结缔组织生长因子的分泌表达及ELISA检测法的建立

目的 制备结缔组织生长因子 (CTGF)抗原 ,建立ELISA检测方法。方法 从血管内皮细胞中提取总RNA ,逆转录合成cDNA ,设计特异性引物 ,通过PCR方法扩增CTGFC区 2 4 2～ 349位氨基酸基因 ,插入噬菌体包膜蛋白基因Ⅲ的上游 ,制备CTGF融合蛋白。用纯化后的融合蛋白免疫家兔 ,获得抗体 ,抗体纯化后标记HRP ,建立ELISA。结果 成功克隆CTGFC区基因 ,插入表达载体经IPTG诱导后获得分子量为 2 5 0 0 0的融合蛋白 ,免疫学检测证实为CTGF。所得抗体用HRP标记。建立的ELISA法检测灵敏度为 2ng/ml,批内及批间平均变异系数为 5 .4 %和 7.5 % ,平均回收率为 10 4 .2 %。血红蛋白浓度在 0～ 5 0mmol/L ,总胆红素在 0～ 15 0 μmol/L ,三酰甘油在 0～ 2 .0mmol/L对测定结果无影响。 2例慢性乙型肝炎病人血标本 ,5例糖尿病肾病、3例肾功能衰竭、3例慢性肾炎尿标本为阳性。结论 CTGF可以作为判断纤维化发生、进展及预后的一个新指标。CTGFELISA检测方法的成功建立 。

人心肌肌钙蛋白I化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立检测人心肌肌钙蛋白I(cTnI)化学发光免疫分析方法。方法 用重组cTnI免疫新西兰兔获得抗体 ,经DEAE 2 3层析和 (NH4) 2 SO4沉淀纯化后 ,用碳化二亚胺 (EDC)法标记辣根过氧化物酶 ,SephadexG 2 0 0纯化。优化鲁米诺 H2 O2 肉桂酸发光体系 ,建立了cTnI化学发光免疫分析法。用该法检测 138例正常人及病人血清标本 ,确定正常值参考范围 ,并与ELISA法比较。结果 所得抗体的滴度为 1∶80 0 0。优化后的发光体系为 :鲁米诺 (4 .5mmol/L) ,H2 O2 (7.5mmol/L) ,四苯硼钠 (0 .8mmol/L) ,肉桂酸 (0 .4mmol/L) ,比单独用肉桂酸或四苯硼钠作增强剂灵敏度分别增加了 1.19和 1.0 5倍。本法检测灵敏度为0 .2ng/ml,线性范围为 0 .4～ 5 0ng/ml,批内CV平均 9.0 % ,批间CV平均 11.8% ,回收率为 10 4 .2 %。Hb浓度在 0～ 5 0nmol/L ,T Bil在 0～ 15 μmol/L ,TG在 0～ 2 .0mmol/L对测定结果无影响。与ELISA比较 ,两法结果一致 (P >0 0 5 ) ,相关系数r=0 .985 2(P <0 .0 1)。用BioCheck标准品为校正物 ,确定临床诊断参考范围为 <2 .12ng/ml,诊断符合率为 96 .2 %。结论 建立的cTnI化学发光免疫分析法可常规用于临床检验。

一种非精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸肽对血小板聚集和ERK1/2磷酸化作用的研究

目的观察一种非精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)肽(P1c,专利公开号:101497656)对血小板聚集的影响和细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化的作用。方法固相合成法制备P1c;将不同浓度(0～2.6 mmol/L)的P1c加入富血小板血浆中,以二磷酸腺苷(ADP)为诱导剂,检测血小板聚集率;用western blot检测小肽干预后对总ERK1/2和p-ERK1/2的表达。结果 P1c以浓度依赖方式抑制血小板的聚集;其对总ERK1/2的表达无影响,而显著降低血小板p-ERK1/2的表达(P<0.05)。结论 P1c可能通过抑制ERK1/2的磷酸化而减少血小板的聚集。

用pIII及pVIII噬菌体展示系统展示抗原和抗原表位的免疫原性的研究

目的探索用pIII和pVIII噬菌体展示系统展示抗原和抗原表位的免疫源性以及用噬菌体展示颗粒为免疫原制备抗体的可能性。方法从人心肌组织中获得cTnI基因,突变后克隆入pMDT18载体及pFD5pIII型噬菌体展示载体。合成两条互补寡聚核苷酸单链,退火后变成编码cTnI95～108位氨基酸的双链,与PC89pVIII型噬菌体展示载体连接。含有cTnI及其抗原表位基因的重组质粒转化辅助噬菌体敏感的XL1Blue细胞,用VCSM13超感染获得展示有cTnI及其抗原表位的噬菌体颗粒,测定其表达量。并以此为免疫源免疫新西兰白兔获得抗体,用ELISA方法测定抗体滴度。结果cTnI及其抗原表位在噬菌体颗粒表面得到成功展示,展示量分别为5ng/ml和96ng/ml。免疫后得到的抗体滴度为1∶300和1∶1800。结论制备具有一定空间结构的大分子蛋白的抗体时,可用pIII噬菌体展示系统,制备小分子肽线性表位的抗体时,pVIII展示系统具有独特的优势。

肿瘤病人血清N-乙酰氨基半乳糖苷酶检测的意义

参考Ｙａｍ ａｍ ｏｔｏ 的Ｎ－乙酰－α－Ｄ－氨基半乳糖苷酶（ＮＡＧａｌ）检测方法， 检测了肿瘤病人在手术前后血清ＮＡＧａｌ的水平，并与正常人对照。结果发现术前增高， 与正常人比较：Ｐ＜ ０．００５ 有显著性差异； 手术后： ０．０５＜ Ｐ＜ ０．１， 酶水平呈下降趋势。而诊断肾小管损伤的Ｎ－乙酰氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧｌｕ） 水平无显著差异（ Ｐ＞ ０．５）。因此ＮＡＧａｌ是肿瘤病人放疗、化疗、手术治疗效果以及预后判断的一个指标。

快速康复干预在急性胰腺炎恢复期患者护理中的应用效果分析

目的探究快速康复干预在急性胰腺炎恢复期中的应用效果。方法50例急性胰腺炎恢复期患者,通过入院奇偶数顺序成组的方式分为快速康复组(偶数)与对照组(奇数),各25例。对照组给予常规护理,快速康复组给予快速康复干预。比较两组患者护理效果;发热消失时间、腹痛消失时间、住院时间;护理满意度及知识知晓率。结果快速康复组护理总有效率96.0%高于对照组的72.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。快速康复组患者发热消失时间、腹痛消失时间、住院时间分别为(7.14±1.06)、(3.15±0.56)、(10.64±1.74)d,均短于对照组的(8.96±1.33)、(4.87±0.71)、(13.64±2.08)d,差异有统计学意义(P<0.05)。快速康复组护理满意度100.0%高于对照组的76.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。快速康复组知识知晓率为96.0%,高于对照组的68.0%差异有统计学意义(P<0.05)。结论临床急性胰腺炎恢复期患者护理工作中采取快速康复护理干预可有效提高临床护理效果,较实施传统护理患者恢复时间更短,知识知晓率更高,可在此类患者的护理中积极推广。

肝硬化失代偿期患者护理干预分析

失代偿期肝硬化由于病程长,合并症多且严重,加之治疗费用高,患者心理负担很大,不正确的饮食与生活习惯,直接影响临床治疗效果。因此,针对失代偿期肝硬化患者的心理问题,饮食和生活习惯进行护理干预,强化健康指导,对提高肝硬化的临床疗效、

康复干预对肝硬化合并消化道出血患者康复的影响研究

目的研究康复干预对肝硬化合并消化道出血患者的康复效果。方法 80例肝硬化合并消化道出血患者作为研究对象,按照护理方法不同分为对照组和观察组,各40例。对照组采用常规护理,观察组采用康复干预。比较两组患者的临床疗效、出血量及满意度。结果观察组总有效率为90.00%高于对照组的70.00%,差异有统计学意义(χ^2=5.000, P<0.05)。观察组患者出血量为(15.2±2.4)ml少于对照组的(27.1±4.3)ml,差异有统计学意义(t=15.283, P<0.05)。观察组患者满意度评分为(27.3±5.2)分高于对照组的(20.1±4.1)分,差异有统计学意义(t=6.877, P<0.05)。结论对肝硬化合并消化道出血患者治疗过程中采用康复干预,其康复效果更显著,因此有较高应用价值,值得推广使用。

低频脉冲胃电预防性治疗顽固性呃逆一例

患者男,57岁。该患者肺癌术后2年,一般状况尚可,定期化疗,每隔2周做化疗1次,因化疗副作用,每次化疗后患者均出现严重的顽固性呃逆反应,每次均超过72 h[1],连续几天不间断,频率快,腹部连续不自主抽动,影响呼吸,伴胸闷、气急。患者不能平卧,不能睡觉,食欲差,极度痛苦。

鼻肠管营养治疗急性重症胰腺炎的护理体会

急性重症胰腺炎（SAP）是一种急性炎症性疾病,病情变化快,病程长,病死率高,发病后,机体可很快出现超高代谢,高分解代谢,负氮平衡,营养代谢紊乱,无论是否接受手术治疗,都需要较长时间禁食,因此,合理使用空肠内营养和准确到位的护理措施是纠正营养代谢紊乱,顺利度过SAP急性期改善机体状况的重要手段,现将我院近3年25例实施肠内营养（NE）支持患者的护理体会总结如下。

重度溃疡性结肠炎的护理体会

溃疡性结肠炎（UC）是一种病因尚不十分清楚的直肠和结肠慢性非特异性炎症性疾病。病变主要局限于大肠黏膜与黏膜下层,临床表现为腹泻,黏液脓血便,腹痛[1]。病情一般较轻,但临床亦可见重症UC腹泻每日6次以上,明显黏液血便、伴贫血、体温升高、心率加快属内科急症,不及时治疗可危及生命。所以重症UC的治疗和护理已成为消化系统疾病的重要组成部分。

重症胰腺炎患者的观察和护理

重症胰腺炎是临床上较严重的类型,全身中毒症状重,持续性高烧,腹痛呈持续性剧烈腹痛,且呈弥漫性全腹痛,病情发展快,可引起休克,脏器衰竭,死亡率高。可达30%~60%[1]大多是由于胆道疾病酗酒暴饮暴食引起,做好重症胰腺患者的观察和护理,对疾病恢复,提高治愈率很有意义。

加工型马铃薯机械化、农场化高产栽培技术

1 马铃薯的增产潜力 马铃薯历来有高产作物之称，一般667m^2产量可达1000—1500kg，高产者可达5000kg以上，比其他粮食作物单位面积于物质产量高2-4倍。若以667m^2所产的淀粉来比较．在主要粮食作物中马铃薯是最高的。同时，马铃薯又是粮菜兼用作物．对解决粮食问题和农村山区人们吃菜问题都有重要意义。据资料介绍，创造最佳条件，满足马铃薯生理需求和生长发育要求，其最高理论产量可达16000kg／667m^2。这个理论产量比目前世界先进生产水平也高出3倍以上。从光能利用的角度分析．如果按可见光最大光能利用率达到12％（从理论上讲是可能的），那么马铃薯产量可达12500kg/667m^2。目前，世界最高产国家荷兰，其光能利用率也只有2．5％。我国目前的光能利用率（按850k-667m^2计）也只有0．75％。