DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂诱导鼻咽癌上皮细胞凋亡的实验研究

拟从细胞凋亡角度出发，探讨能够诱导鼻咽癌上皮细胞凋亡的因素，为有效地防治该恶性肿瘤提供新的思路。方法：光镜下观察细胞的形态变化；流式细胞仪检测细胞周期变化及亚二倍体比例；ＤＮＡ凝胶电泳及二苯胺法测定ＤＮＡ片段化程度。结果：一定浓度的拓朴异构酶Ⅰ（Ｔｏｐｏｉｓｏ－ｍｅｒａｓｅⅠ，ＴＯＰＯⅠ）抑制剂喜树碱（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ，ＣＰＴ）体外作用于人低分化鼻咽癌上皮细胞系ＣＮＥ－２Ｚ细胞一定时间后，镜下可见细胞体积缩小，染色质凝聚，胞膜突起及凋亡小体形成等形态变化。２～１０μｍｏｌ／Ｌ的ＣＰＴ分别作用１２小时后作流式细胞仪检测，亚二倍体比例均为３０％左右；各浓度分别作用２４小时，亚二倍体比例均为５０％左右；同时细胞周期有明显的变化，主要表现为Ｇ２／Ｍ期细胞减少。ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳呈典型的梯形带。结论：拓朴异构酶Ⅰ抑制剂ＣＰＴ对人低分化鼻咽癌上皮细胞具有明显的凋亡诱导作用。

流式细胞术在细胞凋亡检测中的应用

凋亡是细胞受一些生理或病理信号刺激时所发生的一种程序性死亡过程近年来，有关肿瘤细胞凋亡的研究已成为一个新的研究热点．围绕凋亡细胞出现的典型的形态变化及生化改变，建立了一些检测分析凋亡细胞的方法．文章着重概述了流式细胞术（ＦＣＭ）在细胞凋亡研究中的应用，尤其是ＮＴ法。

鼻咽癌肿瘤干细胞分化过程中促血管生成相关因子的表达及其对血管生成细胞的影响

目的探讨IL-6作为鼻咽癌复发治疗靶点的可行性。观察鼻咽癌肿瘤干细胞分化初期促血管生成相关因子的表达情况及其对血管生成细胞克隆形成的影响。方法本研究首先采用ELISA检测鼻咽癌肿瘤干细胞分化初期细胞因子IL-6及血管内皮生长因子VEGF的分泌情况;进而采用Real timePCR和Western blot技术对比IL-6干扰前后HIF-1α、STAT3、VEGF的转录和翻译水平,并采用平板克隆形成技术检测不同处理组细胞上清液对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)克隆形成能力的影响。结果分化初期的鼻咽癌肿瘤干细胞与未分化细胞及普通鼻咽癌细胞CNE-2细胞株比较,具有更强的分泌IL-6及VEGF的能力,且IL-6、HIF-1α、STAT3、VEGF在转录和翻译水平都有较高表达;利用RNA干扰技术沉默IL-6基因表达后,能够明显降低HIF-1α、STAT3、VEGF的表达;分化初期的鼻咽癌肿瘤干细胞上清液较未分化细胞上清液具有更强的促HUVECs细胞平板克隆形成能力,而在鼻咽癌肿瘤干细胞分化初期沉默IL-6基因后所得到的细胞上清液的促HUVECs细胞克隆形成能力明显降低。结论 IL-6可作为鼻咽癌发生发展的一个治疗靶点,为临床提供治疗参考。在鼻咽癌肿瘤干细胞分化初期促血管生成因子表达升高并且具有较强的促血管生成能力。

鼻咽癌上皮细胞凋亡有关癌基因表达的变化

用DNA拓扑异构酶I抑制剂-喜树硷体外诱导人低分化鼻咽癌上皮细胞系（CNE－2Z）细胞发生凋亡，并用流式细胞仪检测了有关癌基因表达的变化情况。结果：4μmol／L喜树俭作用24h后，c－myc、bcl－2及p53表达均较对照组明显降低，提示CNE－2Z细胞发生凋亡时或许会受c－myc、bcl－2和p53等癌基因的影响。

几种生化因素对喜素碱诱导鼻咽癌细胞凋亡的影响

目的 研究有关生化因素对喜树碱（ＣＰＴ）诱导人鼻咽癌细胞凋亡的影响。方法 在ＣＰＴ诱导人鼻咽癌ＣＮＥ－２Ｚ 细胞凋亡的基础上，采用流式细胞仪及二苯胺反应等方法，观察了多胺、Ｃａ２＋、Ｍｇ２十依赖性内切酶活性抑制剂及ＰＡＲＰ活性抑 制剂对ＤＮＡ片段化形成的影响。结果 多胺可明显抑制ＣＰＴ诱导的ＣＮＥ－２Ｚ细胞凋亡，使片段化ＤＮＡ明显降低，Ｐ＜０．０５。内 切酶及ＰＡＲＰ活性抑制剂与ＣＰＴ共同作用ＣＮＥ－２Ｚ细胞后测得片段化ＤＮＡ与单用ＣＰＴ相比无显著性差异，Ｐ＞０．０５。结论 喜树碱诱导的 ＣＮＥ－２Ｚ细胞凋亡可能与一种非 Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋依赖性内切酶活性有关，且受多胺的调节。

绒毛膜促性腺激素对人胃腺癌细胞增殖的影响

目的 探讨人绒毛膜促性腺激素 (h CG)对人胃腺癌 SGC- 790 1细胞增殖生长的影响。方法 用 MTT法检测细胞生长率及存活率。结果 h CG在 10 - 1 1～ 10 - 6 mol/ L 范围内 ,对胃腺癌细胞的生长具有促进作用 ,但无明显的时间依赖关系。结论 h CG对胃腺癌细胞的生长具有一定的促进作用 ,提示 h

绒毛膜促性腺激素对人胃腺癌细胞胞浆cAMP水平的影响

为探讨绒毛膜促性腺激素(hCG)作用于胃腺癌细胞后的信号传递机制，我们对hCG对胃腺癌SGC7901细胞胞浆内cAMP含量的影响进行了观察。结果显示：当hCG的浓度由10－11 mol/L增加到10－6 mol/L时，胞内cAMP的水平从2.1 pmol/mg蛋白增至约10 pmol/mg蛋白(P<0.01)，与对照组相比有显著性差别(P<0.01)。同时，此效应还具有时间依赖性，即随着hCG作用时间的延长，胞内cAMP的含量逐渐升高，30分钟时基本达到饱和。上述结果提示，hCG与胃癌细胞受体结合后，可能通过激活腺苷酸环化酶/cAMP信号传递途径而发挥作用。

流式细胞仪检测52例鼻咽癌外周血T淋巴细胞亚群

用流式细胞仪检测５２例鼻咽癌（ＮＰＣ）患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群，与２５例正常人作对照；并将ＮＰＣ患者作分期比较。结果ＮＰＣ组较对照组ＣＤ３有下降趋势，但无统计学意义；ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值均下降，有高度显著性差别（Ｐ＜００１）；ＣＤ８升高，亦有显著性差别（Ｐ＜００５）。与早期ＮＰＣ相比，晚期ＮＰＣ患者ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值均下降，亦有显著性差别。

人类胃组织复合表达两种不同剪接的胆囊收缩素-B/胃泌素受体

为了探讨正常和异位剪接的胆囊收缩素 - B/胃泌素受体基因是否在人类胃上皮细胞中表达及其表达量与胃癌分化和转移的关系。检测了 30例胃癌和癌周正常胃组织上皮细胞、10例胃炎和 2例胃正常组织上皮细胞及胃癌细胞株 SGC- 790 1中这两种受体基因的表达水平。结果显示 ,正常、炎症和恶性胃上皮细胞同时表达正常和异位剪接的胆囊收缩素 - B/胃泌素受体 ,两种受体的表达量与胃癌的分化与转移无关。推测异位剪接的胆囊收缩素

腺苷诱导白血病细胞发生凋亡

腺苷诱导白血病细胞发生凋亡张群洲周克元凌光鑫我们曾对腺苷的药理作用机制作了系列研究，在此基础上我们用体外培养的方法进一步观察了它对ＨＬ－６０细胞凋亡的诱导作用，并在方法上进行了适当的探索。材料和方法１腺苷处理ＨＬ－６０细胞腺苷溶于ＲＰＭＩ１６４０中，...

绒毛膜促性腺激素对人胃腺癌细胞胞浆信号传递的影响

目的 胃癌可异位分泌绒毛膜促性腺激素 (hCG) ,且与胃癌的恶性程度及转移有关。探讨hCG对人胃腺癌细胞胞浆信号传递的影响。方法 分别用非同位素检测试剂盒、蛇毒磷酸二酯酶法、3 H cAMP放射免疫法 ,观察hCG对胃腺癌SGC 790 1细胞胞浆内蛋白激酶 (PKC)、钙调素 (CaM )活性及cAMP含量的影响情况。结果 hCG对胞浆PKC活性仅有轻微的刺激作用 ,即当hCG的浓度达10 -6mol/L时 ,细胞内PKC活性与对照相比仅增加了 2倍左右 ;hCG可明显使胞浆内cAMP含量及CaM活性增加 ,当hCG的浓度从 10 -11mol/L增加到 10 -6mol/L时 ,胞内cAMP的水平从 (2 .1± 0 .2 5 )pmol/mg蛋白增至 (9.5 2± 0 .6 4 ) pmol/mg蛋白 (P <0 .0 1) ,而CaM含量由 (11.2± 2 .7)μg/mg蛋白增加到 (2 9.3± 3.4 2 ) μg/mg蛋白 (P <0 .0 1) ,与对照组比较差异均有显著性 (P <0 .0 1)。 结论 hCG作用于胃腺癌细胞后可能主要通过激活腺苷酸环化酶 (AC) /cAMP信号传递途径而起作用 ,同时Ca2 + /CaM可能亦参与了其信号传递机制。

黄体生成素和绒毛膜促性腺激素受体的研究进展

黄体生成素和绒毛膜促性腺激素与靶细胞膜上的同一种受体结合。LH/CG受体是一种G蛋白偶联受体,主要与Gs偶联,也在不同程度上与Gq/11偶联。近年来对LH/CG受体结构与功能的关系、基因结构、基因表达及调控以及其信号转导机制等方面进行了广泛而深入的研究,取得了许多突破性进展。