miR-370-3p/SESN2调控脂多糖诱导的小鼠肺泡上皮细胞凋亡的机制研究

目的:探讨miR-370-3p/Sestrin2(SESN2)调控脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cells,AECs)凋亡的机制。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为LPS+anti-NC组和LPS+miR-370-3p抑制剂(anti-miR-370-3p)组,每组12只。通过气管内注射LPS(5 mg/kg)来诱导急性肺损伤(acute lung injury,ALI)。分别通过小鼠尾静脉注射antimiR-370-3p或anti-NC。MLE12细胞随机分为对照组(Con+anti-NC)、Con+anti-miR-370-3p组、LPS+anti-NC组、LPS+antimiR-370-3p组、LPS+si-SESN2+anti-miR-370-3p组。使用定量实时PCR分析肺组织或细胞中miR-370-3p。通过测量线粒体形态学和线粒体膜电位考察miR-370-3p敲低对LPS诱导的线粒体功能障碍的保护作用。双荧光素酶报告分析证实了miR-370-3p和SESN2之间的靶向关系。结果:与LPS+anti-NC组相比,LPS+anti-miR-370-3p组肺组织中miR-370-3p表达、丝氨酸苏氨酸激酶3(receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 3,RIPK3)、混合系列蛋白激酶样结构域(mixed lineage kinase domain-Like,MLKL)蛋白水平、肺部炎症评分明显降低(P<0.05),和肺组织中肺表面活性蛋白C(surfactant protein C,SPC)蛋白水平明显增加(P<0.001)。与LPS+anti-NC组相比,LPS+anti-miR-370-3p组MLE12细胞中RIPK3、MLKL蛋白表达、PI阳性细胞百分比明显降低(P<0.05),并且线粒体片段化和线粒体膜电位明显增加(P<0.05)。miR-370-3p对SESN2-WT报道基因的荧光素酶活性具有抑制作用。与LPS+anti-miR-370-3p组相比,LPS+si-SESN2+anti-miR-370-3p组线粒体片段化和线粒体膜电位均明显降低(P<0.05)。结论:miR-370-3p/SESN2轴通过介导线粒体断裂和损害线粒体功能促进LPS诱导的ALI期间AECs坏死性凋亡。

羟基壬烯醛通过抑制内皮细胞焦亡减轻新生儿脓毒症诱导的急性肺损伤

目的探讨4-羟基壬烯醛(HNE)通过抑制内皮细胞(ECs)焦亡在减轻新生儿脓毒症诱导的急性肺损伤(ALI)中的作用。方法新生小鼠随机分为5组:(1)假手术组(Sham组);(2)假手术小鼠接受HNE治疗组(Sham+HNE组);(3)盲肠浆液(cecal slurry,CS)处理组(CS组);(4)CS处理的GSDMD^(-/-)小鼠组(CS+GSDMD^(-/-)组);(5)CS小鼠接受HNE治疗组(CS+HNE组)。通过肺组织病理学和肺湿/干重量比评估肺损伤程度。分离小鼠ECs,并分为Ctrl组、LPS+ATP组、LPS+ATP+HNE-L组和LPS+ATP+HNE-H组。蛋白质印迹法评估HNE和Caspase-1途径表达。结果与CS组相比,CS+HNE组和CS+GSDMD^(-/-)组小鼠的肺组织评分显著降低(P<0.05),并且肺组织的湿和干重量比显著降低(P<0.05)。小鼠72 h存活率观察结果显示,与CS组相比,CS+HNE组和CS+GSDMD^(-/-)组小鼠的存活率显著提高(P<0.05)。CS+HNE组和CS+GSDMD^(-/-)组小鼠的肺ECs中GSDMD-N、C-caspase-1、NLRP3、IL-18、IL-1β表达显著低于CS组(P<0.05)。与Ctrl组细胞相比,LPS+ATP显著降低细胞活力(P<0.05),和增加了GSDMD、C-caspase-1、NLRP3、IL-18、IL-1β的蛋白表达(P<0.05),而这些作用也被HNE抑制。结论HNE可以通过抑制NLRP3/Caspase-1信号传导来抑制肺ECs细胞焦亡,并改善脓毒症小鼠的ALI。

新生大鼠缺氧缺血性脑病中miRNA表达谱的改变及分析

目的 通过基因芯片检测新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)模型中差异性表达miRNA,构建HIE中miRNA及其靶基因调控网络。方法 将7 d龄新生SD大鼠12只随机分为HIE组及假手术对照组,每组6只。采用Rice法建立新生大鼠HIE模型,造模24 h取新生大鼠海马组织,基因芯片检测HIE组和假手术对照组海马组织中差异性表达的miRNA,采用生物信息软件分析相关miRNA调控的靶基因及信号通路。结果 筛选出差异性表达的miRNA共22个,其中表达上调9个(mmu-miR-215-5p, mmu-miR-1249-3p, mmu-miR-3072-5p, mmu-miR-324-3p, mmu-miR-690,mmu-miR-874-5p, 11_10767,11_10888,13_12928_star)、表达下调共13个(mmu-miR-141-3p, mmu-miR-182-5p, mmu-miR-183-5p, mmu-miR-190a-3p, mmu-miR-200a-3p, mmu-miR-200b-3p, mmu-miR-200c-3p, mmu-miR-429-3p, mmu-miR-455-3p, mmu-miR-760-5p, mmu-miR-96-5p, 6_5971_star, 9_8784)。GO功能分析显示,差异性表达的miRNA调控基因在生物过程中主要参与调节生物生长发育、神经元形成与分化过程,KEGG通路分析显示主要有丝裂原活化蛋白激酶信号通路被激活。结论 差异性表达的miRNA可能参与调控HIE发病的机制,将为HIE的机制研究、临床诊断及药物设计提供理论依据和新的思路。

婴幼儿神经发育评估方式的研究进展

近年来早产儿存活率逐渐升高,但神经发育可能伴随不良风险。早产儿因过早离开子宫内生长环境,其神经发育结局不但受到母亲围产期因素的影响,而且出生后也受到医疗、家庭、社会环境、经济等错综复杂因素的干扰,这些因素将直接影响患儿在婴幼儿时期的神经发育结局。因此,对早产儿神经发育进行早期评估并干预显得尤为重要。神经功能学评估方法具有易操作、经济等优点,已在临床或随访过程中扮演不可或缺的重要角色。该文将对目前用于婴幼儿神经功能学的一些评估方法进行综述。

羊水中离子浓度与新生儿呼吸窘迫综合征相关性的临床研究

目的探讨羊水中离子浓度与新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome,NRDS)的相关性,为临床评估胎肺成熟、预测NRDS提供具有针对性、准确性及潜在价值的检测指标。方法选择2022年1月至2022年12月在湖南省妇幼保健院出生并收治到新生儿一科的新生儿进行队列研究,分为NRDS组与非NRDS组,收集两组临床资料,采用血气分析仪测定羊水中K^(+)、Na^(+)、Cl^(-)及Ca^(2+)浓度,分析其与NRDS的相关性。结果共纳入113例新生儿,NRDS组36例,非NRDS组77例。NRDS组胎龄、出生体重低于非NRDS组,产前激素使用、存在母孕期合并症比例高于非NRDS组,羊水Na^(+)浓度(128.7±3.9)mmol/L高于非NRDS组(121.1±6.8)mmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组羊水K^(+)、Ca^(2+)、Cl^(-)浓度比较差异无统计学意义(P>0.05)。胎龄、出生体重与羊水Na^(+)浓度是NRDS的独立危险因素,胎龄、出生体重与NRDS成负相关(β=-0.967、-2.299,P<0.05);羊水Na^(+)浓度与NRDS发生成显著正相关(β=0.634,P<0.05);羊水K^(+)、Cl^(-)及Ca^(2+)浓度与NRDS无相关性(P均>0.05)。采用受试者工作特征曲线预测NRDS的独立危险因素,发现羊水中Na^(+)浓度为124.0 mmol/L时,曲线下面积为0.923,预测NRDS的敏感度为90.0%、特异度为80.0%。结论羊水中Na^(+)浓度与NRDS发生成显著正相关,羊水中K^(+)、Ca^(2+)、Cl^(-)浓度与NRDS无相关性;羊水中Na^(+)浓度变化在预测NRDS方面具有非常高的诊断价值,当Na^(+)浓度超过124.0 mmol/L,发生NRDS可能性大,可作为胎肺成熟的新型预警标志物。

晚期早产儿早期智能发育结局的研究

目的探讨晚期早产儿(LPI)早期智能发育结局。方法选择2012年1月至2015年1月新生儿病房收治的出生胎龄34~36+6周、治愈出院并定期规律随访的106例早产儿为晚期早产儿组;随机抽取同期120例健康足月儿(FPI)为对照组。对校正年龄40周的晚期早产儿及40周龄的足月儿进行新生儿神经行为测定(NBNA),晚期早产儿校正龄3、6、12月龄或者足月儿3、6、12月龄时采用Gesell发育量表进行评估。结果 LPI组NBNA评分低于37分,低于FTI组(P<0.05)。校正龄3月龄时,LPI组大运动、精细运动、个人社交落后于FTI组(P<0.05);校正龄6月龄时,LPI组适应性、大运动、精细运动落后于FTI组(P<0.05);校正年龄12月龄时,LPI组适应性、大运动、个人社交测评明显低于FTI组(P<0.05)。结论晚期早产儿早期智能发育迟缓,需加强神经发育监测。

极低出生体重早产儿血清25(OH)D3及血浆sNGAL的表达与支气管肺发育不良的关系研究

目的研究极低出生体重早产儿血清25-羟维生素D3[25(OH)D3]及血浆中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(sNGAL)的表达,并分析2项指标与患儿支气管肺发育不良的关系。方法选取某院新生儿科2019年11月1日-2020年11月30日的40例出生体重<1500g极低出生体重早产儿纳入研究组;选取新生儿科同期的40例出生体重为1500~2500g低出生体重早产儿纳入对照组;同时选取医院产科同期出生的40例出生体重为2500~4000g正常新生儿纳入正常组。采集3组新生儿出生后第1天的静脉血作为样本,分别运用化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附法对其进行血清25(OH)D3及血浆sNGAL检测,对比3组的检测结果。另外对研究组早产儿进行支气管肺发育不良评估,统计支气管肺发育不良发生率,并将其纳入A组,将非支气管肺发育不良早产儿纳入B组,对比2组的血清25(OH)D3及血浆sNGAL检测结果,运用多因素Logistic回归分析法分析血清25(OH)D3及血浆sNGAL与支气管肺发育不良的关系。结果研究组新生儿的血清25(OH)D3检测值低于对照组与正常组,血浆sNGAL检测值高于对照组与正常组,均P<0.05;对照组的新生儿的血清25(OH)D3检测值低于正常组,血浆sNGAL检测值高于正常组,均P<0.05。研究组40例早产儿中,发生支气管肺发育不良13例,发生率为32.50%;A组与B组的血清25(OH)D3及血浆sNGAL检测结果显示A组早产儿的血清25(OH)D3检测值低于B组,血浆sNGAL检测值高于B组,均P<0.05。多因素Logistic回归分析结果显示血清25(OH)D3(≤10ng/mL)、血浆sNGAL(≥100μg/L)是发生支气管肺发育不良的独立危险因素。结论极低出生体重早产儿血清25(OH)D3呈低表达状态,血浆sNGAL呈高表达状态;极低出生体重早产儿血清25(OH)D3及血浆sNGAL与支气管肺发育不良之间存在明显的相关性,血清25(OH)D3≤10ng/mL、血浆sNGAL≥100μg/L是发生支气管肺发育不良的独立危险因素。

枸橼酸咖啡因与氨茶碱治疗早产儿原发性呼吸暂停的疗效及其智能发育比较

目的比较枸橼酸咖啡因与氨茶碱治疗早产儿原发性呼吸暂停的临床疗效及其对智能发育的影响。方法选择2013年12月至2014年12月在我院珠江新城院区新生儿病房收治的原发性呼吸暂停早产儿,采用枸橼酸咖啡因注射液治疗,治愈出院,并在高危儿门诊随访者为咖啡因组;随机数字法抽取2011年12月至2013年12月同在我院珠江新城院区新生儿病房收治的原发性呼吸暂停早产儿,采用氨茶碱注射液治疗治愈出院,并在高危儿门诊规律随访者为氨茶碱组。比较两组治疗效果及患儿校正月龄6、12月时的智能发育情况。结果两组各纳入150例患儿。咖啡因组吸氧时间[(119.1±100.2)h比(156.5±134.1)h]、无创机械通气时间[(107.4±100.2)h比(156.7±139.8)h]、有创机械通气时间[(146.4±122.6)h比(270.9±257.2)h]短于氨茶碱组,差异均有统计学意义(P<0.05)。咖啡因组与氨茶碱组比较,动脉导管未闭(24.0%比45.3%)、支气管肺发育不良(9.3%比21.3%)发生率低于氨茶碱组,差异有统计学意义(P<0.05)。校正月龄6月时咖啡因组大运动、精细运动、个人社交发育商均高于氨茶碱组,校正月龄12月时咖啡因组大运动、精细运动、语言、适应性发育商均高于氨茶碱组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论枸橼酸咖啡因治疗早产儿原发性呼吸暂停的疗效优于氨茶碱,并有利于促进早产儿的智能发育。

30～34周小于胎龄儿校正18～24月龄神经发育状况的前瞻性队列研究

目的研究30～34周小于胎龄儿(SGA)与同胎龄适于胎龄儿(AGA)校正18～24月时神经发育的差异,为临床上完善早产儿的诊疗和早期干预提供理论依据。方法前瞻性队列研究设计,广州市妇女儿童医疗中心于2015年1月-2017年12月对高危儿门诊随访的出生胎龄30～34周高危儿病例,按胎龄与出生体重分为SGA组与AGA组,比较两组早产儿一般出生情况、围产因素、早期合并症以及校正6～12月、18～24月龄时体格增长和神经发育情况,同时分析SGA早产儿早期并发症对神经发育的影响。结果纳入研究的随访早产儿共122例,SGA组58例,AGA组64例,两组早产儿围产及早期合并症基本情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。校正6～12月龄时SGA组适应性、大运动、精细运动和语言发育商比较,均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组个人社交发育商比较,差异无统计学意义(P>0.05)。校正18～24月龄时SGA组大运动和精细运动发育商低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组适应性、语言和个人社交发育商比较,差异无统计学意义(P>0.05)。早期合并支气管肺发育不良的SGA早产儿发生神经发育迟缓(发育商≤75)比例高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SGA早产儿校正18～24月龄时大运动及精细运动发育商落后于同胎龄AGA早产儿,早期合并支气管肺发育不良(BPD)可能为神经发育迟缓的潜在危险因素。

维生素D不同给药时间对极低出生体质量预防早产儿支气管肺发育不良的效果

目的分析极低出生体质量早产儿中维生素D不同给药时间对支气管肺发育的疗效,探讨维生素D的最佳给药时间,以提高疗效,改善患儿预后。方法选择湖南省妇幼保健院新生儿科2018年11月—2020年6月的68例极低出生体质量早产儿为研究对象,所有早产儿均予以维生素D防治支气管肺发育不良,根据维生素D不同给药时间将其分为A组与B组,各34例,A组于出生后3天给予800单位维生素D,B组于出生后1周给予800单位维生素D,比较两组早产儿的支气管肺发育不良发生率、呼吸机使用时间与吸氧时间、血清25羟维生素D3[25(OH)D3]与血浆sNGAL水平、免疫功能指标[免疫球蛋白(IgA)、IgG、Ig M]、炎性因子水平[白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子–α(TNF-α)]。结果 A组早产儿的支气管肺发育不良发生率低于B组(P<0.05);A组早产儿的呼吸机使用时间与吸氧时间均短于B组(P<0.05);A组早产儿治疗后的血清25(OH)D3水平高于B组,血浆s NGAL水平低于B组(P<0.05);A组早产儿治疗后的免疫功能指标优于B组(P<0.05);A组早产儿治疗后的炎性因子水平优于B组(P<0.05)。结论极低出生体质量早产儿出生后3天应用维生素D防治支气管肺发育不良的临床效果优于出生后1周给药,能明显降低支气管肺发育不良的发生率,且能缩短呼吸机使用时间与吸氧时间,改善血清25(OH)D3与血浆s NGAL水平,且能在一定程度上提高早产儿的免疫功能,减轻炎性反应。

新生儿歪嘴哭面容、面神经麻痹各一例

病例1，男，为第1胎第1产，胎龄39周，产钳助产娩出，出生体质量2890g。无胎膜早破，羊水清，无脐带绕颈，出生有窒息，生后1、5、10minApgar评分分别为6、8、9分。