甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎模型大鼠Th1/Th2细胞平衡偏移的影响

目的:探讨甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠Th1/Th2细胞平衡偏移作用机制。方法:采用Lewis大鼠建立AIT大鼠40只,6周后随机分为模型组、甲炎康泰低、中、高剂量组,每组10只,每天分别按去离子水、0.708、1.417、2.834 g?kg-1剂量连续灌胃8周。检测血清Tg Ab、TPOAb;Th1、Th2细胞分布比例及Th1/Th2比率;检测血浆中IL-4、IL-5、IFN-γ、TNF-α和IL-1α含量;HE染色观察甲状腺组织的病理;免疫组织化学检测甲状腺IFN-γ、IL-4蛋白表达。结果:甲炎康泰高剂量组能够下降AIT大鼠TPOAb、TGAb水平,降低甲状腺炎发生率、Th1与Th2细胞分布比例以及Th1/Th2比率;降低血浆IFN-γ、TNF-α、IL-1α、IL-4、IL-5含量;降低甲状腺IFN-γ、IL-4蛋白表达。结论:甲炎康泰具有降低AIT大鼠甲状腺自身抗体的作用,可能与通过调节细胞因子水平和Th1/Th2细胞平衡偏移有关。

甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎大鼠T-bet/GATA3的影响

目的观察甲炎康泰(JYKT)复方颗粒对自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)大鼠Th1/Th2细胞转录因子T-bet/GATA3的影响。方法50只Lewis大鼠,雌性,每组10只随机分为正常对照组、模型组、JYKT低、中、高剂量组。模型组与给药组大鼠皮下多点注射猪甲状腺球蛋白和弗化剂的方法建立自身免疫性甲状腺炎大鼠(AIT大鼠),大鼠造模6周后,正常、模型组大鼠每日予以0.9 mL/100 g双蒸水,中药组大鼠予以同体积药物混悬液连续8周。给药结束后RT-PCR检测各组大鼠脾脏中T-bet、GATA3mRNA的表达情况;Western Blot检测各组大鼠脾脏中T-bet、GATA3的蛋白表达情况;免疫组化法测定大鼠甲状腺组织T-bet、GATA3蛋白的表达情况。结果与正常组比较,模型组T-bet、GATA3 mRNA及蛋白表达均显著上升(P<0.01);与模型组比较,甲炎康泰低、中、高剂量组T-bet、GATA3 mRNA及蛋白均下降(P<0.05,P<0.01)。结论T-bet/GATA3是影响Th1/Th2平衡的关键转录因子,甲炎康泰可调控T-bet/GATA3表达,从而影响了自身免疫性甲状腺炎的发生与发展。

山柰酚对2型糖尿病小鼠骨骼肌PI3K-AKT-GLUT4信号通路的影响

目的:探讨山柰酚对KKAy小鼠骨骼肌PI3K/AKT/GLUT4信号通路的影响。方法:以自发型2型糖尿病KKAy小鼠为动物模型,通过对糖尿病小鼠进行为期6周的山柰酚灌胃给药治疗,利用生化、免疫组织化学及免疫印迹法等检验方法,检测PI3K-AKT-GLUT4信号通路重要靶点的表达,探讨山柰酚改善糖尿病KKAy小鼠骨骼肌胰岛素敏感性及对胰岛素信号转导通路PI3K-AKT-GLUT4的影响。结果:山柰酚具有显著降低KKAy小鼠体重、空腹血糖、随机血糖的作用,ITT实验结果说明:山柰酚能够显著降低胰岛素注射30 min时的血糖,显著降低ITT曲线下面积,改善胰岛素抵抗。此外,山柰酚能够显著上调KKAy小鼠骨骼肌PI3K、AKT、GLUT4基因的表达,能够上调AKT、GLUT4蛋白的表达。结论:山柰酚具有显著降低KKAy小鼠血糖、体重的作用,能够改善胰岛素抵抗,其作用机制可能与上调骨骼肌PI3K-AKT-GLUT4信号通路有关。

肉桂酸对db/db小鼠肝脏PI3K/AKT/FoxO1信号通路的影响

目的通过研究肉桂酸对db/db小鼠肝脏PI3K/AKT/FoxO1信号通路的影响,探讨其在肝脏胰岛素抵抗方面的作用机制。方法连续两日同一时间测空腹血糖,并参考体重用随机分层抽样法将18只db/db小鼠分为模型组、吡格列酮组和肉桂酸组,正常组为同周龄db/m+小鼠,每组6只,分别给予肉桂酸溶液与等量DMSO灌胃4周。Elisa法检测血清胰岛素水平,全自动生化分析仪检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和游离脂肪酸(FFA),Western blot法检测肝脏组织PI3K、AKT、FoxO1的蛋白表达。结果肉桂酸可降低db/db小鼠空腹血糖水平及血清ALT、AST、TG、TC和FFA的水平;其亦可上调肝脏组织PI3K、p-FoxO1、p-AKT蛋白表达水平,下调FoxO1蛋白表达水平。结论肉桂酸可以改善db/db小鼠的空腹葡萄糖水平,调节血脂及改善胰岛素抵抗,其作用机制可能是通过激活PI3K/AKT/FoxO1信号通路来实现的。

Jak激酶抑制剂AG490对Lewis肺癌细胞增殖及Jak-Stat信号通路的影响

目的探讨Jak激酶抑制剂AG490对Lewis肺癌细胞增殖与凋亡的作用及其机制。方法 AG490作用于体外培养的Lewis肺癌细胞。MTT法检测细胞增殖,吖啶橙荧光染色观察细胞凋亡形态、流式细胞术检测细胞周期与凋亡,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Stat3、Stat5和Bcl-2、Bax mRNA表达。结果 100μmol.L-1AG490作用24和48h后,对Lewis肺癌细胞细胞增殖抑制率分别为37.95%和52.99%。流式细胞术显示,经50和100μmol.L-1AG490作用24h后,细胞凋亡率由处理前的0.76%分别提高到12.56%和16.76%(P<0.01)。荧光显微镜下可见到典型的细胞凋亡形态学改变。细胞Stat3、Stat5活化程度降低,促进Bcl-2基因表达下调,提升细胞中Bax mRNA表达。结论阻断Jak-Stat3信号通路可抑制Lewis肺癌细胞增殖,并可能通过下调凋亡抑制基因Bcl-2表达诱导细胞凋亡。

橄榄苦甙改善db/db小鼠肝脏胰岛素抵抗作用机制研究

目的:本研究主要观察橄榄苦甙(OL)改善肥胖db/db小鼠胰岛素抵抗的作用机制。方法:6-8周龄雄性db/db小鼠12只,按体质量和随机血糖随机分为OL组和模型组,每组6只,另设同周龄C57BL/6J小鼠6只为正常组。OL组灌服OL水溶液50 mg·kg-1体重,其余组给以等剂量生理盐水。治疗4周后,检测各组小鼠的空腹血糖(FBG)、胰岛素水平、计算胰岛素抵抗指数以及口服葡萄糖耐量实验(OGTT),取肝脏组织,采用RT-PCR、Western Blot检测相关基因和蛋白表达。结果:治疗4周后,与模型组比较,OL组体重、空腹血糖、血清胰岛素水平和胰岛素抵抗指数显著降低(P<0.05或P<0.01);OGTT实验后,OL组血糖明显低于模型组(P<0.01);OL组小鼠肝脏组织Ins R、IRS-1、GLUT-2 m RNA和蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:OL通过提高肝脏Ins R、IRS-1、GLUT-2 m RNA和蛋白的表达起到降低血糖、改善胰岛素抵抗的作用。

糖痹康减轻糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经的氧化应激损伤

背景:中药复方糖痹康具有改善血糖、减轻糖尿病周围神经病变的作用,但其调控作用机制尚未清楚。目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经氧化应激的影响,探索糖痹康减轻糖尿病周围神经病变的靶向调控机制。方法:30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和糖痹康组,每组10只。后两组构建糖尿病周围神经病变模型,成模后分别灌胃生理盐水或糖痹康2.5 g/(kg·d),持续12周。给药后0,4,8,12周检测大鼠的体质量、空腹血糖水平;通过热板实验及Von Frey实验检测给药12周各组大鼠热痛阈及机械痛阈;给药12周后取材,取材前检测各组大鼠坐骨神经传导速度及坐骨神经血流速度,苏木精-伊红染色和透射电镜检测观察大鼠坐骨神经形态学变化,采用比色法和ELISA试剂盒分别检测坐骨神经中超氧化物歧化酶、丙二醛、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α表达,Western blot检测坐骨神经组织PI3K/AKT/FoxO1通路相关蛋白表达水平。结果与结论:①糖痹康组大鼠造模后4,8,12周血糖水平均显著低于模型组(P<0.05),模型组大鼠第12周体质量明显低于糖痹康组(P<0.05);②造模后12周,糖痹康组机械痛阈及热痛阈相较于模型组有明显改善(P<0.05),糖痹康组坐骨神经传导速度及血流速度均明显高于模型组(P<0.05);③糖痹康组神经纤维排列秩序、致密程度、髓鞘化程度均优于模型组;④ELISA及比色法结果显示,与模型组相比,糖痹康组坐骨神经组织中丙二醛、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α蛋白表达显著降低,超氧化物歧化酶蛋白表达升高(P<0.05);⑤Western blot结果显示,糖痹康组坐骨神经组织中PI3K、p-AKT/AKT、p-FoxO1/FoxO1蛋白表达量较模型组升高(P<0.05);⑥糖痹康可改善糖尿病大鼠坐骨神经功能、减轻坐骨神经氧化应激损伤,其机制可能与糖痹康调控PI3K/AKT/FoxO1通路相关。

调衡方对Lewis肺癌细胞凋亡标志物bax及bcl-2表达的影响

目的探讨调衡方含药血清诱导Lewis肺癌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法采用细胞培养技术,用不同浓度的含药血清(无特定病原体雌性SD大鼠32只随机分为4组,每组8只,灌服给药,制备调衡方大、中、小剂量含药血清,正常血清。又将细胞分为5组,调衡方大、中、小剂量含药血清组,中剂量含药血清+AG490干预组,正常血清组)处理Lewis肺癌细胞,用溴化四唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的影响;以流式细胞仪测定碘化丙啶染色细胞周期的变化;采用实时聚合酶链式反应(PCR)法检测bax和bcl-2的mRNA表达。结果调衡方含药血清处理Lewis肺癌细胞后,随着药物浓度增加,作用时间延长,细胞增殖速度减慢。流式细胞仪检测结果显示,调衡方含药血清使Lewis肺癌细胞阻滞于S期,随着药物浓度的增加,细胞凋亡逐渐增加,中、大剂与中剂量+AG490组尤为明显(P<0.01)。调衡方含药血清还能够促进细胞中bax mRNA表达,减少bcl-2 mRNA表达(P<0.05,P<0.01),并呈浓度依赖性。结论调衡方含药血清能降低Lewis肺癌细胞内bcl-2含量及提高bax的表达,使bax/bcl-2比值升高,这可能是调衡方抗肿瘤诱导Lewis肺癌细胞凋亡的机制。

基于ExtJS的校园网络控制系统的研究与实现

研究了浙江理工大学科技与艺术学院办公网络信息管理的现状,根据网络信息管理员及学院办公的实际需求,分析、设计与实现了一个有利于提高网络管理信息化水平和网络信息管理效率的校园网络控制系统。

青钱柳对糖尿病小鼠肝脏糖脂代谢影响及机制研究

目的观察青钱柳水提物(Cyclocarya paliurus aqueous extract,CPAE)对自发性2型糖尿病小鼠(db/db小鼠)肝脏糖脂代谢影响,并探讨其作用机制。方法取4周龄雄性C57BL/6J小鼠为正常对照组,将同周龄成模雄性db/db小鼠根据血糖、体质量随机分为模型组、盐酸二甲双胍组(0.13 g·kg^(-1)·天-1)及青钱柳水提物组(2 g·kg^(-1)·天-1),每组10只。干预6周,每2周检测小鼠体质量、空腹血糖(FBG),6周后检测空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)、甘油三脂(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、游离脂肪酸(Free fatty acid,FFA)、空腹血清胰岛素(Fasting serum insulin,FINS),同时计算胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR);苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosin stain,HE stain)观察肝脏脂质蓄积情况;过碘酸-Schiff染色法(Periodic Acid-Schiff stain,PAS stain)观察肝组织肝糖原含量;采用Western Blot法检测肝脏P-AMPK、PGC-1α蛋白表达水平。结果与模型组相比,CPAE可降低db/db小鼠FBG、TC、FFA、FINS及胰岛素抵抗指数(P<0.01),抑制脂质在肝脏沉积,增加肝糖原含量(P<0.05),提高肝脏P-AMPK蛋白表达水平(P<0.01),抑制PGC-1α蛋白表达水平(P<0.01)。结论CPAE可降低db/db小鼠FBG、TC、FFA、FINS及胰岛素抵抗指数,改善胰岛素抵抗,增加肝糖原含量,抑制糖异生,其作用机制可能与调节肝脏AMPK/PGC-1α信号通路相关。

水飞蓟宾对C2C12细胞胰岛素抵抗的影响及机制研究

目的观察水飞蓟宾对棕榈酸诱导C2C12肌管细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖摄取能力的影响,并从STAT3/SOCS3信号通路探讨其作用机制。方法用含2%马血清的高糖培养基(DMEM)培养小鼠C2C12细胞4天后,改用0.5 mmol·L^(-1)棕榈酸造模液继续诱导培养16 h建立C2C12细胞胰岛素抵抗模型;用CCK-8法测定水飞蓟宾对C2C12细胞增殖能力的影响;用葡萄糖氧化酶法检测水飞蓟宾对C2C12细胞葡萄糖摄取能力的影响;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测C2C12细胞培养液中炎性因子TNF-α、IL-β和IL-10的水平;用免疫印迹法(Western blot)检测水飞蓟宾对P-STAT3、SOCS3蛋白表达水平的影响。结果水飞蓟宾浓度在≥30μmol·L^(-1)时显著抑制C2C12细胞增殖;水飞蓟宾可增加C2C12细胞对葡萄糖的摄取,降低致炎因子TNF-α,IL-β,提高抑炎因子IL-10水平,同时抑制P-STAT3、SOCS3蛋白表达。结论水飞蓟宾可改善C2C12细胞胰岛素抵抗,其作用机制可能通过抑制TNF-α、IL-β炎症因子分泌,增加抑炎因子IL-10分泌,调控STAT3/SOCS3信号实现。

蛋白质组学技术在中医药防治糖尿病及并发症研究中的应用进展

糖尿病是以长期高血糖为主要临床特点的全身慢性代谢疾病。蛋白质组学从整体蛋白质的水平,更深入地发现和探讨糖尿病的发病机制,现在在中医药研究中已有较多应用。本文对蛋白质组学在中医药干预糖尿病及其并发症中的研究应用进行综述,包括糖尿病及并发症的中医证候蛋白质组学筛选验证,以及相关中药药理机制的蛋白质组学分析,并进行了展望,以期为中医有关糖尿病的病机理论以及中药作用靶点提供新的线索和依据,深化中医药干预糖尿病研究。

糖耐康对db/db小鼠肝脏p38MAPK/NF-κBp65信号通路的影响

目的基于p38MAPK/NF-κBp65通路,探讨糖耐康对db/db小鼠肝脏的保护作用。方法16只db/db小鼠按体重、血糖随机分为糖耐康组和模型组,每组8只,另设同周龄db/m+小鼠8只为正常组,分别以3.24 g/kg溶液及等量超纯水灌胃。给药8周后,检测各组小鼠空腹血糖、血脂和肝功水平,HE染色观察肝组织病理改变,检测肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β含量以及相关蛋白的表达。结果糖耐康组可显著降低肝重、空腹血糖、血清ALT、AST、TG、TC和FFA的水平,下调肝脏组织炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β和p-p38MAPK、核NF-κBp65的蛋白表达水平。病理显示糖耐康组可显著减少小鼠肝细胞的脂肪样变性。结论糖耐康可改善db/db小鼠的糖脂代谢紊乱,减少脂肪在肝脏中的蓄积以及相关炎症因子的表达,其作用机制可能通过调节p38MAPK/NF-κBp65信号通路有关。

藤茶总黄酮调节C2C12细胞胰岛素抵抗的作用和机制研究

目的:观察藤茶总黄酮对棕榈酸诱导的C2C12肌管细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖利用的影响,并从IRS-1/PI3K p85/AKT/GLUT4信号转导通路探讨其作用机制。方法:用含2%马血清的高糖培养基(DMEM)培养小鼠C2C12成肌细胞,诱导为成熟的肌管细胞后,用0.5 mmol/L棕榈酸诱导培养16 h建立细胞胰岛素抵抗模型。用CCK-8法测定不同浓度的藤茶总黄酮(5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、50μg/mL、80μg/mL)对C2C12细胞活性的影响,并确定后续实验的藤茶总黄酮高、中、低剂量。将C2C12细胞诱导成熟的肌管细胞分为正常组(NC)、高糖模型组(DM)和藤茶总黄酮高、中、低剂量组(AGH、AGM、AGL),检测各组细胞的葡萄糖消耗量,用Western Blotting法检测藤茶总黄酮对IRS-1/PI3K p85/AKT/GLUT4信号转导通的蛋白表达的影响。结果:藤茶总黄酮浓度在50μg/mL时,细胞成活率最高。据C2C12细胞活性检测,得到用于后续细胞实验的藤茶总黄酮高、中、低浓度分别为80μg/mL、50μg/mL、30μg/mL。藤茶总黄酮高、中、低剂量组葡萄糖消耗量与高糖模型组比较显著增加(P<0.01)。藤茶总黄酮高、中剂量组显著提升IRS-1/PI3K p85/AKT/GLUT4信号通路的蛋白表达(P<0.01)。结论:藤茶总黄酮可改善C2C12细胞葡萄糖消耗量从而改善胰岛素抵抗,其作用机制可能通过调节IRS-1/PI3K p85/AKT/GLUT4信号通路实现。

调衡方对Lewis肺癌细胞增殖及JAK-STAT信号通路的影响

目的:观察调衡方对Lewis肺癌细胞增殖凋亡及JAK-STAT通路的影响。方法:实验动物分为4组,灌服给药,制备调衡方小、中、大剂量含药血清,正常血清。又将细胞分为5组,即正常血清组(不含药血清),小、中、大剂量含药血清组,中剂量含药血清+AG490(JAK-STAT信号通路特异性抑制剂)干预组,分别孵育Lewis肺癌细胞株24 h后,MTT法检测对Lewis肺癌细胞增殖的影响,吖啶橙染色观察Lewis肺癌细胞凋亡状况,RT-PCR法检测其对Lewis肺癌细胞Stat3、Stat5 mRNA的影响。结果:Lewis肺癌细胞经调衡方中、大剂量含药血清作用后,与对照组比较,细胞内Stat3含量降低至0.622±0.004、0.62±0.007(P<0.01),Stat5表达分别降低至0.700±0.034、0.649±0.033(P<0.01)。结论:调衡方含药血清能显著抑制Lewis肺癌细胞增殖,促进其凋亡,其机制可能与下调stat3、stat5的基因表达,抑制细胞信号转导通路有关。

南非草药蝴蝶亚仙人掌对db/db小鼠肝脏糖脂代谢和PI3K/Akt/FoxO1信号通路的影响

目的:观察南非草药蝴蝶亚仙人掌(HG)对糖尿病db/db小鼠糖脂代谢的影响,基于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/叉头转录因子O亚族1(FoxO1)信号通路探索HG对db/db小鼠肝脏可能的机制。方法:30只db/db小鼠根据空腹血糖随机分为5组:模型组、二甲双胍组(0.195 g·kg^(-1))、HG低剂量组(0.39 g·kg^(-1))、HG中剂量组(0.78 g·kg^(-1))、HG高剂量组(1.56 g·kg^(-1)),每组6只,并设6只m/m小鼠为正常组。正常组和模型组小鼠给予9 mL·kg^(-1)等体积生理盐水灌胃。每周检测各组小鼠体质量、饮食水量及空腹血糖。连续给药6周后取材,测空腹血清胰岛素(FINS)、低密度脂蛋白(LDL)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素(UREA)、肌酐(CREA),取肝脏包埋切片行苏木素-伊红(HE)、过碘酸雪夫(PAS)及油红O染色。免疫组化检测肝脏中PI3K p85、磷酸化(p)-Akt和p-FoxO1的磷酸化蛋白表达。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织中PI3K、Akt、FoxO1 mRNA的表达变化。结果:给药干预6周后发现,与模型组比较,HG低、中、高剂量组小鼠的空腹血糖均明显下调(P<0.05);HG低、中剂量组胰岛抵抗指数水平均有明显降低(P<0.05);HG低、中、高剂量组均可明显降低TC、TG与LDL表达水平(P<0.05,P<0.01);病理方面,与模型组比较,蝴蝶亚仙人掌可缓解小鼠肝细胞脂肪样变性,减轻肝脏内脂滴体积和含量,并一定程度增加肝脏内糖原颗粒的分布。免疫组化检测发现,与模型组比较,HG低、中、高剂量组PI3K p85蛋白表达均显著增加(P<0.01);HG中、高剂量组p-Akt蛋白表达均明显增加(P<0.05,P<0.01);HG低、中、高剂量组p-FoxO1蛋白表达均明显增加(P<0.05,P<0.01)。基因检测发现,与模型组比较,HG低、中、高剂量组PI3K mRNA均明显升高(P<0.05),HG高剂量组Akt mRNA明显升高(P<0.05),HG低、中、高剂量组FoxO1 mRNA均明显降低(P<0.05)。结论:HG可缓解db/db小鼠糖脂代谢紊乱,可能与其激活肝脏PI3K/Akt/FoxO1信号通路有关。

疏肝健脾法对2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响

目的从"治未病"角度探索疏肝健脾法预防和治疗2型糖尿病的作用机制,选方四逆散及痛泻要方合剂,通过对患者胰岛素相关指标等水平的测定,探索疏肝健脾法对2型糖尿病及胰岛素抵抗的调控作用。方法选取7周龄KK-Ay小鼠随机分成模型组、二甲双胍组、中药高剂量组、中药低剂量组。C57BL/6J小鼠作为正常组。连续给药4周,检测空腹血糖、OGTT、空腹血清胰岛素水平。结果与正常组比较,模型组空腹血糖、AUC、空腹血清胰岛素水平升高(P<0.01),胰岛素敏感指数降低(P<0.01),二甲双胍组与模型组比较,空腹血糖(P<0.05)、AUC(P<0.01)、空腹血清胰岛素水平降低(P<0.01),胰岛素敏感指数升高(P<0.01);中药高剂量组较模型组比较,也可降低空腹血糖、AUC、空腹血清胰岛素水平升高(P<0.01),胰岛素敏感指数升高(P<0.05)。结论疏肝健脾法四逆散及痛泻要方合剂能够降低糖尿病小鼠血糖,改善糖耐量异常,提高胰岛素敏感性,从而进一步减轻减缓胰岛素抵抗。

甲炎康泰颗粒剂对自身免疫性甲状腺炎大鼠免疫相关细胞因子的影响

目的检测甲炎康泰颗粒剂对自身免疫性甲状腺炎大鼠免疫相关细胞因子的影响,探讨甲炎康泰颗粒剂改善自身免疫性甲状腺炎的作用机制。方法30只雌性Lewis大鼠随机选取正常组10只,其余20只采用皮下注射甲状腺球蛋白结合口服碘水造模共7周。造模成功大鼠随机分为模型组10只、给药组10只。甲炎康泰颗粒剂连续干预8周后,ELISA法检测甲状腺抗体水平;HE染色观察甲状腺病理改变;qPCR法检测靶点因子基因表达;抗体芯片法检测靶点蛋白表达并绘制聚类热图。结果模型组TPOAb、TGAb较正常组显著升高,给药组TPOAb、TGAb较模型组显著降低。模型组甲状腺滤泡细胞破坏、大量淋巴细胞浸润,给药组甲状腺病理改变较模型组缓解。模型组IFN-γ、TNF-α、IL-17、CCL3、CX3CL1基因表达量较正常组升高,给药组IL-4、IFN-γ、TNF-α、IL-17、CCL3、CX3CL1较模型组降低。各组间细胞因子聚类较好,模型组IL-17、CCL3、CX3CL1蛋白表达量较正常组升高,给药组IL-4、IFN-γ、TNF-α、CCL3、CX3CL1较模型组降低。结论甲炎康泰颗粒剂可调节免疫相关细胞因子而减轻自身免疫性甲状腺炎大鼠甲状腺损伤。

甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的观察甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的影响。方法皮下注射猪甲状腺球蛋白联合饮用高碘水建立AIT大鼠模型,将造模成功的AIT大鼠随机分为模型组及甲炎康泰组,每组10只,另设健康Lewis大鼠10只为正常组。甲炎康泰组大鼠给予甲炎康泰水溶液灌胃,其余组予等体积去离子水灌胃,灌药体积为1 mL/100 mg,每日一次。连续给药8周。酶联免疫吸附剂测定法检测大鼠血清中甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)滴度;取甲状腺组织进行苏木精—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色,观察病理变化;实时荧光定量PCR检测甲状腺组织中PI3K、Akt、mTOR mRNA的表达;免疫组化检测甲状腺组织中PI3K、P-Akt、P-mTOR的表达情况。结果经甲炎康泰灌胃给药干预8周后,与模型组相比,甲炎康泰组TPOAb滴度值显著降低(P<0.05),淋巴细胞浸润减轻,PI3K、Akt和mTOR mRNA表达降低(均P<0.05),PI3K、P-Akt、P-mTOR蛋白表达量降低(均P<0.05)。结论甲炎康泰可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,促进细胞自噬,维持T细胞稳态,进而减轻炎症反应,延缓AIT发生发展。

桥本氏甲状腺炎实验模型构建研究进展

桥本氏甲状腺炎是一种自身免疫性疾病,临床检查以血清中TPOAb和TgAb的滴度显着增加为主,病理表现为淋巴细胞浸润、正常的甲状腺滤泡变小萎缩、间质纤维化。桥本氏甲状腺炎的实验模型构建是研究疾病的发病原因、病理机制和治疗方法的基础,本文主要从构建实验性桥本氏甲状腺炎的动物选择、动物模型构建方法、动物模型评价指标和细胞实验选择及相关机制验证方面进行综述,通过比较相关造模方式的优缺点,为相关工作者的基础研究提供参考和借鉴。