白术根腐病病原菌分离鉴定、生物学特性及植物源农药筛选

【目的】明确河南信阳地区白术根腐病病原菌种属,研究其生物学特性并筛选可用于防控其病原菌的植物源农药。【方法】从种植区采集病株,室内分离病原菌并纯化,利用形态学和多基因联合分析对病原菌进行鉴定,并对病原菌的生物学特性进行研究,利用菌丝生长速率法评价3种植物源杀菌剂对其菌落的抑制作用。【结果】该病原菌菌丝白色,孢子呈卵圆形,两端稍尖,大型分生孢子3~5隔,大小为(7~10)μm×(3~4)μm,小型分生孢子2隔或无格,大小为(3~5)μm×(1~2)μm,多基因联合分析表明该病原菌与藤仓镰刀菌(Fusarium fujikuroi)同源性高,结合形态学特征与分子生物学分析,将信阳白术根腐病病原菌鉴定为藤仓镰刀菌(Fusarium fujikuroi),这是藤仓镰刀菌引起白术根腐病的首次报道。生物学特性研究显示,该病原菌最适培养条件为温度28℃、pH为7,最适生长碳源为蔗糖,最适生长氮源为硝酸钾。3种植物源杀菌剂中,0.3%丁子香酚可溶液剂的EC50为6.906 mg·L^(-1),高于其他供试药剂,对病原菌的毒力最强。【结论】河南信阳地区白术根腐病病原菌为藤仓镰刀菌,该研究结果为信阳地区白术根腐病科学防控提供了依据。

生物炭与微生物菌剂配施对连作半夏土壤养分及生长的影响

为明确生物炭与微生物菌剂(10亿CFU/g多黏类芽孢杆菌)配施对信阳地区连作半夏土壤养分、生长发育及产量品质的影响,为今后利用生物炭和微生物菌剂缓解半夏连作障碍提供理论支撑,以信阳息半夏为研究对象,在复合肥减半的前提下,设置生物炭单施(1500 kg/hm^(2))、生物炭(1500 kg/hm^(2))分别与微生物菌剂(7.5、15.0、30.0 kg/hm^(2))配施4个处理,分析生物炭与微生物菌剂配施对连作半夏生长及土壤养分含量的影响。在土壤养分方面,与CK相比,生物炭与微生物菌剂配施处理(1500 kg/hm^(2)+7.5 kg/hm^(2)、1500 kg/hm^(2)+15.0 kg/hm^(2)、1500 kg/hm^(2)+30.0 kg/hm^(2))的土壤全氮含量、全钾含量、碱解氮含量、速效磷含量、速效钾含量、有机质含量、pH值分别提高37.96%~70.07%、17.65%~22.88%、4.77%~10.08%、9.99%~19.18%、12.15%~25.91%、9.89%~21.60%、15.21%~22.82%,土壤电导率下降23.76%~27.66%,生物炭1500 kg/hm^(2)与微生物菌剂30.0 kg/hm^(2)配施效果最好。生长发育方面,与CK相比,单施生物炭处理下,半夏出苗率提高11.43%,株高、叶长、叶宽分别增长5.60%、21.97%、7.69%,SPAD值增加9.36%;生物炭与微生物菌剂配施各处理对出苗率、株高、叶长、叶宽、SPAD值的促进效果均显著高于生物炭单施处理,其中以生物炭1500 kg/hm^(2)+微生物菌剂30.0 kg/hm^(2)配施效果最好,与CK相比,出苗率、株高、叶长、叶宽、SPAD值的增长率分别为30.96%、25.20%、49.01%、21.37%、23.25%。产量方面,生物炭单施处理对半夏块茎数、鲜重、干重提升效果明显,分别比CK增加41.73%、64.58%、59.55%;生物炭与微生物菌剂配施各处理对块茎数、单粒重(百粒重)、鲜重、干重分别比CK增加43.31%~54.72%、48.34%~55.63%、123.87%~134.47%、110.25%~127.17%,且优于生物炭单施处理,处理间差异不显著。品质方面,生物炭与微生物菌剂配施处理下,半夏的总生物碱、有机酸、浸出物含量分别比CK提高6.67%~13.33%、1.70%~17.05%、5.18%~6.47%,生物炭1500 kg/hm^(2)+微生物菌剂30.0 kg/hm^(2)配施处理对品质的提升效果最好。在复合肥用量减半的前提下,生物炭与不同量微生物菌剂配施处理对土壤养分、半夏生长指标、产量品质均有积极的影响,效果优于生物炭单施。整体来看,生物炭1500 kg/hm^(2)+微生物菌剂(10亿CFU/g多黏类芽孢杆菌)30 kg/hm^(2)配施处理,对半夏土壤养分、生长发育和产量品质提升效果最佳,可推广应用于半夏种植过程中。

细叶十大功劳叶中总生物碱大孔树脂纯化及抗氧化研究

为确定细叶十大功劳(Mahonia fortunei)叶中总生物碱大孔树脂分离纯化的最佳工艺条件及抗氧化活性,该研究通过比较6种大孔吸附树脂对总生物碱的静态吸附和解吸附效果,优选出最佳树脂并考察其动态纯化总生物碱的工艺条件,并采用DPPH法对纯化前后的总生物碱抗氧化性能进行评价。结果表明:(1)AB-8型大孔吸附树脂纯化效果最好,其最佳工艺条件为上样浓度50 mg·mL^(-1)(生药浓度)、上样量26 BV、上样液流速2 BV·h^(-1);吸附完成后,以3 BV水洗后再以4 BV 50%乙醇洗脱,在此条件下得到的总生物碱含量由13.33%提高到56.64%。(2)各样品对DPPH自由基的清除能力为对照品Vc(IC_(50)=10.39μg·mL^(-1))>总生物碱纯化品(IC_(50)=39.08μg·mL^(-1))>总生物碱粗品(IC_(50)=55.28μg·mL^(-1))。综上表明,AB-8型大孔吸附树脂可有效富集细叶十大功劳叶中总生物碱有效部位,细叶十大功劳叶中总生物碱具有一定的抗氧化活性。

4种植物源农药对红花指管蚜的室内毒力测定及田间防效

【目的】通过测定4种植物源农药对红花指管蚜的室内毒力及田间防效,筛选出防治效果较好的药剂。【方法】以50%吡蚜酮WG为对照药剂,采用叶片浸渍法测定0.6%苦参碱AS、1.5%除虫菊素EW、6.0%鱼藤酮ME、半夏乙醇提取物4种植物源农药对红花指管蚜的室内毒力,并采用叶片喷雾法进行田间防效测定。【结果】药后3 d,0.6%苦参碱AS、1.5%除虫菊素EW、6.0%鱼藤酮ME和半夏乙醇提取物的LC50分别为0.016、6.653、9.173和30.931 mg/L,对照药剂50%吡蚜酮WG的LC50为24.786 mg/L,0.6%苦参碱AS、1.5%除虫菊素EW、6.0%鱼藤酮ME的毒力显著高于对照药剂(P<0.05)。0.6%苦参碱AS 400倍液在药后1、7 d的田间防效分别为76.81%和96.39%,速效性和持效性较好;1.5%除虫菊素EW 150倍液和6.0%鱼藤酮ME 500倍液在药后7 d的田间防效分别为88.84%和88.37%,与对照药剂50%吡蚜酮WG 750倍液的87.29%防效相当。【结论】在红花指管蚜发生高峰期可选用0.6%苦参碱AS进行防治,后期可选用1.5%除虫菊素EW或6.0%鱼藤酮ME,3种植物源药剂可推广应用于红花指管蚜的防治。

家蚕核型多角体病毒P10基因的克隆及核苷酸序列分析

杆状病毒P10基因与多角体蛋白基因一样,都是由强启动子控制的高效表达晚期基因,且非病毒复制所必需,故在构建杆状病毒载体表达系统方面受到研究工作者的重视。苜蓿尺蠖核多角体病毒(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV)和黄杉毒蛾核型多角体病毒(Orgyia pseudotsugate nuclear polyhedrosis virus,OpMNPV)

噻二唑硫醚双腙的合成及抗肿瘤活性

为研究杂环双腙类化合物的合成方法和抗肿瘤活性,用2-巯基-5-苯基-1,3,4-噻二唑与β-氯苯丙酮取代后与水合肼缩合得相应的单腙,然后再与芳香醛缩合得双腙目标物。7个新目标物的结构经元素分析和光谱数据确证,并用MTT实验法评价了它们的体外抗肿瘤活性。初步的药理结果表明,部分目标物对CHO、HL60、L12103种癌细胞株具有潜在的体外生长抑制活性。

紫外分光光度法测定细叶十大功劳叶中总生物碱含量

为了建立细叶十大功劳叶中总生物碱的提取及含量测定方法,试验以盐酸-甲醇(1∶100)为溶剂,采用回流提取法提取细叶十大功劳叶中总生物碱,并以盐酸小檗碱为对照品,紫外分光光度法测定其含量,选定波长为345 nm。结果表明:细叶十大功劳叶中总生物碱含量以盐酸小檗碱计为3.825%,线性回归方程为A=0.063 58C-0.004 48(r=1.000 0),平均回收率为100.7%,相对标准偏差(RSD)=0.45%(n=6)。说明该含量测定方法操作简便、结果准确,可用于细叶十大功劳叶中总生物碱含量的测定。

肟醚噻二唑硫醚化合物的合成及其抗肿瘤活性

将2-巯基-5-取代基-1,3,4-噻二唑经与β-氯苯丙酮取代、盐酸羟胺肟化和氯甲基噁二唑醚化,合成了6种3-(5-取代基-1,3,4-噻二唑-2-硫代基)-1-苯基丙酮-O-(5-苯基-1,3,4-噁二唑-2-甲基)肟醚化合物(4a～4f),用1H NMR、IR、MS和元素分析表征了其结构。用MTT法测试了6种目标化合物对人黑色素瘤细胞株B16、人白血病细胞株HL60和人肝癌细胞株SMMC-7721的体外细胞毒活性。测试结果表明,部分化合物对3种癌细胞具有潜在的体外生长抑制活性。

氯霉素乙酰基转移酶基因在家蚕核型多角体病毒P10基因启动子控制下的表达

昆虫核型多角体病毒(NPV)P10基因属于晚期基因,为强启动子所控制,又是病毒复制所非必需的基因。我们对前报的家蚕核型多角体病毒(BmNPV)P10基因,应用PCR技术进行ATG区定点突变,在ATG被突变的同时形成一个BglⅡ酶切位点,得到一个不含ATG的BmNPV P10基因启动子。将长为230bp的经突变后的BmNPV P10基因5’端(包括启动子所有特征)片段克隆进pMMTV·CAT质粒中,构建成一个CAT基因在BmNPV P10基因启动子控制下的pBmPl0·CAT瞬间表达质粒。该质粒通过转染进入经野生型BmNPV感染的BmN细胞中,CAT得以表达。证明BmNPV P10启动子是比较强的启动子,可以在BmN细胞表达外源基因,具备了作为表达载体启动子的特性。

利用家蚕蛹生物反应器生产的人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子口服给药的临床前安全性评价(英文)

开发了用家蚕蛹表达的人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的口服药物。试验评价了猕猴、大鼠和小鼠口服rhGM-CSF毒性情况,包括遗传毒性、单剂量和重复剂量的全身毒性以及生殖毒性。毒理学试验显示:静脉给药在NIH小鼠中最大耐受剂量为3 300μg/kg,LD50为2 020μg/kg,在SD大鼠中LD50为3 660μg/kg。在猕猴和大鼠的重复剂量毒性试验结果中显示:口服rhGM-CSF后,除了雌性SD大鼠的血糖含量外,其余各项指标包括白细胞、红细胞、血红蛋白含量、血小板数量以及血细胞凝集等都正常。雌性大鼠每天口服剂量为1 250μg/kg时,给药后血糖浓度显著增加(P<0.001),但在恢复期间可恢复到正常水平。微核实验、CHL染色体畸变试验和埃姆斯测验法都表明无论是在体内还是体外服用rhGM-CSF均未见遗传毒性,普通的生殖毒性试验和围产期及致畸敏感期的毒性试验均未见异常现象,表明口服rhGM-CSF无明显生殖毒性。临床前毒性试验表明口服超过临床剂量10倍的rhGM-CSF与严重的慢性中毒没有联系,其在药理学有效剂量的范围内是很安全的。

家蚕核型多角体病毒p26基因及部分hr5区的克隆和序列分析

家蚕核型多角体病毒ｐ２６基因及部分ｈｒ５区的克隆和序列分析张耀洲，吴祥甫，李载平，李德葆（浙江农业大学生物技术研究所，杭州３１００２９）关键词家蚕核型多角体病毒，核苷酸序列，ｐ２６基因，ｈｒ５家蚕核型多角体病毒（Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉｎｕｃｌｅａｒｐｏ...

白介素-3研究进展

白细胞介素-3是白细胞介素家族重要成员之一,在机体的造血调节和免疫调节中起非常重要的作用。它的主要功能是能够迅速促进多能干细胞和各系祖细胞(与其他细胞因子协同作用)如CFU-GM、CFU-G、CFU-M、CFU-Meg、CFU-Ba的定向分化和成熟。IL-3与其他细胞因子的联合应用可增加化疗后肿瘤病人的中性粒细胞和血小板。

内皮抑素研究进展

内皮抑素是一种能够强烈抑制血管形成的抑制因子 ,能够有效地抑制肿瘤细胞的生长和转移 ,因此成为肿瘤研究领域的研究热点。就内皮抑素的发现 ,性质和结构 ,生物学功能 ,抑制作用机理 ,内皮抑素基因治疗以及目前在临床上的应用进行了简要总结和概括。

一种新的杆状病毒转移载体的构建

从家蚕核型多角体病毒(BmNPV)和苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)中分别克隆出其P10基因。从BmNPV P10中亚克隆得到其5′端上游片段,经PCR定位突变使之ATG区突变成一个BglⅡ酶切位点。从AcMNPVP 10中亚克隆得到基因3′端下游片段,克隆入经突变的BmNPV P10基因启动子的下游,构建成一个新的转移表达载体pBmAcPV-1,由于BmNPV和AcMNPV P10基因及两端的同源性高达90％以上,该载体可以分别与野生型BmNPV和AcMN-PV DNA进行同源重组。

大负荷运动通过NO信号通路降低高血压的机制研究

目的探讨大负荷运动通过一氧化氮(NO)信号通路降低高血压的可能机制。方法利用大鼠高血压模型进行大负荷运动。采用酶化学方法检测大白鼠血液中一氧化氮合酶(NOS)活性及NO水平变化,反转录多聚酶链反应检测大白鼠大动脉组织中NO和NOS的mRNA水平,免疫印迹实验检测大白鼠大动脉组织中VEGF蛋白水平的变化及动脉血管组织Akt,PI3K水平。结果运动组血液中NOS活性及NO的蛋白表达水平显著高于静息组(P<0.05);运动组大动脉组织中NOS活性、NO的mRNA水平、激活型Akt、PI3K水平显著高于静息组(P<0.05),而总Akt、PI3K蛋白水平没有明显增高(P>0.05)。结论大负荷运动可增强组织中的Akt、PI3K活性,从而调节血液中NOS活性,调节血液中NO水平,并最终降低高血压。

十大功劳属植物化学成分和生物活性研究进展

本文从化学成分和生物活性两方面综述了十大功劳属(Mahonia Nutt.)植物近十几年来的研究进展,为十大功劳属(Mahonia Nutt.)植物的进一步开发利用提供一定的科学依据。

芜菁花叶病毒杭州株P1基因的克隆和在大肠杆菌中的表达

通过反转录ＰＣＲ，克隆得到１．２ｋｂ的ＴｕＭＶＨ１的Ｐ１片段，并在大肠杆菌表达载体ｐＧＥＭＥＸ－１中得以表达，表达产物为可融性融合蛋白，Ｍｒ≈６×１０４．

关于高低温处理蚕对家蚕浓核病毒(DNV)敏感机制的研究

五龄蚕经高、低温冲击一定时间后,蚕体中肠组织发生病变,中肠细胞发现坏死,肠壁折皱减少,单位细胞密度下降,并且,中肠的各种细胞类型比例发生变化,园筒型细胞明显减少。冲击后的蚕经室温条件8小时后,园筒型细胞数呈上升趋势。Bm-DNV 感染冲击后的蚕,恰是中肠为修复被损细胞而大量增殖新细胞的时期,因这些新生细胞对病毒最敏感,所以最终表现为大量发病。中肠组织的糖元含量与其所处的环境有关,糖元参与了蚕的中肠组织的修复和细胞再生等过程。

生物素—亲和素系统在家蚕病毒研究中的应用:Ⅱ.不同发育时期家蚕DNV蚕座感染与发病率关系的研究

一、前言家蚕浓核病毒(DNV)是近年来在国内外确定存在的一种新的家蚕病毒,并在生产上危害极大,是养蚕农户歉收的原因之一。因此,如何防治家蚕浓核病是一个很有吸引力的问题。到目前为止,在家蚕 DNV 早期诊断方面,业已建立了酶对流免疫电泳技术、免疫酶标组化法以及前报的 ABC 法等。为早期检测家蚕DNV 提供了有效的手段。

桃早熟芽变品种‘大观一号’的RAPD分析及其特异片段的克隆

利用140个单个和混合随机引物对桃布日早生及其早熟芽变品种'大观一号'基因组DNA的多态性进行RAPD分析。其中有一个引物能检测出两者之间DNA的多态性，在1．1kb处'大观一号'多了一条特异性条带，将该片段克隆到pUC19载体，并作了酶谱分析。