1,检测波长254 nm,柱温30℃。结果:龙胆苦苷(gentiopicroside),芒果苷(mangiferin),8-O-β-D-吡喃葡萄糖基-1,5-二羟基-3-甲氧基酮(swertrianolin)分别在31.3～281.7,0.31～2.78,0.55～4.91μg内线性关系良好,相关系数分别为0.999 6,0.999 3,0.999 5;平均回收率分别为103.36%,101.42%,97.39%,RSD均小于3%(n=5)。结论:该方法操作简便,分离度好,为完善紫红獐牙菜药材的质量标准提供了依据。

霉茶的性状和显微鉴别

本文对霉茶原植物大叶蛇葡萄(Ampelopsis megalophylla Diels et Gilg)的形态和根、茎、叶组织的显微特征以及主要药用部位叶的粉末显微特征等方面进行了鉴定研究,为湖北民间中药霉茶的鉴别和开发利用提供了一定的科学依据。

三黄泻心汤传统汤剂与中药配方颗粒汤剂中盐酸小檗碱含量测定比较

目的 :建立三黄泻心汤中盐酸小檗碱含量的高效液相色谱 (HLPC)的测定方法。方法 :色谱柱为NuclisoTμ(2 0 0mm× 4 .6mm ,流动相 :乙腈 0 .5mol·L-1四 丁基溴化胺 水 (7.5∶1.5∶91) ,流速 :2ml·min-1,检测波长 :346nm ,柱温 :4 0℃。结果 :在 0 .2～ 3.2 μg内峰面积与盐酸小檗碱含量呈直线关系 ,平均回收率为 98.5 9%。结论 :利用HPLC法测定盐酸小檗碱含量操作简单 。

鸡内金酶解产物氨基酸分析研究

目的:研究鸡内金在不同的酶作用下的水解程度以及酶解产物的氨基酸含量分析。方法:在胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及中性蛋白酶作用下鸡内金水解,用氨基酸自动分析仪分析酶解产物的氨基酸含量。结果:在3种酶作用下鸡内金水解率平均值分别为36.77%,23.34%,25.44%;酶解产物中均有的16种水解氨基酸,但胰蛋白酶水解产物中氨基酸总量高于木瓜蛋白酶及中性蛋白酶,为146.52mg.(100mL)-1。结论:在3种酶的作用下鸡内金均能水解,但水解程度有差别,胰蛋白酶水解产物中水解氨基酸含量较高。

一口红的生药鉴定

目的:对中草药一口红进行生药鉴别。方法:从一口红的性状特征、茎和叶组织结构的显微特征等方面进行鉴别研究,并用TLC法对一口红的主成分熊果酸进行定性鉴别。结果:一口红叶的栅栏细胞2列,不通过主脉;木质部、韧皮部外纤维几乎连成环;一口红茎的皮层中间有石细胞和纤维组成的环带;髓部细胞壁稍厚;TLC图中一口红的熊果酸斑点明显。结论:上述特征为进一步研究和开发一口红提供了鉴别依据。

红直獐牙菜的生药鉴定

目的:对龙胆科植物红直獐牙菜进行生药鉴定研究。方法:采用性状、显微与薄层鉴别的方法。结果:根的内皮层细胞呈长纺锤形,茎存在内生韧皮部,韧皮部狭窄,叶的上下表皮细胞都不平整,栅栏组织和海绵组织分化不明显等是其特征。结论:本研究结果可为药材鉴定、质量标准研究提供参考依据。

HPLC法测定辐花中獐牙菜苦苷的含量

目的建立辐花中獐牙菜苦苷含量测定的方法。方法用高效液相色谱法,色谱柱为AlltimalC18(5μm,250mm×4.6mm),流动相为甲醇-水(水中含0.05%磷酸),梯度洗脱,流速1mL/min,检测波长234nm,柱温30℃。结果獐牙菜苦苷在3.10～30.98μg范围内线性关系良好,相关系数为0.9991;平均回收率为98.0%,RSD=2.66%(n=6)。结论该方法操作简便,分离度好,为建立其质量标准提供了实验依据。

叶下珠的生药鉴定

本文对大戟科叶下珠属植物叶下珠Phyllanthus urinariaL.的生药性状与根、茎、叶、果实的组织结构及粉末的显微特征等方面进行了研究,可作为叶下珠的鉴定依据。

禹余粮及其混淆品的比较鉴别

中药禹余粮始载于<神农本草经>,列为上品,<中国药典>1990年版收载为氢氧化物类矿物褐铁矿(1imonite),主含碱式氧化铁[FeO(OH)][1,2].由于自然界中褐铁矿有多种成因类型,并且产区较多,故导致禹余粮药源较混乱.为保证禹余粮的质量和临床使用安全有效,我们对矿物药禹余粮及湖北地区多次发现的-种禹余粮混淆品进行了比较鉴别.

三黄泻心汤传统饮片汤剂与中药配方颗粒汤剂中生物碱的定性鉴别

目的:探讨中药配方颗粒汤剂代替传统饮片汤剂的可能性。方法:对比研究了三黄泻心汤传统饮片汤剂与中药配方颗粒汤剂中生物碱类的薄层色谱(TLC)、高效液相色谱(HPLC)。结果:三黄泻心汤传统饮片汤剂与中药配方颗粒汤剂中生物碱类TLC、HPLC色谱图大致相似,但色谱图显示中药配方颗粒汤剂中生物碱类成分含量高。结论:三黄泻心汤的中药配方颗粒汤剂具研究、开发意义。

蛇葡萄属民族民间药研究开发进展

蛇葡萄属药用植物资源丰富，本文对我国传统民族民间药藤茶、野葡萄根、无刺根及霉茶的生药学、化学成分及有效成分、药理及临床等方面研究进展进行了报道，提示了蛇葡萄属药用资源研究、开发的前景。

三黄泻心汤传统饮片汤剂与中药浓缩颗粒汤剂中蒽醌成分TLC、HPLC图谱比较

目的:研究三黄泻心汤传统饮片汤剂与中药浓缩颗粒汤剂中蒽醌类主要成分的差别。方法:用相同方法制备两种汤剂的供试品,比较其蒽醌类成分TLC色谱图及HPLC图谱的差别。结果:两种汤剂中蒽醌类主要成分组成大致相似,但传统饮片汤剂提取率稍大于中药浓缩颗粒汤剂。结论:经典方三黄泻心汤的中药浓缩颗粒汤剂替代传统饮片汤剂具有一定的可行性。

三黄泻心汤饮片与颗粒汤剂黄酮类成分的比较研究

目的 :探讨中药配方颗粒汤剂替代传统饮片汤剂的可能性。方法 :对比研究三黄泻心汤传统饮片汤剂与中药配方颗粒汤剂的TLC、HPLC色谱。结果 :三黄泻心汤传统饮片汤剂与中药配方颗粒汤剂的TLC、HPLC色谱图大致相似 ,但色谱图显示中药配方颗粒汤剂中有关成分含量高。结论 :三黄泻心汤的中药配方颗粒汤剂具有一定的研究、开发意义。