实时荧光定量RT—PCR快速检测H7N9禽流感病毒

目的构建一种灵敏、特异、快速的实时荧光定量RT—PCR反应体系用于临床H7N9禽流感疑似病例早期诊断及外环境H7N9病毒的监测。方法以H7N9禽流感病毒H7基因和N9基因为靶基因设计引物以及TaqMan探针，并对引物、探针及反应条件进行优化，验证该反应体系检测的特异性、灵敏度、重复性和检测速度，然后与两种商品化试剂盒（试剂盒I和试剂盒Ⅱ）进行各项指标及184份现场样本作平行比对。结果新建立的H7N9禽流感病毒实时荧光定量RT-PCR反应体系呈典型的扩增曲线、扩增时间约50min，H7基因与N9基因的最低检出限分别为28拷贝／μL与41拷贝／μL。重复性测定显示，H7和N9检测Ct值的变异系数（CV）分别为0．17％～0．89％和0．33％～0．59％，扩增效率分别为0．9491和0．9713；与其他常见禽流感病毒或肠道病毒无明显交叉反应。184份现场可疑样本阳性检出率为5．43％（10／184），与试剂盒Ⅱ结果一致。结论本研究建立的实时荧光定量RT—PCR反应体系具有检测速度快、灵敏度高、特异性强、重复性好、结果可靠等特点，可用于临床疑似病例的应急检测、早期诊断及养鸡场、活禽交易市场等外环境H7N9禽流感病毒监测。

舟山市3例发热伴血小板减少综合征的病原学与遗传特征

目的 对舟山市3例疑似发热伴血小板减少综合征（SFTS）病例进行病原学鉴定、确诊，并分析其遗传特征。方法选用巢式RT-PCR测定新布尼亚病毒核酸及L、M、S3个特异性基因，并对基因扩增产物进行测序，测序结果与GenBank上公布的序列进行比对确认。用DNAStar软件构建进化树与序列距离表。用间接免疫荧光法测定患者恢复期和急性期血清新布尼亚病毒IgG抗体滴度。结果3例SFTS患者急性期血清中均能检测到新布尼亚病毒的3个特异性基因片段，其中S基因核苷酸序列与舟山市同类基因核苷酸序列的同源性在9414％～100．0％，患者恢复期血清病毒抗体滴度较急性期增高4倍以上。结论经过病原学鉴定，3例临床疑似患者确诊为发热伴血小板减少综合征的新近感染病例。舟山市新布尼亚病毒的遗传特征比较稳定。

浙江省普陀区游泳池水质检测结果分析

目的:分析了解浙江省舟山市普陀区游泳池水质卫生状况,为游泳场所的管理提供科学依据,保障游泳人群健康。方法:对游泳池水的卫生指标细菌总数、大肠菌群、浑浊度、尿素、pH、游离性余氯进行检验,并对水质检测结果进行评价分析。结果:共检测329份,总体合格率为54.4%,不合格项目主要是游离性余氯、尿素、细菌总数。结论:虽然每年的合格率呈逐年上升的趋势,但游泳池水质的卫生状况仍然堪忧,有关部门仍需加大对游泳场所的监督管理力度。

舟山市鼠伤寒沙门菌毒力岛标志性毒力基因的检测

沙门菌是世界上食源性腹泻最常见的到致病病原菌之一。全球每年约报告13亿因沙门菌感染导致的急性胃肠炎病例．其中约有300万例患者死亡。我国沙门菌食物中毒多年来也居细菌性食物中毒的首位，根据2005-2009年浙江省食品污染物监测及食源性病原菌监测网数据显示，鼠伤寒沙门菌是食物中毒、腹泻门诊及食品污染物监测中的重要病原菌。

舟山海岛鼠伤寒沙门菌肠毒素基因序列特征分析

目的通过对6株鼠伤寒沙门菌肠毒素基因的进化特征分析,为舟山鼠伤寒沙门菌引起的食源性疾病防控提供理论依据。方法收集定海、普陀两区的鼠伤寒沙门菌6株,用PCR方法检测肠毒素基因并对阳性产物进行测序,通过DNA star软件对序列进行比对,构建基因进化树及序列。结果 6株鼠伤寒沙门菌肠毒素基因检测结果均为阳性,基因序列比对结果显示6株鼠伤寒沙门菌肠毒素基因的同源性为100.0%,与印度鼠伤寒沙门菌A201菌株（KF032246）和美国鼠伤寒沙门菌Q1菌株（L16014）的肠毒素基因序列的同源性为99.2%和100.0%;与柠檬酸杆菌肠毒素的同源性为85.3%-88.4%;与其他致病菌同类基因的同源性分别为26.6%-45.0%。结论近年来在舟山市流行的鼠伤寒沙门菌的肠毒素基因序列进化高度保守,与志贺菌、大肠埃希菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌及金黄色葡萄球菌的同类基因同源性较低,但与柠檬酸杆菌的肠毒素基因有较高的同源性应引起相关部门重视。