目的探讨血清外泌体源性circ_0009362对人骨髓间充干细胞(human bone marrow mesenchymalstem cells,hBMSCs)成骨分化的影响及潜在作用机制。方法收集骨质疏松症(osteoporosis,OP)患者的血清并分离外泌体,使用qRT-PCR检测外泌体中circ_0...目的探讨血清外泌体源性circ_0009362对人骨髓间充干细胞(human bone marrow mesenchymalstem cells,hBMSCs)成骨分化的影响及潜在作用机制。方法收集骨质疏松症(osteoporosis,OP)患者的血清并分离外泌体,使用qRT-PCR检测外泌体中circ_0009362的表达水平。诱导hBMSCs成骨并检测细胞中circ_0009362、miR-29b-3p的表达。双荧光素酶报告实验检测circ_0009362、miR-29b-3p的相互调控关系。碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP活性,茜素红(ARS)染色法检测钙沉积。结果与健康对照组相比,OP患者的血清外泌体中circ_0009362表达升高,诱导hBMSCs成骨后circ_0009362的表达降低(均P<0.05)。外泌体能降低hBMSCs中ALP活性与钙沉积百分比,该作用通过分泌circ_0009362实现。敲减外泌体中circ_0009362表达能部分抵消外泌体的作用(均P<0.05)。诱导hBMSCs成骨后miR-29b-3p的表达提高(P<0.05)。circ_0009362与miR-29b-3p存在靶向关系,外泌体通过分泌circ_0009362抑制miR-29b-3p的表达。过表达miR-29b-3p促进hBMSCs中ALP活性与钙沉积百分比,该作用被外泌体部分抵消(均P<0.05)。结论OP患者的血清外泌体通过分泌circ_0009362下调miR-29b-3p的表达来抑制hBMSCs成骨分化。展开更多
文摘目的探讨血清外泌体源性circ_0009362对人骨髓间充干细胞(human bone marrow mesenchymalstem cells,hBMSCs)成骨分化的影响及潜在作用机制。方法收集骨质疏松症(osteoporosis,OP)患者的血清并分离外泌体,使用qRT-PCR检测外泌体中circ_0009362的表达水平。诱导hBMSCs成骨并检测细胞中circ_0009362、miR-29b-3p的表达。双荧光素酶报告实验检测circ_0009362、miR-29b-3p的相互调控关系。碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP活性,茜素红(ARS)染色法检测钙沉积。结果与健康对照组相比,OP患者的血清外泌体中circ_0009362表达升高,诱导hBMSCs成骨后circ_0009362的表达降低(均P<0.05)。外泌体能降低hBMSCs中ALP活性与钙沉积百分比,该作用通过分泌circ_0009362实现。敲减外泌体中circ_0009362表达能部分抵消外泌体的作用(均P<0.05)。诱导hBMSCs成骨后miR-29b-3p的表达提高(P<0.05)。circ_0009362与miR-29b-3p存在靶向关系,外泌体通过分泌circ_0009362抑制miR-29b-3p的表达。过表达miR-29b-3p促进hBMSCs中ALP活性与钙沉积百分比,该作用被外泌体部分抵消(均P<0.05)。结论OP患者的血清外泌体通过分泌circ_0009362下调miR-29b-3p的表达来抑制hBMSCs成骨分化。
