应用噬菌体展示随机12肽库筛选诺如病毒抗原模拟表位

目的:利用Ph.D.-12噬菌体展示肽库筛选诺如病毒(NoV)的抗原模拟表位。方法:包被与GⅡ.4、GⅡ.6、GⅡ.17型NoV具有高特异性及中和能力较强的单链可变片段抗体(scFv),用Ph.D.-12噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选。ELISA鉴定淘选所得噬菌体与scFv的结合活性及其与NoV P蛋白的竞争作用;阳性克隆测序后进行生物信息学分析,合成多肽鉴定其抗原性。结果:发现1段与GⅡ.6 VP1区同源性较高的氨基酸序列“MG-D-W”,综合分析提示其可能为GⅡ.6 NoV的抗原模拟表位,且合成的包含“MG-D-W”的多肽可竞争抑制P蛋白与人类组织血型抗原(HBGAs)受体的结合。结论:“MG-DW”是与NoV单链抗体高亲和力的肽段,可能模拟了GⅡ.6 NoV与scFv结合的抗原表位。

辨证施护在《中医护理基础》病因教学中的实践与分析

辨证施护是中医护理基础的核心理念,将辨证施护运用到《中医护理基础》教学中去,对培养具有辨证思维并能够胜任社区护理和临床护理工作的人才队伍具有重要意义。我们通过课堂实践,以病因教学为例,将中医辨证论治思想和临床辨证施护实践相结合,为《中医护理基础》的教学提供了一种新的视角。

GⅡ-4型诺如病毒体外结合唾液HBGAs受体的检测与分析

目的建立诺如病毒(Norovirus,NoV)结合唾液HBGAs受体的实验方法、验证2株GⅡ-4型NoV毒株与我国人群唾液HBGAs的结合方式。方法收集健康志愿者唾液标本,采用凝集抑制实验法检测唾液中HBGAs血型物质,用EIA法检测NoV VLPs、阳性毒株与HBGAs的结合情况。结果63份标本检出O型21例(占33.3%),B型14例(占22.2%),A型和非分泌型各13例(分别占20.6%),AB型2例(占3.2%)。rVA387、2株GⅡ-4型毒株均能结合分泌型,与非分泌型唾液不反应。结论本研究成功建立了NoV结合唾液HBGAs受体的实验方法,通过NoV毒株与HBGAs相互作用的研究有助于了解NoV的宿主适应特性及病毒进化和流行规律;同时为筛选防治我国人群的抗NoV药物提供技术平台。

血清药理学在抗肝纤维化研究中的应用概况

目前的研究表明 ,含药血清实验方法能很好地反映中药的药效 ,可以用于体外药理学实验中有效药物、制备工艺的初步筛选 ,为新药研制提供有意义的信息。随着中医药抗肝纤维化研究的深入 ,血清药理学方法的应用逐渐增多。

以肝星状细胞为靶标的抗肝纤维化治疗进展

任何病因导致的慢性肝损伤,均可发展为肝纤维化。损伤肝脏的纤维化形成过程中,活化肝星状细胞(HSC)是主要细胞类型,并有重要细胞因子参与。目前治疗都以阻止活化HSC在损伤部位聚集和细胞外基质沉积为目标。该文就以HSC为靶标的抗肝纤维化最新治疗方案作一综述。

保肝宁对HSC-T6细胞凋亡的影响

目的观察复方保肝宁对HSC-T6细胞凋亡的影响,以进一步探讨保肝宁抗肝纤维化的作用机理。方法引进HSC-T6细胞株并传代培养。用复方保肝宁给正常大鼠灌胃,制备药物血清,温育培养细胞。用吖啶橙染色法和流式细胞仪测定细胞凋亡。结果正常大鼠血清培养组HSC-T6细胞核DNA为黄色或黄绿色均匀荧光,自身凋亡率为(9.67±0.57)%,复方保肝宁药物血清一倍、两倍剂量组细胞核或细胞质内可见致密浓染的黄绿色染色,甚或见黄绿色碎片,凋亡率分别为(22.73±0.78)%,(23.97±2.50)%,明显高于正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。结论体外培养的HSC具有一定程度的自身凋亡发生,复方保肝宁的促肝星状细胞凋亡作用可能是其抗肝纤维化作用的主要机理之一。

慢性乙型肝炎中医证型分布及保肝宁的疗效观察

目的:观察慢性乙型肝炎患者的证型分布规律和保肝宁治疗的症状改善作用。方法:选择慢性乙型肝炎患者208例,参照中医辨证标准进行辨证分型,对纳入治疗的128例患者随机分为两组,对照组(64例)采用常规护肝治疗,治疗组(64例)给予复方保肝宁汤,观察治疗前后两组患者临床症状的改善作用和肝脏病理肝纤维化程度改善情况。结果:中医证型出现频度从高至低依次为:肝郁脾虚型>湿热中阻型>瘀血阻络型>肝肾阴虚型>脾肾阳虚型。保肝宁治疗组能显著改善患者纳差、乏力、腹胀等症状。结论:慢性乙型肝炎的主证为肝郁脾虚,保肝宁具有较好的改善慢性乙型肝炎患者症状和纤维化病理进程作用。

诺如病毒病毒样颗粒的表达及其与HBGAs受体的结合研究

目的:以杆状病毒为载体,在昆虫细胞sf9中表达GⅡ-4型野生株诺如病毒(Noroviruses,NoV)GZ121的衣壳蛋白ORF2,并验证其与组织血型抗原(Histoblood group antigen,HBGAs)受体的结合活性。方法:双酶切质粒PMD18-T-GZ121 ORF2酶切,连接入线性化载体PFastBacTM1,获得重组转座载体pFastBac-GZ121 ORF2,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统获得重组杆状病毒,将其转染昆虫sf9细胞进行蛋白表达,用蔗糖超离方法纯化以及免疫印迹、透射电镜等方法鉴定表达产物,用EIA法检测NoV-VLP与HBGAs的结合特性。结果:成功表达了分子量约为58 kD的NoV衣壳蛋白,大小约30 nm与预期相符,NoV-VLP与A、B、O型均能结合,与非分泌型唾液不结合,结合方式与rVA387相一致。结论:我国优势流行株GⅡ4型NoV病毒样颗粒(Virus-like particles,VLP)的表达成功及NoV-VLP和HBGAs受体结合模型的建立,为我国NoV疫苗的开发和防治药物的研究奠定了基础。

抗诺如病毒性胃肠炎药物靶点研究新进展

越来越多的流行病学资料表明诺如病毒是致病毒性胃肠炎的最主要病原体。目前尚缺乏针对诺如病毒性胃肠炎的有效抗病毒药物和疫苗,近年来,在诺如病毒的基因组结构、病毒蛋白、RNA复制和病毒-宿主相互作用等方面取得了重要进展。这些进展为抗诺如病毒性胃肠炎的药物研究提供了新思路。如:通过多糖受体阻断病毒与宿主细胞相互作用、抑制病毒蛋白酶和多聚酶作用和抑制病毒复制等方面。该文就主要的抗诺如病毒性胃肠炎的治疗靶点作一综述。

中医药抗病毒性腹泻有效方药的筛选与分析

目的:探讨分析中医药治疗病毒性腹泻的有效方药,筛选出具有研究前景的核心药物,并总结出中医治疗的规律和特点。方法:从中国生物医学文献数据库中检索近10年中医药治疗病毒性腹泻的文献数据库,收集文献中关于中药组方的记录,建立数据库,采用SPSS13.0统计软件包进行统计描述的分析。结果:中医药治疗病毒性腹泻的核心方剂是五苓散、葛根芩连汤、泻心汤、藿香正气散、理中汤、七味白术散;核心药物是云苓、白术、葛根等31味。结论:脾虚湿盛是病毒性腹泻的主要病机,治疗应健脾渗湿并重,并兼顾病因,加减化裁,忌闭门留寇。

和血明目片治疗视网膜静脉阻塞的临床观察

目的:探究和血明目片治疗视网膜静脉阻塞的疗效。方法:将92例93眼患者随机分为两组,治疗组50例51眼给予和血明目片治疗,对照组42例42眼给予血塞通片治疗。根据视力恢复情况、荧光血管造影、自觉症状有无改善进行观察。结果:治疗组治愈17眼,有效27眼,无效7眼,总有效率86%。对照组治愈8眼,有效17眼,无效17眼,总有效率60%。结论:和血明目片能促进视网膜出血渗出吸收,恢复视网膜功能,提高视网膜静脉阻塞患者的视功能。经比较,和血明目片在提高视力,改善眼底方面的疗效优于血塞通片(P<0.05)。

合理运用病案教学法,提高中基教学效果

中医学是一门实践性非常强的学科,在《中医基础理论》教学中,重视加强理论联系临床,开展病案教学法,精心编制病案,循序渐进设置问题,讲评总结,加深了学生对基础理论的理解,又锻炼培养了他们的临床思维能力。

保肝宁对HSC-T_6细胞增殖及Ⅰ型胶原表达的影响

目的 :探讨复方保肝宁对HSC -T6细胞增殖及Ⅰ型胶原表达的影响。方法 :复方保肝宁给正常大鼠灌胃 ,制备药物血清 ,温育培养HSC -T6细胞 4 8小时。MTT法测定星状细胞增殖 ,ELISA法测定培养上清的Ⅰ型胶原表达量。结果 :复方保肝宁药物血清能明显抑制HSC -T6细胞增殖 ,抑制细胞的Ⅰ型胶原分泌。实验表明 ,在抑制HSC -T6细胞增殖和Ⅰ型胶原蛋白分泌方面 ,高剂量组药物血清无低、中剂量组明显 ,是否为血清药物浓度对细胞的影响 ,尚需进一步研究。结论 :复方保肝宁能明显抑制HSC -T6细胞的活化 ,对HSC -T6细胞Ⅰ型胶原表达的抑制可能是该方抗肝纤维化的主要作用机制之一。

原发性翼状胬肉两种治疗方法的疗效观察

目的:探讨原发性翼状胬肉两种治疗方法的疗效观察。方法:A组25例采用翼状胬肉切除联合丝裂霉素术治疗,B组10例采用自体球结膜+角膜缘干细胞移植术治疗。根据角膜创面恢复、结膜伤口愈合、胬肉有无复发进行观察。结果:A组患者术后角膜上皮第3～7d恢复,结膜充血10～15d消退,3例复发;B组患者术后角膜上皮第2d恢复,结膜充血7～10d消退,1例复发。结论:翼状胬肉切除术联合丝裂霉素和自体球结膜+角膜缘干细胞移植术都能降低胬肉复发率,二者相比较,自体球结膜+角膜缘干细胞移植术优于翼状胬肉切除联合丝裂霉素。

表面麻醉在白内障超声乳化及人工晶状体植入术中的应用

0引言 白内障超声乳化及人工晶状体植入术近年来在我国迅速发展,手术技巧上的不断完善及材料上的改进使得单纯表面麻醉下行白内障摘出成为可能[1]。我科从2004年开展白内障超声乳化及人工晶状体植入术以来,共收治患者57例,全部选用表面麻醉下超声乳化术, 现将57例白内障超声乳化术的结果报道如下。

四逆散临床应用及其相关实验研究进展

四逆散源于<伤寒论·辨少阴病脉证并治>"少阴病,四逆,其人或咳、或悸、或小便不利、或腹中痛、或泻利下重者,四逆散主之."方由柴胡、炙甘草、枳实、芍药组成.主治肝胆气机阻滞、脾胃升降受阻、阳热内郁不能通达四末之四逆,并伴有胸脘、胁肋满闷之中满症.方中以柴胡疏肝透邪,枳实下气破结,一升一降,使中焦郁滞疏解;白芍柔肝缓急,炙甘草益气健脾,两药相合可使肝木平而脾土健、胃气和.合而用之,可使郁滞解,升降复,气机畅,郁热自能通达.本文仅就四逆散临床应用和相关研究做一综述.

复方保肝宁对次氮基三醋酸铁溶液致HSC-T6细胞氧化应激的防护作用

目的 :探讨复方保肝宁对次氮基三醋酸铁溶液 (FeNTA)致肝星状细胞系 (HSC T6)细胞氧化应激反应的影响。方法 :用复方保肝宁给正常大鼠灌胃 ,制备药物血清。建立FeNTA所致HSC T6细胞氧化应激脂质过氧化模型 ,观察保肝宁药物血清作用后过氧化氢 (H2 O2 )、丙二醛 (MDA )、谷胱甘肽 (GSH )、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)含量的变化。结果 :FeNTA与HSC T6共同培养 1小时、 3小时、 5小时、 2 4小时后脂质过氧化物(H2 O2 、MDA)生成均增多 ,抗氧化能力 (GSH Px、GSH)均下降 (5小时最为显著 )。复方保肝宁药物血清可抑制HSC氧化应激反应过程中H2 O2 、MDA含量 ,同时能不同程度升高GSH Px、GSH水平。结论 :复方保肝宁能降低FeNTA所致HSC氧化应激反应时的脂质过氧化水平。对HSC氧化应激的防护作用 ,减弱HSC的自分泌放大效应 ,可能是复方保肝宁抗肝纤维化的主要机制之一。

保肝宁对HSC-T6细胞TGFβ_1表达的影响

目的:观察复方保肝宁对HSC-T6细胞表达TGFβ1含量的影响,以进一步探讨保肝宁抗肝纤维化的作用机理。方法:制备复方保肝宁药物血清,温育培养HSC-T6细胞48h。采用TGFβ1细胞免疫组化法和貂肺上皮细胞MV-1-Lu增殖抑制生物学方法测定TGFβ1表达。结果:传代培养48h的HSC细胞爬片可见TGFβ1阳性表达,阳性表达产物主要见于胞质或胞膜。二倍剂量保肝宁药物血清培养48h的HSC细胞爬片TGFβ1表达强度明显减少。二倍剂量保肝宁药物血清能明显抑制HSC-T6细胞TGFβ1的分泌量。结论:该方抑制HSC活化增殖的机理可能在于抑制细胞TGFβ1的表达及其自分泌,并可能通过TGFβ1生成的减少,影响TGFβ1细胞内信号转导,从而下调型胶原的表达。

因“材”施教《中医基础理论》的探索与实践

通过分析研究教学对象的不同特点,根据他们不同的专业发展需要、层次水平,采取因"材"施教的教学原则,分别针对不同专业提出了不同的教学思路。本文对因"材"施教的教学理念在中医基础理论实际教学中的渗透及实践进行了阐述。