葫芦素B在体内外对乳腺癌细胞的生长抑制作用

目的:体内外观察葫芦素B(cucurbitacin B)对人乳腺癌细胞系MCF-7的增殖抑制和诱导凋亡作用,为临床应用提供依据。方法:用浓度分别为0.001、0.01、0.1、1、10以及100μmol/L的葫芦素B处理MCF-7细胞,24、48和72 h后用MTT法检测细胞增殖。用0.1和10μmol/L的葫芦素B处理MCF-7细胞24 h,之后用流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,并用倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞凋亡。建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,观察葫芦素B的体内抑瘤作用。结果:MTT结果显示葫芦素B对MCF-7细胞的增殖抑制作用具有明显的剂量和时间依赖性。流式细胞仪检测提示,随着葫芦素B浓度增高,处于S期和G2/M期细胞的比例逐渐升高,同时伴随G0/G1期细胞的减少以及细胞凋亡率的逐渐升高。统计学分析提示,各实验组之间以及实验组与对照组之间均有显著差异(P<0.05)。荧光显微镜显示典型的细胞凋亡。此外,体内实验亦提示,葫芦素B可剂量依赖性地抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生长。结论:葫芦素B可抑制乳腺癌细胞的增殖,引起S期和G2/M期阻滞,诱导乳腺癌细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤效应。

葫芦素B体外对乳腺癌细胞的生长抑制作用研究

目的观察葫芦素B(Cucurbitacin B)对非磷酸化STAT3人乳腺癌细胞系MCF-7和磷酸化STAT3人乳腺癌细胞系MDA-MB-435S的增殖抑制和诱导凋亡作用,为临床应用提供依据。方法用不同浓度的葫芦素B分别处理MCF-7和MDA-MB-435S细胞,48 h后用MTT法检测细胞增殖;用荧光显微镜观察细胞凋亡。结果MTT结果显示,葫芦素B对MCF-7和MDA-MB-435S细胞的增殖抑制作用具有明显的剂量依赖性,统计学分析提示,各实验组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);荧光显微镜显示典型的细胞凋亡。结论葫芦素B对人乳腺癌细胞的增殖具有抑制作用(与STAT3的活化状态无关),诱导乳腺癌细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤效应。

阿克拉霉素A毫微囊制备工艺及抑瘤试验

本文以氰基丙烯酸正丁酯（ＢＣＡ）为囊材制备了阿克拉霉素Ａ毫微囊（ＡＣＭ－Ａ－ＮＣ），利用均匀设计方案选出了较佳处方，加冻干赋型剂制得了阿克拉霉素Ａ毫微囊冻干品，冻干前后的平均粒经分别为（１２０±３４）ｎｍ和（１４６±３３）ｎｍ，应用凝胶过滤色谱法得阿克拉霉素Ａ的包封率为４７．６％，并进行了ＡＣＭ－Ａ－ＮＣ的ＬＤ５０测定以及对Ｓ１８０肉瘤，Ｐ３８８白血病的抑瘤实验，结果表明，ＡＣＮ－Ａ－ＮＣ降低了ＡＣＭ－Ａ的毒性，其抗癌活性也有所改善。

阿克拉霉素A毫微囊在大鼠体内的组织分布研究

本文利用反相高效液相色谱法测定了阿克拉霉素Ａ毫微囊（ＡＣＭ－Ａ－ＮＣ）在大鼠体内各组织的分布．结果表明：阿克拉霉素Ａ在肺、脾、小肠和胸腺分布较多，而心、肝、肾中分布较少．与ＡＣＭ－Ａ水溶液对比研究表明：ＡＣＭ－Ａ－ＮＣ在肺内分布量较其水溶液提高３．６倍，在脾中提高１．４倍，肝中２．２倍，肾中１．６倍，胸脾中１．２倍，大肠１．２倍，小肠１．１倍，心中约１．２倍．

阿克拉霉素-A的体内代谢

蒽环类抗肿瘤抗生素在目前肿瘤化疗中所起的作用越来越引人瞩目,其中,对阿霉素(adriamycin,ADM)和正定霉素(daunomycin,DNR)的研究较多。它们具有很强的抗癌活性,但由于其骨髓抑制和心脏毒性等副作用,限制了它们临床应用。Oki T和Umezara H等进行了大量的研究工作。

丝裂霉素C脂质体的制备工艺研究

本文研究了不同的处方组成及制备工艺对丝裂霉索 C 脂质体包封率的影响。实验结果表明,当处方中加入油酸时,能使丝裂霉素 C 包封率由原来的7%增长至15%;当运用不同的制备工艺时,其药物包封率亦不相同:二次乳化法包封率>薄膜分散法>注入法。

阿克拉霉素A毫微囊的研究

研究工作阐述了毫微囊的制备及冻干条件，并进行了毫微囊的再分散性实验，测定了毫微囊的粒度分布和药物包封率。家兔静脉注射阿克拉霉素A毫微囊后，血药浓度表明其符合二室开放模型，与阿克拉霉素A注射液相比，阿克拉霉素A毫微囊在家兔体内的消除半衰期较长，（前者t1/2(β)=10.25h,Auc=81.88mg/L·h;后者t1/2(β）=17.04h,Auc=106.74mg/L·h），而且阿克拉霉素A包于聚氰基丙烯酸正丁酯毫微囊后改变了其在大鼠体内的组织分布。结果表明：阿克拉霉素A在肺、胸腺、用和小肠中浓度较高，而在心、肾、肝和大肠中浓度较低。

大扶康、大蒜素、大蒜油注射液对深部真菌的抑杀作用

进行了大扶康、大蒜素、大蒜油注射液抗深部真菌药效学的研究 ,采用沙氏培养基倍比稀释法观察不同接菌量、不同培养时间对药物最小抑菌浓度 (MIC)、最小杀菌浓度 (MBC)的影响 .用1× 10 5cfu/ /mL的接菌量 ,测定了大扶康、大蒜素、大蒜油注射液对 6 5株 (临床分离和标准菌株 )深部真菌的MIC50 、MIC90 、MBC50 、MBC90 .结果显示大扶康对白色念珠菌、热带念珠菌和新型隐球菌有较好的抑制作用 ,而对其它真菌无抑制作用和杀灭作用 .大蒜素、大蒜油注射液对所有真菌均有抑、杀作用 ,说明他们具有广谱抑、杀真菌的作用特点 .提示 :临床在不明确的严重真菌感染时 。

葫芦素B对肝癌细胞内阿霉素浓度的影响

目的建立肝癌细胞H22和HepG2中阿霉素含量测定的高效液相色谱方法,以明确葫芦素B对阿霉素在细胞内浓度的影响。方法色谱柱为Waters Sunfine C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-0.01%醋酸(40∶60,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,荧光检测激发波长为495 nm,发射波长为560 nm,以盐酸表阿霉素为内标。结果在HepG2细胞液中,阿霉素线性范围为0.1～6.4μg/mL(r=0.993 4,n=7),加样回收率为107.4%,RSD为3.77%;在H22细胞液中,阿霉素线性范围为0.625～20μg/mL(r=0.996,n=7),加样回收率为105.93%,RSD为5.64%。结论在肝癌细胞中,葫芦素B能明显促进阿霉素内流,减少外排。葫芦素B使肝癌细胞中阿霉素的浓度升高,两者联合可能起到更好的抗肝癌作用,葫芦素B可能逆转肝癌细胞的阿霉素耐药性。

维康醇对肝癌细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用

目的研究维康醇对肝癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡作用的影响。方法以不同浓度维康醇处理对数生长期人肝癌细胞HepG2,利用MTT法测定维康醇对细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪PI单染检测细胞周期分布情况的改变,流式细胞仪Annexin V FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率。结果 MTT结果显示:维康醇对HepG2细胞具有明显的生长抑制作用并呈浓度和时间依赖性。流式细胞术结果显示:30μmol/L维康醇作用于HepG2细胞48 h后,处于G2/M期的细胞比例显著升高,同时伴随G1/G0期细胞比例下降,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。Annexin V FITC/PI染色检测结果显示:30μmol/L维康醇作用于HepG2细胞48 h后,细胞凋亡率显著升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论维康醇对肝癌细胞有明显的增殖抑制作用,并具有浓度和时间依赖性;维康醇通过引起细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡发挥其抗肝癌作用。

葫芦素B和阿霉素联合应用在体内外对肝癌细胞H22的生长抑制作用

目的研究葫芦素B和阿霉素联合应用在体内外对肝癌细胞H22的生长抑制作用。方法将40只雌性昆明小鼠随机分为4组,每组10只,包括阴性对照组(生理盐水组)、阿霉素组、葫芦素B组、联合组。分别以阿霉素、葫芦素B、葫芦素B联合阿霉素处理H22细胞,培养48 h后MTT法检测细胞增殖情况。计算抑瘤率、白细胞数、胸腺指数、脾脏指数和血药浓度。结果 MTT结果显示,与阿霉素组相比,联合组对H22细胞的增殖抑制作用明显增强,联合组与阿霉素组之间、高剂量组与低剂量组之间的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。联合组与阿霉素组相比,抑瘤率明显增强,并且联合组阿霉素在心脏中的浓度明显降低(P<0.05)。结论葫芦素B和阿霉素联合应用具有增强抗H22肝癌作用。

葎草中黄酮类成分的分离鉴定及对HepG2细胞的抑制作用

目的:对葎草中主要黄酮类化学成分进行提取分离,并检测其对HepG2细胞的抑制作用。方法:乙醇提取葎草后,采用柱层析技术分离纯化提取的有效成分,并通过光谱法分析鉴定化合物结构。采用台盼蓝染色法检测葎草中木犀草苷(LGL)和大波斯菊苷(AGL)对HepG2细胞的抑制作用。结果:葎草中的主要黄酮类成分为木犀草苷和大波斯菊苷。台盼蓝实验结果显示,当LGL和AGL的浓度由6.25μmol·L^(-1)升到100.0μmol·L^(-1)时,LGL对HepG2细胞增殖抑制率由28.8%上升至95.2%,AGL对HepG2细胞增殖抑制率由3.6%上升至21.3%。结论:木犀草苷对HepG2细胞生长具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性,而大波斯菊苷对HepG2细胞生长抑制作用不明显。

喉鳞癌中p-STAT3和Skp2的表达及其相关性研究

目的:检测喉鳞癌中信号转导和转录激活因子3的活化和Skp2蛋白的表达,探讨其临床意义及相关性。方法:采用免疫组织化学法检测p-STAT3和Skp2蛋白在56例喉鳞状细胞癌和30例喉全(或近全)切除者癌旁(>2.0cm)正常黏膜中的表达,应用Metamorph/DP10/BX41显微图象分析系统测定阳性表达的平均光密度值,并进行统计分析。结果:与癌旁正常黏膜组相比较,p-STAT3和Skp2蛋白在喉鳞癌组织中过表达(P<0.01);p-STAT3和Skp2蛋白过表达与喉鳞癌的分化程度、临床分期、颈淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01);在喉鳞癌组织中p-STAT3蛋白和Skp2蛋白的表达呈正相关关系,相关系数r=0.8041(P<0.01)。结论:p-STAT3和Skp2蛋白过表达与喉鳞癌的发生、发展和转移等生物学行为有关,两者的表达呈正相关。

腹腔积液GP73和CEA检测对良恶性腹腔积液鉴别诊断价值

目的：探讨GP73和CEA在良恶性腹腔积液鉴别诊断中的价值。方法：216例腹腔积液患者根据腹腔积液性质分为良性组（n=59）和恶性组（n=157）,对患者腹水和血清中CEA、GP73水平进行检测,利用受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析其在鉴别腹腔积液良恶性中的价值。结果：恶性组患者腹腔积液和血清中GP73和CEA水平均高于良性组（P〈0.05）;Pearson相关分析显示,恶性组患者腹腔积液中GP73水平与血清中GP73水平呈正相关（r=0.216,P=0.007）,且CEA水平与血清中CEA水平呈正相关（r=0.432,P=0.000）;ROC曲线分析显示,腹腔积液中GP73和CEA在判定良恶性腹腔积液时的临界值分别为22.57ng/ml和11.41ng/ml;血清中GP73和CEA在判定良恶性腹腔积液时的临界值分别为18.61ng/ml和9.62ng/ml。腹腔积液中GP73和CEA联合诊断时曲线下面积0.869（95%CI：0.820~0.917）,灵敏度79.0%,特异度81.4%。结论：GP73和CEA水平在恶性腹腔积液患者腹腔积液及血清中均显著升高,相比于腹腔积液或血清中GP73或CEA单独检测,腹腔积液GP73联合CEA指标在判定腹腔积液良恶性方面更有优势。

维康醇对DNA拓扑异构酶活性的影响

目的探讨维康醇对DNA拓扑异构酶活性的影响。方法以质粒pBR322超螺旋DNA为底物,采用凝胶电泳分别检测维康醇对拓扑异构醇Ⅰ(TopoⅠ)和拓扑异构醇Ⅱ(TopoⅡ)介导的pBR322 DNA解旋反应的影响。结果维康醇对TopoⅠ介导的pBR322解旋反应无明显的抑制作用,而对TopoⅡ的活性有明显的抑制作用。结论维康醇的直接作用靶点可能是DNATopoⅡ,该药可能成为新的TopoⅡ抑制剂。

大蒜油注射液抗真菌药效学研究

为探讨大蒜油注射液的抗真菌效果,采用沙堡氏葡萄糖琼脂基和沙堡氏液基两种培养基,以二倍稀释法测定5种真菌的最小抑菌浓度(MIC),其结果相近.对白色念珠菌敏感性最强,对热带念珠菌敏感性较强,对新型隐球菌、烟曲霉菌和毛霉菌敏感性次之.大蒜油、大蒜素和大蒜油注射液对白色念珠菌的最小杀菌浓度(MBC)均为12.5μg/ml,对热带念珠菌均为50μg/ml,对烟曲霉菌分别为25μg/ml、25μg/ml、12.5μg/ml。

血小板源生长因子诱导人胚胎肺纤维细胞增殖信号转导通路研究

目的研究血小板源性生长因子(PDGF)对人胚胎肺纤维细胞(HFL1)的增殖作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝法检测不同浓度PDGF对HFL1的增殖作用,观察不同浓度细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059、p38激酶抑制剂SB203580及PI-3K激酶抑制剂Wortmannin(WMN)对PDGF诱导HFL1增殖作用的影响。结果PDGF 50 ng/ml时对HFL1的诱导增殖作用明显,并呈剂量依赖性;PD98059 1μmol/L、WMN 100 nmol/L、SB2035805μmol/L可抑制PDGF诱导的HFL1增殖。结论PDGF诱导HFL1增殖是通过蛋白激酶和PI-3K信号转导途径实现的。

纤维连接蛋白诱导人胚肺成纤维细胞增殖信号转导机制探讨

【目的】探讨纤维连接蛋白（FN）诱导人胚肺成纤维细胞（HFL1）增殖的细胞外信号调节激酶（ERK）信号转导通路。【方法】用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖情况。采用不同浓度FN刺激HFL1并观察不同浓度下细胞ERK信号转导通路阻断剂PD98059对FN诱导HFL1增殖作用的影响；并用蛋白免疫印记法（Western Blot）观察FN浓度为50ng／mL时，PD98059对HFL1中磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）表达的影响。[结果]FN对HFL1诱导增殖作用呈剂量依赖性升高趋势，在50ng／mL时作用显著；ERK抑制剂PD98059可抑制FN诱导的HFL1细胞增殖。【结论】FN诱导HFL1的细胞增殖可以通过ERK信号转导途径实现。

纤维连接蛋白诱导人胚肺成纤维细胞增殖的信号转导通路研究

目的探讨纤维连接蛋白(FN)诱导人胚肺成纤维细胞(HFL-1)增殖的信号转导通路。方法采用不同浓度FN刺激HFL-1并观察磷酸酰基醇-3-激酶(PI3K)信号转导通路抑制剂wortmannin(WMN)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)信号转导通路抑制剂PD98059和P38蛋白激酶信号转导通路抑制剂SB203580对FN诱导HFL-1增殖作用的影响。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况。结果FN对HFL-1诱导增殖作用呈剂量依赖性升高趋势,在50ng/mL时作用显著;WMN,PD98059和SB203580均可抑制FN诱导的HFL-1细胞增殖。结论FN诱导HFL-1的细胞增殖可以通过PI3K和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径实现。

葫芦素E对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及其机理研究

背景与目的:葫芦素E(cucurbitacin E,CuE)具有抗肿瘤、抗化学致癌、保肝、提高机体免疫力等多种生物活性。本研究以人卵巢癌细胞系ES-2为靶细胞,观察CuE对ES-2细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,探讨其作用机理。方法:MTT法检测不同浓度CuE处理ES-2细胞24、48h和72h后的细胞增殖情况,倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化和细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期分布,Western blot检测CuE对细胞内磷酸化STAT3表达的影响。结果:CuE抑制ES-2细胞增殖,增加CuE浓度和延长作用时间可使抑制作用增强。流式细胞仪检测显示,1μmol/LCuE作用ES-2细胞24h后,处于S期和G2/M期的细胞比例明显升高,分别由(10.55±0.91)%、(16.31±4.61)%上升至(18.53±1.43)%、(58.34±5.77)%,同时伴随G1期细胞由(73.13±4.70)%降至(23.12±5.45)%,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光显微镜显示CuE处理组出现典型的细胞凋亡。Westernblot结果显示CuE可降低磷酸化STAT3的表达,并随CuE浓度升高作用增强。结论:CuE可抑制ES-2细胞的增殖、诱导细胞凋亡和引起细胞周期阻滞,该作用可能与细胞内磷酸化STAT3表达下降有关。