黄连汤颗粒成型工艺优化及其质量一致性评价

目的 优化黄连汤颗粒成型工艺,并对其质量一致性进行评价。方法 在单因素试验基础上,以药辅[糊精-糖粉(3∶1)]比、乙醇体积分数、润湿剂(乙醇)用量为影响因素,成型率、休止角、吸湿率、溶化率及其总评“归一值”(OD值)为评价指标,Box-Behnken响应面法优化成型工艺。采用HPLC指纹图谱与物理指纹图谱相结合的评价模式,对不同批次间颗粒质量的一致性进行评价。结果 最佳条件为药辅比1∶1.5,乙醇体积分数80%,润湿剂用量0.25,成型率、休止角、吸湿率、溶化率分别为90.58%、6.70°、31.22%、90.47%,OD值为0.694 9。10批样品HPLC指纹图谱中有17个共有峰,相似度均大于0.988,与对照图谱的相似度均大于0.980。结论 该工艺合理可行,不同批次黄连汤颗粒质量稳定,可用于进一步完善该制剂的质量一致性评价。

清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的UPLC特征图谱建立及成分分析

目的建立清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的特征图谱,初步推断该方中影响临床治疗效果的主要挥发油类活性成分。方法采用水蒸气蒸馏法提取清上蠲痛汤标准汤剂中挥发油,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立15批样品的超高效液相色谱(UPLC)特征图谱并进行相似度评价;采用超高效液相色谱四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF/MS)法对标准汤剂挥发油类成分进行指认、鉴定;采用气质联用(GC-MS)法分析其挥发油类成分组成。结果15批清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的UPLC特征图谱的相似度在0.949~0.997之间;共得到12个共有峰,经UPLC-Q-TOF/MS鉴定主要成分为甲基丁香酚、E-藁本内酯、E-正丁烯基苯酞等。GC-MS共鉴定出23个成分,主要为3,4,5-三甲氧基甲苯、百秋李醇、Z-藁本内酯等。结论建立了清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的特征图谱,初步推断甲基丁香酚、藁本内酯、E-正丁烯基苯酞、百秋李醇、3,4,5-三甲氧基甲苯可能是影响清上蠲痛汤挥发油临床治疗效果的主要活性成分。

基于指纹图谱结合多元统计分析不同干燥方式蟾蜍肉氨基酸类成分

目的:建立不同干燥方式所得蟾蜍肉氨基酸类成分的指纹图谱及4个氨基酸的含量测定方法,比较不同干燥方式对蟾蜍肉品质及其氨基酸含量的影响。方法:采用异硫氰酸苯酯柱前衍生化-高效液相色谱法,建立热风干燥、冷冻干燥、真空干燥和阴干干燥4种方式所得蟾蜍肉干燥样品的指纹图谱,同时测定4个氨基酸含量,并进行相似度评价;运用SPSS 22.0软件进行聚类分析,运用SIMCA 14.1软件进行主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)。结果:不同干燥方式得到的16批蟾蜍肉样品指纹图谱相似度结果均大于0.970,共匹配出10个共有峰,指认出缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸4个氨基酸;PCA提取出2个主成分,累积方差贡献率为87.95%;PLS-DA得出异亮氨酸、缬氨酸、亮氨酸、蛋氨酸的变量重要性投影(VIP)值均大于0.7,提示4个氨基酸可作为评价不同干燥方式所得蟾蜍肉品质的关键指标;阴干干燥、热风干燥、冷冻干燥和真空干燥4种方式所得蟾蜍肉氨基酸总质量分数测定值分别为7.92%、4.62%~5.37%、7.89%~9.02%和4.60%~9.24%。结论:所建立的指纹图谱及含量测定方法稳定可行,结合多元统计分析发现不同干燥方式对蟾蜍肉氨基酸含量产生较大影响,可为蟾蜍肉干燥方式和质量控制研究提供参考。

HPLC双波长法测定葛根芩连微丸中葛根素、黄芩苷的含量

目的研究以HPLC法同时测定葛根芩连微丸中葛根素、黄芩苷含量的方法。方法采用KromasilC18柱,以甲醇0.2磷酸为流动相,双波长检测,λ1=250nm,λ2=315nm。结果葛根素在32.0ng～288.0ng范围内线性关系良好,r=0.9998,黄芩苷在52.6～447.1ng范围内线性关系良好,r=0.9999。平均加样回收率葛根素为100.17,RSD=1.00(n=9);黄芩苷为100.06,RSD=1.06(n=9)。结论本法操作简便,结果可靠,重现性好,可作为该产品质量控制的方法。

半夏药材中脂肪酸成分的研究

目的 研究半夏药材中的脂肪酸成分。方法 对半夏药材的甲酯化样品进行GC -MS分析 ,质谱图用NBS谱库检索 ,鉴定各种脂肪酸 ,并用色谱峰面积归一化法测定其相对百分含量。结果 发现半夏药材中含有较多不饱和脂肪酸。结论 半夏药材中的不饱和脂肪酸相对含量为 4 9.15 2 % ,其中亚油酸占 37.0 96 %。

HPLC 同时测定半夏药材中次黄嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷的含量

目的:研究以 HPLC 同时测定半夏药材中次黄嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷含量的方法。方法:采用 Kromasil C_(18)柱(4.6mm×150mm,10μm),以甲醇-水(1∶99)为流动相,流速1.0mL·min^(-1),λ_1=248nm(检次黄嘌呤核苷),λ_2=254nm(检鸟嘌呤核苷),柱温30℃。结果:次黄嘌呤核苷在20-421ng 范围内线性关系良好,r=0.9999,鸟嘌呤核苷在40-339ng 范围内线性关系良好,r=0.9996。平均加样回收率(n=9):次黄嘌呤核苷为99.2%;鸟嘌呤核苷为99.7%。结论:本法操作简便,结果可靠,重现性好,可作为半夏药材质量控制的方法。

小半夏汤HPLC指纹图谱的研究

目的研究小半夏汤的高效液相色谱指纹图谱。方法RP-HPLC方法,采用Lichrospher C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,二元梯度洗脱,检测波长为254nm,以鸟嘌呤核苷为参照物。结果共有11个共有峰,通过与对照品的保留时间及紫外光谱比较,1、2、3、5、6号峰分别鉴定为是尿嘧啶、黄嘌呤、尿嘧啶核苷、次黄嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷。相同色谱条件下测定了半夏药材的HPLC图谱,其结果与小半夏汤有很好的相关性。结论小半夏汤的指纹图谱特征性、专属性很强,该方法稳定、可靠、重现性好,可为小半夏汤的质量控制研究提供参考。

小半夏汤研究进展

通过文献检索和查阅相关书籍,查找了近30年来国内外有关小半夏汤的相关研究,文献研究结果表明,小半夏汤是呕家圣剂,在古代和现代临床上,医生都用它来治疗各种原因引起的呕吐;在药理学研究中,小半夏汤显示出对动物的胃肠道具有一定的作用。同时,文献研究结果也提示:小半夏汤虽然止呕效果显著,但是目前其所含的抗呕吐物质基础、作用机理及方中半夏、生姜的配伍机制尚不明确,值得进一步对其进行深入研究。

不同产区半夏药材中鸟苷含量的测定

目的 :测定不同产区生半夏药材中鸟苷的含量。方法 :采用反相高效液相色谱法。结果 :不同产区的半夏药材中鸟苷的含量存在很大差异 ,其中以山西省产的半夏中鸟苷的含量最高 (约为 0 .0 2 2 0 % ) ,而以河南省产的半夏中的鸟苷含量为最低 (约为 0 .0 0 38% ) ,鸟苷的含量与半夏药材的等级有关。结论 :生半夏药材中的鸟苷含量不应低于 0 .0 0 8%。

干姜、炮姜中成分的比较

目的比较来自不同产地的干姜、炮姜中的几类成分的量。方法采用比色法,测定干姜及炮姜中多糖、总酚、总黄酮类成分的量,采用HPLC-UV法测定其中姜酚类成分的量。结果被测成分因产地不同含有量差异较大;同产地,炮姜中多糖、总酚、黄酮的量均高于干姜,但6-姜辣素、8-姜辣素,10-姜辣素的量明显低于干姜,而6-姜烯酚的量明显高于干姜。结论该方法可用于干姜、炮姜中几类成分的含有量比较研究。

半夏中总游离有机酸的作用研究

目的 对半夏药材中的总游离有机酸进行提取分离和药理作用的研究。方法 以 95 %醇提取分离总游离有机酸 ,以氨水致咳模型、酚红祛痰、家鸽呕吐实验、MTT法体外肿瘤细胞试验检测有机酸的作用。结果 以 95 %的醇提取并经一系列的分离 ,得到半夏的总游离有机酸部分 ,药理研究证实半夏中含有的总游离有机酸具有止咳、祛痰、体外抑制肿瘤细胞的作用。结论 半夏药材中的有机酸组分为半夏的有效成分之一。

双波长梯度洗脱法测定栀子柏皮汤制剂中栀子苷、甘草苷的含量

目的:研究以HPLC法同时测定栀子柏皮汤制剂(栀子、黄柏、甘草)中栀子苷、甘草苷含量的方法。方法:采用Kro-masil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.5%冰乙酸为流动相,梯度洗脱,体积流量:1.0 mL/min,λ1=238 nm(检栀子苷),λ2=276 nm(检甘草苷),柱温:30℃。结果:栀子苷在49.1μg/mL^147.4μg/mL与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 8,甘草苷在6.1~18.4μg/mL与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9。平均加样回收率(n=9):栀子苷为99.40%;甘草苷为99.94%。结论:本法操作简便,结果可靠,重现性好,可作为该产品质量控制的方法。

HPLC双波长法测定一清胶囊中黄芩苷、大黄素的含量

目的:研究以HPLC法同时测定一清胶囊(黄芩、大黄)中黄芩苷、大黄素含量的方法。方法:采用KromasilC18柱,以甲醇-0.2磷酸为流动相,梯度洗脱,双波长检测,λ1=315nm,λ2=266nm。结果:黄芩苷在64.40～322.00μg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.9998,大黄素在0.82～13.20μg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999。平均加样回收率:黄芩苷为99.96,RSD为1.57(n=9);大黄素为98.90,RSD为1.25(n=9)。结论:本法操作简便,结果可靠,重现性好。

Folin-Ciocaileu比色法测定不同产地生姜中总酚

目的测定不同产地的生姜中总酚的量,提供科学评价生姜质量的方法,为生姜的临床合理应用提供试验依据。方法以没食子酸为对照品,采用Folin-Ciocaileu比色法,在765 nm处测定生姜中总酚的量。结果不同产地的生姜中总酚的量差别较大。结论 Folin-Ciocaileu比色法为生姜的质量控制提供了新的方法,同时也为生姜的合理应用奠定了试验依据。

HPLC-PDA测定小半夏汤中的核苷类成分

目的建立同时对小半夏汤中的5种核苷类成分进行含量测定的方法。方法采用Lichrospher C18柱(4.6 mm×250mm,5μm),以乙腈-水(1∶99)为流动相,体积流量1.0 mL·min-1,λ220～300 nm,柱温30℃。结果小半夏汤中的尿嘧啶、黄嘌呤、尿嘧啶核苷、次黄嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷等的线性范围和相关系数分别为6.88～110.08 mg·L-1(r=0.999 6),2.82～45.04 mg·L-1(r=0.999 8),22.40～358.48 mg·L-1(r=0.999 9),1.96～31.32 mg·L-1(r=0.999 9),16.54～264.72 mg·L-1(r=0.999 8);加样回收率分别为100.31%(RSD=1.36%),100.21%(RSD=1.22%),99.98%(RSD=1.30%),100.44%(RSD=1.62%)和100.27%(RSD=1.36%);方法精密度、重复性良好,RSD均小于2.0%。结论本法操作简便、结果可靠、重现性好、检测快速、定量准确,可作为小半夏汤中核苷类成分的含量测定方法。

气相色谱内标法测定小半夏汤中几种有机酸

目的建立毛细管柱GC法同时测定小半夏汤(半夏、生姜)中的琥珀酸、苹果酸、柠檬酸、亚油酸的方法。方法使小半夏汤中的有机酸类成分甲酯化,毛细管柱GC法测定其含量。采用HP-5石英毛细管柱(30 m×0.53 mm×2.65μm);检测器氢火焰离子化检测器柱温程序升温,100℃保持3 min,然后以5℃/min升温至220℃,保持5 min,最后以10℃/min升温至280℃,保持5 min;进样口温度250℃;检测器温度290℃;载气氮气;体积流量1.0 mL/min。水杨酸甲酯为内标,内标法定量。结果小半夏汤中的琥珀酸、苹果酸、柠檬酸和亚油酸的加样回收率分别为100.16%(RSD为1.17%)9,9.93%(RSD=1.69%),100.63%(RSD为1.51%),99.91%(RSD为1.18%);方法精密度、重复性良好,RSD均小于2.0%。结论本法操作简便,结果可靠,重现性好,检测快速,定量准确,可作为测定小半夏汤中有机酸的方法。

水蛭炮制前后质量分析

目的研究水蛭炮制前后的质量差异,建立其质量控制体系。方法参照2015版《中国药典》对产自全国主要产区的水蛭及烫水蛭进行质量标准研究,测定了其中的水分、灰分、酸不溶性灰分、p H值、抗凝活性,进行了TLC鉴别、HPLC指纹图谱及特征图谱的探索研究。结果水蛭的含水量为12. 49%~15. 29%(平均13. 71%),烫水蛭的含水量为6. 03%~8. 99%(平均7. 82%);水蛭的总灰分为1. 69%~5. 11%(平均3. 28%),烫水蛭的总灰分为2. 30%~6. 94%(平均4. 30%);水蛭的酸不溶性灰分为0. 61%~1. 62%(平均0. 97%),烫水蛭的酸不溶性灰分为0. 90%~1. 93%之间(平均1. 46%);水蛭的p H值4. 89~6. 44 (平均5. 60),烫水蛭的p H为4. 55~6. 23 (平均5. 42)。同时,TLC斑点清晰,HPLC指纹图谱特征峰明确。结论该方法操作简单,准确可靠,重复性好,可用于水蛭及烫水蛭的质量控制。

陈皮饮片的质量控制

目的探索建立陈皮饮片的质量控制方法。方法采用Agilent TC-C18（2）（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,波长范围220～375 nm,柱温30℃。结果陈皮饮片中的芸香柚皮苷、橙皮苷、甜橙黄酮、川陈皮素、橘皮素等的线性范围和相关系数分别为29.98～479.68μg/mL（r=0.999 8）,198.88～3 182.08μg/mL（r=0.999 8）,0.158～2.528μg/mL（r=0.999 8）,1.008～16.128μg/mL（r=0.999 9）,0.398～6.368μg/mL（r=0.999 8）;加样回收率分别为99.91%（RSD=1.3%）,99.59%（RSD=1.2%）,100.22%（RSD=1.3%）,99.85%（RSD=1.3%）和99.71%（RSD=1.5%）;方法精密度、重复性良好,RSD均小于2.0%。结论本法操作简便,结果可靠,重复性好,检测快速,定量准确,可作为陈皮饮片质量控制的方法。

HPLC同时测定颈复康颗粒中葛根素、芍药苷的含量

目的 :研究以HPLC法同时测定颈复康颗粒 (葛根、白芍 )中葛根素、芍药苷含量的方法。方法 :采用KromasilC18柱 ,以甲醇 -水为流动相 ,双波长检测 ,λ1=2 5 0nm ,λ2 =2 30nm。结果 :葛根素在 99.6ng～ 996 .0ng范围内线性关系良好 ,r=0 .9998,芍药苷在 119.6ng～ 1315 .6ng范围内线性关系良好 ,r =0 .9999。平均加样回收率 :葛根素为 10 0 .6 9% ,RSD =1.0 4 % (n =9) ;芍药苷为 10 0 .30 % ,RSD =1.2 4 % (n =9)。结论 :本法操作简便 ,结果可靠 ,重现性好 ,可作为该产品质量控制的方法。