一种新的胃癌相关糖脂糖蛋白抗原MGdl-Ag的初步研究

报告1株鼠抗人胃癌单克隆抗体(单抗)MGd1相应抗原的初步研究。单抗MGd1经饱和硫酸铵(50％浓度)盐折沉淀及DEAE-52纤维素柱层析纯化后,与溴化氢话化的Sepharose4B偶联制备免疫吸附剂。用单抗免疫亲和层析的方法从胃癌组织可溶性抗原提取液中纯化出MGd1相应抗原。免疫酶斑点试验、TLC放射免疫自显影检测提示MGd1相应抗原既溶于PBS缓冲液又易溶于甲醇氯仿液中,高效薄层色谱、SDS-PAGE及免疫印迹等实验分析证实,MGd1相应抗原含有中性糖脂糖蛋白两种成分,抗原决定簇存在于糖链上。Mgd1-Ag是一种新的具有深入研究价值的胃癌相关抗原。

还原型辅酶Ⅰ(NADH)对PC12细胞鱼藤酮损伤的分子调控

为探讨NADH对PC12细胞线粒体鱼藤酮损伤的修复机制 ,采用细胞毒实验、免疫荧光和流式细胞仪检测细胞在鱼藤酮损伤前后细胞增殖基因 (c myc、c erbB 2 )、抗凋亡基因 (bcl 2 )、抑癌基因 (p5 3)、细胞快反应基因 (c fos)相关蛋白和细胞增殖核抗原 (PCNA)的表达。结果表明 ,鱼藤酮能明显抑制PC12细胞增殖 ,下调c erbB 2、c myc、bcl 2和 p5 3基因的表达 ;NADH可以抑制鱼藤酮对PC12细胞线粒体的毒性作用 ,上调细胞bcl 2、c myc、c erbB 2基因和PCNA的表达。提示鱼藤酮可能通过调控线粒体磷酸化过程和下调细胞增殖基因 (c erbB 2、c myc)、抗凋亡基因 (bcl 2 ) ,上调快反应基因 (c fos)表达致使细胞损伤 ,NADH抑制鱼藤酮对PC12细胞的损伤可能与bcl 2、c myc、c erbB 2和p5 3表达调控有关。

一种新的ConA—单克隆抗体ELISA法建立及其在肺癌诊断中的试用

根据鼠抗人胃癌单克隆抗体的相应抗原能与Concanavalin A(ConA)专一性结合的特性.本室建立了ConA—单克隆抗体固相夹心ELISA法,并对MG7和MGd1相应抗原在肺癌患者血清中的表达情况进行检测。ConA—MG7法共检测肺癌,良性疾病患者和正常人89例,其中肺癌阳性率为35.5%,假阳性率为5.9%。ConA—MGdl法检测73例,其中肺癌阳性率为31.8%,假阳性率为7.7%.实验证实单抗MG7和MGd1对肺癌的血清诊断为具有一定意义。本方法简便.便于掌握和应用.

新肿瘤相关抗原MG-Ags在直肠癌血清诊断中的应用

用MG系列鼠抗人胃癌单克隆抗体免疫酶法对直肠癌、良性肠道疾病及正常人血清中一组新的肿瘤相关抗原(MG-Ags)进行检测,并观察其手术前后血清中含量的变化,以探讨其在直肠癌诊断中的价值。以25名正常人血清MG-Ags检测OD值的均数加3个标准差之和,作为判断肿瘤的阳性阈值,直肠癌患者33例MG-Ags检出阳性率为69.7％,良性肠道疾病25例假阳性率仅为4％。对5例行直肠癌切除术的MG-Ags阳性病人,术后8～10天检测血清中MG-Ags水平明显降低。实验结果提示,MG～Ags检测对直肠癌具有较高的临床应用价值。

胃癌相关抗原MGd1-Ag在消化道肿瘤血清诊断中的初步应用

本文对386例消化系统肿瘤、消化系统良性疾病、正常人血清中一种新的胃癌相关抗原表达情况进行检测,以探讨其在消化道肿瘤诊断中的意义。结果如以正常人组检测OD值的均数加二个标准差之和作为判断肿瘤的阴性阈值。阳性率分别为,食道癌14.3％,胃癌45％,结肠癌50％,直肠癌18.6％,肝癌、胰腺癌则为阴性。166例良性消化系疾病总假阳性率为18.7％,41例正常人仅1例阳性。实验结果提示血清中MGdl Ag的检测对胃癌结肠癌的诊断具有一定价值。

辅酶NADH保护和修复细胞损伤的研究

探讨辅酶NADH增加能量代谢水平、修复细胞损伤、提高细胞应激反应的能力和降低化疗药物、放射线对正常组织的毒性损伤作用 ,探讨NADH细胞保护的分子调控机制 。

胃癌单抗MG5相应抗原的纯化及分析

作者报告鼠抗人胃癌单克隆抗体MG5相应抗原的纯化和初步鉴定。首先收集胃癌患者转移性腹水癌细胞。并制备可溶性抗原提取液。用concanavalin A(Con A)Sepharose 4B亲和层析法分离提取胃癌细胞糖蛋白成份后,再用MG5-Sepharose4B免疫亲和层析法纯化单抗MG5相应抗原。经高碘酸氧化,电泳脂蛋白染色SDS-PAGE和免疫印渍等实验分析,证实MG5相应抗原是一种含3个亚单位的糖蛋白,分子量分别为68kD、52kD和44kD,抗原决定簇存在于糖链上,免疫分析提示MG5相应抗原是一种新的胃癌相关抗原。

氩氦刀冷冻消融治疗肿瘤

1998年美国研制一种新型超低温介入冷冻消融治疗设备,在实体肿瘤治疗中显示一定的优势。文章就其在肿瘤治疗中的应用及临床须注意问题作一综述。

检测胃癌患者血清与胃液中MGdl-Ag的诊断价值

将外源性凝集素刀豆素A包被于ELISA板上,与检测血清或胃液反应后,封闭,用单抗MGd1-酶标SPA检测,以探讨鼠抗人胃癌单抗MGd1相应抗原(MGd1-Ag)在胃癌诊断中的意义。共检测血清183份(胃癌患者142例,正常人41例),胃液97份(胃癌患者72例,良性胃病患者25例)。结果显示:在118例未手术胃癌患者中,阳性58例,占49.2％;而24例胃癌切除术后患者中阳性4例,占16.7％;正常人阳性者为24.0％。胃癌患者胃液阳性率为41.7％,而良性胃病患者仅为4.0％。实验结果提示血清、胃液之中MGd1-Ag的检测对胃癌具有一定的诊断价值。

胃肠肿瘤相关抗原的研究概况

寻找和发现新的肿瘤相关抗原,并观察其在人体内的分布、表达规律和生物学功能对于研究肿瘤的发病机理和防治措施具有重要的意义,也是肿瘤早期诊断及监测复发的重要课题。近年,随着单克隆抗体技术和分子生物学技术的广泛应用,肿瘤相关抗原的研究有了很大的进展,大多数学者认为肿瘤相关抗原只是一种与肿瘤相关的现象,其本质可极其多样。就其化学本质而言多为糖脂和糖蛋白(或蛋白多糖),就某些意义而言,肿瘤状态就是异常糖化状态。

Cryocare氩氦靶向肿瘤治疗技术

氩氦刀1998年通过美国FDA批准和IEC及EMC认证,目前已被世界500多所医院用于肿瘤治疗。我国自1999年引进氩氦刀以来,已有2万多肿瘤患者接受氩氦靶向消融术治疗,有效率达90%以上。临床证实,氩氦靶向治疗技术可以有效地治疗肺癌、肝癌、脑肿瘤、乳腺等实体肿瘤。与化疗、放疗、生物治疗及中医药结合治疗可取得满意的临床效果。

去垢剂NP-40在提取胃癌中性糖脂中的应用

随着肿瘤鞘糖脂抗原研究的深入,胃癌组织中性糖脂的变化已引起人们的重视,但提取中性糖脂的方法主要是用甲醇一氯仿抽提、Folch分配、硅胶柱层析纯化的方法。

结肠癌相关抗原MC_5—Ag的纯化及分析

本文用一株鼠抗人结肠癌单克隆抗体MC_s,经盐析。DEAE—S_2离子交换层析纯化后与澳化氢活化的Sepharose 4B偶联制备免疫吸附剂。用免疫亲和层析的方法从结肠癌组织中纯化出单抗MC_5相应抗康,经电泳乙酰苏丹黑10B染色,考马斯亮蓝染色,加热实验,高碘酸氧化,SDS—PAGE和免疫印迹等分析证实MC_5相应抗原是一种新的结肠癌相关糖蛋白,分子量分别为67KD和55KD。

胃癌单克隆抗体MGcl相应抗原的初步研究

本文报告一株鼠抗人胃癌单克隆抗体MGcl相应抗原的纯化及分析。MGcl经50％饱和硫酸铵盐析,DEAE—52纤维素柱层析后,获得纯化的IgG56,31mg与2g溴化氰活化的sepharose 4B偶联,制备免疫吸附剂。用MGcl免疫亲和层析的方法从胃癌组织中纯化出MGcl相应抗原,经蛋白酶处理,高碘酸氧化,电泳脂蛋白袭色,SDS—PAGE及Immunoblotting等实验分析证实MGcl相应抗原是一种低分子量的糖蛋白,分子量为72Kd和52kd。

Lectin在单克隆抗体相应抗原研究中的应用

外源性凝集素作为肿瘤碳水化合物抗原研究的理想工具已引起人们的重视。本研究用外源性凝集素对４株胃癌单克隆抗体相应抗原进行了分离、鉴定和检测。首先用刀豆凝集素亲和层析分离胃癌组织Ｎ－糖苷型糖蛋白，并用单抗检测证实单抗Ｍｄ１，ＭＧ７、ＭＧｂ１、ＭＧ１相应抗原均能被刀豆凝集素识别，其中ＭＧｄｌ、ＭＧ７也可被ＰＨＡ－Ｅ所识别Ｌｅｃｔｉｎ－ＭＧ夹心ＥＬｌＳＡ法检测提示四种单抗抗原在肿瘤患者血清中均有分布，并对胃肠肿瘤的检出有一定帮助。外源凝集素用于单抗单抗相应抗原的分析检测是一种简便有效的工具．

一种新的胃癌相关抗原的研究

取含胃癌单抗MG_9的小鼠腹水,经DEAE—52离子交换层折后,获得纯化的MG_9(IgG_1)56.8mg,与溴化氢活化的Sepharose4B偶联制备免疫吸附剂,用亲和层析的方法从胃癌组织中纯化出MG_9相应抗原,经外源性凝集素识别,高碘酸氧化,电泳考马斯蓝染色,乙酰苏丹黑10B染色,免疫印渍及氨基酸组成分析等实验证实MG_9相应抗原是一种新的胃癌相关糖蛋白,分子量110～120kd。血清ELISA法检测结果提示对胃肠肿瘤的临床诊断有一定意义。

NADH对化学损伤PC12细胞转谷酰胺酶Ⅱ、Cyclin和G蛋白表达的调控

为探讨NADH对PC12细胞化学药物损伤后的修复作用 ,采用细胞实验检测NADH对顺铂、阿霉素、鱼藤酮对肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC12细胞系细胞毒性作用的影响 ,并运用流式细胞仪对细胞周期蛋白、G蛋白和转谷酰胺酶Ⅱ含量进行分析。结果发现 ,NADH能够明显抑制化学药物顺铂、阿霉素、鱼藤酮对PC12细胞的毒性作用 ,上调细胞损伤后周期蛋白A和B1表达及下调周期蛋白D1表达 ;上调G蛋白和转谷酰胺酶Ⅱ表达。提示NADH抑制和修复化学药物对PC12细胞的损伤与细胞周期蛋白。

肿瘤相关寡糖分子纯化及检测意义

用亲和层析法纯化出胃癌组织ConA识别的糖蛋白,经SDS-PAGE鉴定及检测活性后,用辣根过氧化物酶进行标记,建立了一种新的ELISA结合抑制寡糖分析方法。经351例肿瘤患者,126例良性疾病患者和100例正常人血清检测证实:肿瘤患者血清中ConA识别的寡糖分子水平增高。11种肿瘤检测平均阳性率为52.1％(185/351);诊断符合率为61.8％。提示肿癌相关寡糖的研究对于寻找新的肿瘤相关抗原和血清诊断有一定帮助。

胃癌单克隆抗体MGb1在肿瘤患者血清诊断中的初步应用

作者应用刀豆凝集素与单克隆抗体MGb1 ELISA夹心法对238例肿瘤患者、良性疾病患者及正常人的血清进行检测,以探讨检测MGb1相应抗原在肿瘤诊断中的意义。结果显示:单抗MGb1相应抗原在多种肿瘤患者血清中均可检出,其阳性率如下:胃癌患者为48.5％,结肠癌为70.0％,直肠癌为38.1％;卵巢癌为30.0％,肺癌为29.6％,肝癌为35.3％;51例良性疾病患者假谢性率为13.7％;正常人为6.3％。其中胃癌、结肠癌患者与良性疾病患者比较,相差显著,对诊断具有一定帮助。

免疫亲和层析中快速判断单克隆抗体交联度的简便方法

单克隆抗体免疫亲和层析技术已经成为一种有效的实验方法，不但用于肿瘤相关抗原的研究，而且用于多种生物活性物质的纯化。但由于各种单抗理化性质的差异，实验中均需建立适宜的条件，本文介绍一种快速判断单抗交联程度及实验中监测单抗有无洗脱的染色方法。