迟缓爱德华菌T3SS转位因子EseC促炎反应

目的Ⅲ型分泌系统(T3SS)是迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda,简称Et)一种重要的毒力因子,EseC是T3SS一个转位因子。通过缺失eseC基因,探索Et菌T3SS与该菌感染细胞和组织后,诱导宿主产生炎症反应的关系。方法构建Et.CD菌eseC基因缺失株及其互补株;用菌落计数法比较两菌株在RAW264.7巨噬细胞胞内存活数目;用CCK-8法比较两菌株感染巨噬细胞后的细胞存活率;利用流式比较野生株和缺失株诱发巨噬细胞的细胞坏死。分别将野生株和缺失株注射小鼠腹腔,用菌落计数法比较两菌株在肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中细菌CFU/mL,以及通过观察这些器官的大小和HE染色切片组织,比较两菌株对这些小鼠组织的炎症反应;用ELISA比较这些小鼠血清促炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的浓度;用RT-PCR,比较野生株和缺失株效应蛋白基因转录水平。结果 eseC基因缺失后,Et感染巨噬细胞后,胞内细菌数目和细胞存活率均明显降低,说明野生株感染细胞后,可通过其T3SS引起更多细胞的死亡,释放出更多细菌成份;野生株可通过其T3SS诱导更多巨噬细胞发生坏死,伴有大量促炎症因子的释放;T3SS有助于野生株在肝、肺、脾和肾中组织中的大量增殖;野生株感染小鼠后,和eseC基因缺失株相比,它们的肝脏,脾脏和肺脏外观明显肿大,肝、肺、脾和肾组织中有明显的急性炎症反应,野生株诱发产生的促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β浓度明显高于缺失株;RT-PCR结果显示,eseC基因的缺失使得Et菌的T3SS效应蛋白的eseJ和eseE基因转录水平明显下降。结论 eseC基因可以通过T3SS影响Et在组织和细胞的致炎作用。

Fournier坏疽进展及治疗转归——基于15例患者病例分析

目的分析Fournier坏疽的起病特点以及病程进展,总结其临床症状及实验室和影像学表现,探究其诊断及治疗方案的选择。方法回顾性分析本研究中心15例确诊为Fournier坏疽的病例,总结并对比其发病情况、疾病进展过程、治疗方案、临床症状、实验室影像学检查结果和转归预后。结果13例患者治愈出院,治愈率86.67%,1例患者死亡,1例患者拒绝继续治疗自动出院。3例患者行阴茎植皮术,8例行阴囊成形术。1例患者行阴囊切开引流术及右侧腰背部切开引流术,后行Ⅱ期手术并逐渐拔除部分引流。2例患者行阴囊扩大清创术及肛周脓肿切开引流术,后予以每日双氧水冲洗换药并逐步拔除引流。接受阴茎或阴囊植皮的患者中有8例植皮术后手术切口Ⅰ期愈合,余3例患者植皮手术区域出现感染、坏死及渗液,经每日换药及冲洗消毒后达到Ⅱ、Ⅲ期愈合。结论Fournier坏疽起病急,进展快,早诊断、早治疗是关键,早期应予以彻底清创引流,外科手术结合封闭式负压吸引、高压氧等综合治疗方案可提高患者治愈率。