葛根芩连汤及不同配伍组中生物碱类成分的肠外翻吸收研究

目的应用肠外翻模型研究葛根芩连汤(葛根、黄芩、黄连和炙甘草)及其不同配伍组中4个生物碱类成分在大鼠不同肠段的吸收特征。方法采用肠外翻模型,考察葛根芩连汤中黄连碱、药根碱、小檗碱、巴马汀4个生物碱类成分的肠吸收机制;同时考察不同肠段、药物浓度等因素对它们吸收的影响并比较各组分在全方和不同配伍组给药时的吸收变化情况。结果各组分在不同肠段的吸收均为线性吸收,符合零级吸收速率。药根碱在各肠段的吸收方式除被动扩散外还存在主动转运。小檗碱、巴马汀的吸收速率常数(Ka)均随剂量的增加而增加,显示它们为被动扩散。黄连碱在空肠中的吸收表现为主动转运;而在十二指肠、回肠、结肠中表现为被动扩散。肠道不同部位的吸收实验表明,全方中小檗碱、巴马汀的最佳吸收部位为空肠;黄连碱、药根碱的最佳吸收部位为结肠。结论比较不同配伍组的Ka,4个生物碱成分在全方中吸收最好,其他三个配伍组的吸收没有显著性差异。

葛根芩连汤配伍对黄连生物碱肠吸收特性的影响

目的采用大鼠肠外翻模型研究葛根芩连汤不同配伍对黄连中生物碱的肠吸收特性。方法以大鼠肠道P-糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米为判断依据,比较葛根芩连汤中黄芩和葛根对黄连生物碱吸收参数Ka。结果在维拉帕米的作用下,各生物碱在各肠段的吸收均有显著性增加(P<0.05);葛根在十二指肠、空肠段可以使各生物碱成分的吸收增加(P<0.05);黄芩在回肠和结肠段能使黄连碱、小檗碱和巴马汀成分的吸收增加(P<0.05);而配伍甘草后基本无显著性增加。结论研究表明,葛根、黄芩可能通过对P-gp抑制,可以显著增加黄连生物碱类成分的吸收。

不同产地海螵蛸中核苷类成分测定

目的比较研究不同产地海螵蛸的指纹图谱,并测定其中核苷类成分的含有量。方法海螵蛸Na Cl水溶液采用高效液相色谱法,色谱柱为资生堂PAK-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为0.01 mol/L磷酸二氢钾水溶液,等度洗脱,检测波长254 nm,柱温25℃。用相似度评价系统软件计算得到各批药材的相似度。结果海螵蛸中的尿嘧啶、次黄嘌呤和黄嘌呤分离度良好,线性范围分别为1.25~12.50μg/m L、1.28~12.80μg/m L和5.05~50.50μg/m L。25批样品（来自浙江、辽宁、云南、山东、广西、福建）相似度均大于0.9;广东的样品相似度在0.97~0.78,差异较大;海南的样品相似度均为0.88左右。结论本研究建立的HPLC指纹图谱方法可有效地区分海螵蛸及其他贝壳类海洋药材。

葛根芩连汤有效成分对黄芩苷在Caco-2细胞模型中吸收转运的影响

目的采用LC-MS/MS法研究葛根芩连汤(葛根、黄芩、黄连、甘草)有效成分对黄芩苷在Caco-2细胞模型中吸收转运的影响。方法建立Caco-2细胞模型,采用细胞摄取实验和细胞转运实验评价多药耐药相关蛋白(MRP2)的功能。结果摄取实验中,黄芩苷的摄取量在60 min基本达到饱和[(0.68±0.07)ng/μg],加入MRP2抑制剂MK-571之后,黄芩苷的摄取量显著升高[(1.10±0.02)ng/μg,P<0.01],而P-gp转运蛋白抑制剂维拉帕米无此效果。配伍葛根素能提高黄芩苷的摄取量(P<0.05),而小檗碱、甘草苷的作用有统计学意义。细胞转运实验的结果表明,加入MRP2转运蛋白抑制剂后能增加黄芩苷从肠腔侧(AP)到基底侧(BL)侧的转运。配伍葛根素、甘草苷后能促进黄芩苷从AP到BL侧的转运,小檗碱无明显影响。结论 MRP2转运蛋白调控Caco-2细胞摄取吸收黄芩苷,推测其可能为MRP2转运蛋白的底物。葛根素可使在Caco-2细胞中黄芩苷被外排的量减少,从而增加黄芩苷的吸收量。

葛根芩连汤对吡格列酮在大鼠体内药动学行为的影响

目的考察葛根芩连汤对吡格列酮在大鼠体内药动学行为的影响。方法实验大鼠随机分成吡格列酮组和葛根芩连汤+吡格列酮组,每组6只,分别给予单次灌胃给药(生理盐水或14 g/kg葛根芩连汤,30 min后3 mg/kg吡格列酮)和多次灌胃给药(生理盐水或14 g/kg葛根芩连汤,每天1次,连续7 d,第8天生理盐水或14 g/kg葛根芩连汤,30 min后3 mg/kg吡格列酮)。LC-MS/MS法测定吡格列酮血药浓度,计算药动学参数。结果多次给药后,葛根芩连汤+吡格列酮组AUC、MRT_(0～)_t、C_(max)、T_(max)显著高于吡格列酮组(P<0.05,P<0.01),CL_z/F显著降低(P<0.01);较单次给药MRT_(0～)_t、t_(1/2)明显增加,CL_z/F明显降低,AUC_(0～)_t、C_(max)分别升高了1.81、2.13倍。结论葛根芩连汤多次给药较单次给药可提高吡格列酮在大鼠中的总体暴露水平。

手机智能充电储存柜

为了解决目前公共场所安全储存手机,提高充电储存效率的问题。我们基于公共场所的储存柜与充电系统相结合,制作出可以充电的智能储存柜。实现了无人监看下手机充电的安全性,带来了便利。

LC-MS/MS同时测定一清胶囊9个成分的含量

目的:建立运用液相色谱-串联质谱法同时测定一清胶囊中9个成分(黄芩苷、汉黄芩苷、黄连碱、药根碱、巴马汀、小檗碱、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚)含量的分析方法。方法:采用Agilent SB-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),以水-甲醇为流动相,梯度洗脱(0～4.5 min,20%B→70%B;4.5～8 min,70%B→95%B;8～8.5 min,95%B→20%B),流速0.3 mL.min-1,柱温为室温;采用电喷雾离子源(ESI),动态多反应监测扫描模式(DynamicMRM)进行定量分析,干燥气温度350℃,干燥气流量10 L.min-1,雾化器压力275.8 kPa,毛细管电压4 kV。结果:黄芩苷、汉黄芩苷、黄连碱、药根碱、巴马汀、小檗碱、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的质量浓度分别在2.712～27.12μg·mL-1(r=0.9989)、0.8800～8.800μg·mL-1(r=0.9991)、0.5280～5.280μg·mL-1(r=0.9982)、0.1272～1.272μg·mL-1(r=0.9977)、0.3024～3.024μg·mL-1(r=0.9979)、1.196～11.96μg·mL-1(r=0.9995)、33.28～332.8 ng.mL-1(r=0.9988)、32.40～324.0 ng.mL-1(r=0.9974)、8.800～88.00 ng.mL-1(r=0.9977);平均加样回收率(n=6)均在97.5%～101.9%范围内,RSD均小于2.4%。结论:该分析方法特异、快速、灵敏,重复性好,可为一清胶囊的质量控制提供依据。

高效液相色谱-质谱联用快速测定参甘冠心合剂中毛蕊花糖苷、党参炔苷等11种有效成分

目的建立运用液相色谱-串联质谱法同时测定参甘冠心合剂中11种成分（芍药苷、毛蕊花糖苷、阿魏酸、柚皮苷、丹酚酸B、党参炔苷、橙皮苷、甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素）含量的分析方法。方法采用Agilent SB—C18柱（2．1mm×50mm，1．8μm）色谱柱；流动相：0．1％甲酸水-0．1％甲酸甲醇梯度洗脱；流速：0．3mL·min^-1；柱温：室温；采用电喷雾离子源（ESI），多反应监测扫描模式（MRM）进行定量分析。结果芍药苷、毛蕊花糖苷、阿魏酸、柚皮苷、丹酚酸B、党参炔苷、橙皮苷、甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素分别在0．7580—30．32μg·mL^-1（r=0．9949）、0．3040～12．16μg·mL^-1（r=0．9995）、0．2480～9．920μg·mL^-1（r=0．9969）、0．5035～20．14μg·mL^-1（r=0．9983）、0．9100～36．40μg·mL^-1（r=0．9994）、0．0975～3．900μg·mL^-1（r=0．9989）、0．9965～39．86μg·mL^-1（r=0．9982）、0．2535～10．14μg·mL^-1（r=0．9975）、0．2480～9．920μg·mL^-1（r=0．9967）、0．2770～11．08μg·mL^-1（r=0．9950）、0．1530～6．120μg·mL^-1（r=0．9928），线性关系良好；平均加样回收率（n=6）均在98．47％～101．91％内，RSD均小于2．5％。结论本法简便、快速、灵敏、准确．可为参甘冠心合剂的质量控制提供依据。

基于药代动力学参数分析比较葛根芩连汤的不同配伍肠吸收特性

基于药代动力学参数分析比较葛根芩连汤不同配伍组中葛根素、黄芩苷、小檗碱和甘草苷的肠吸收差异。葛根芩连汤中4种药效成分的浓度应用LC-MS/MS方法进行测定,血药浓度时间数据利用DAS软件进行动力学分析,并结合大鼠肠外翻及在体单向肠道灌流实验数据,比较不同配伍方式下4种成分的吸收差异。结果显示全方组中葛根素、黄芩苷及小檗碱AUC值显著提高,甘草苷AUC值显著降低,而肠外翻及在体单向肠道灌流的实验结果表明4种成分在全方组吸收明显提高,说明全方配伍可促进4种成分肠道吸收,但同时其可能加快了肝药酶对甘草苷的代谢。

外翻肠囊法研究黄芩清肺汤肠吸收成分

目的:建立发现黄芩清肺汤吸收成分群的外翻肠囊模型法,研究黄芩清肺汤主要化学成分的肠道吸收特性。方法:采用大鼠外翻肠囊模型,收集黄芩清肺汤3个浓度在肠道不同部位给药后不同时间的肠囊液样品,用UPLC检测分析,并计算各有效成分的累积吸收量(Q)及吸收速率常数(Ka)。采用Agilent Proshell 120 EC-C18(4.6 mm×50 mm,2.7μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.2%乙酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0～2 min,20%A→30%A;2～5 min,30%A→36%A;5～7 min,36%A→45%A;7～12 min,45%A→55%A),流速1 mL.min-1,柱温25℃,紫外检测波长254 nm。结果:黄芩清肺汤中9个成分可进入肠囊,分别为黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素、野黄芩苷、栀子苷、京尼平、京尼平酸、西红花苷-Ⅰ、绿原酸,此9个成分在各肠段中的吸收速率常数(Ka)均随黄芩清肺汤浓度的增加而增加(P<0.05),符合被动吸收。结论:肠囊对药物成分吸收有选择性,选择外翻肠囊法可评价黄芩清肺汤多成分的肠吸收特性。

葛根芩连汤及不同配伍组中黄酮类成分的肠外翻吸收研究

目的:应用肠外翻模型研究葛根芩连汤及不同配伍组中黄酮类成分在大鼠不同肠段的吸收特征。方法:采用大鼠肠外翻模型,考察葛根芩连汤中黄酮类成分(葛根素、大豆苷、甘草苷、野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷)的肠吸收机制以及不同肠段、药物浓度等因素对它们吸收的影响,比较各组分在全方和不同配伍组给药时的吸收变化情况。结果:各成分在不同肠段的吸收均为线性吸收,其R2均大于0.9,符合零级吸收速率。葛根素、大豆苷、甘草苷、野黄芩苷在各肠段的吸收方式除被动扩散外还存在主动转运。黄芩苷、汉黄芩苷的吸收速率常数(Ka)均随剂量的增加而增加,显示它们为被动扩散。肠道不同部位的吸收实验表明,葛根素、大豆苷、野黄芩苷、汉黄芩苷的最佳吸收部位为空肠;甘草苷、黄芩苷的最佳吸收部位为结肠。比较全方及不同配伍组的Ka,葛根素、大豆苷、甘草苷、黄芩苷在全方中吸收较好;葛根芩连组中野黄芩苷、汉黄芩苷在十二指肠的吸收较好,其他肠段则是全方组中的吸收较好。结论:肠囊对各成分的吸收有选择,不同配伍组间各组分的肠吸收有所变化,但在全方中吸收较好。

采用在体单向肠灌流模型研究葛根芩连汤不同配伍组主要指标成分的肠吸收特性

研究葛根芩连汤不同配伍组中主要指标成分在大鼠肠道的在体吸收情况。采用改良大鼠在体单向肠灌流模型,通过颈静脉插管补充血液、肠系膜静脉插管采集血样,同时收集灌流流出液,以高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)测定样品中葛根素、大豆苷、甘草苷、黄芩苷、汉黄芩苷、药根碱、小檗碱和巴马汀含量,计算其通透率。结果表明,甘草可促进君药葛根中葛根素和大豆苷的吸收,同时葛根也可促进甘草苷的吸收。黄芩苷与汉黄芩苷在全方及不同配伍组的吸收情况表明,葛根和甘草可促进黄芩苷的吸收,且葛根的作用强于甘草;葛根同样可促进汉黄芩苷的吸收,但甘草对其则为抑制作用。葛根与甘草均可促进黄连有效成分药根碱、小檗碱和巴马汀的吸收。

葛根芩连汤中葛根和甘草对黄芩有效成分在大鼠肝代谢的影响

目的研究葛根芩连汤中葛根和甘草对黄芩有效成分黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素在大鼠肝微粒体代谢的影响,探讨该复方配伍机制。方法采用在体诱导-体外肝微粒体温孵方法,分别考察葛根芩连汤中葛根、甘草对黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素在大鼠肝微粒体中代谢的影响,利用超高效液相色谱(UPLC)法测定大鼠肝微粒体中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的量。结果温孵时间黄芩苷在0～90 min,汉黄芩苷在0～60 min,黄芩素在0～10 min,汉黄芩素在0～40 min呈线性消除。对照组各成分代谢速率大小顺序为:黄芩素>汉黄芩素>汉黄芩苷>黄芩苷。与对照组相比,葛根对汉黄芩苷、黄芩素的代谢具有抑制作用,对黄芩苷及汉黄芩素的代谢具有诱导作用;甘草对汉黄芩素的代谢具抑制作用,对黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素的代谢则呈现诱导作用。结论黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素可以被大鼠肝微粒体代谢,葛根芩连汤中葛根、甘草对黄芩有效成分的代谢过程有影响。

HPLC-MS/MS测定葛根芩连汤对大鼠肝脏细胞色素P450酶的影响

研究葛根芩连汤及其主要药效成分对大鼠肝微粒体CYP450酶5种同工酶活性的影响。采用体外肝微粒体孵育技术将葛根芩连汤及其主要药效成分与各个探针底物共同孵育,利用LC-MS/MS建立CYP450 5种亚型探针底物的代谢产物的分析方法,考察微粒体蛋白浓度和孵育时间与代谢产物生成量之间的关系来确定蛋白浓度和孵育时间。运用HPLC-MS/MS检测CYP450酶5种同工酶特异性探针底物(非那西汀、甲苯磺丁脲、右美沙芬、氯唑沙宗、睾丸酮)相应代谢产物(对乙酰氨基酚、4-羟基氯唑沙宗、右菲烷、6-羟基氯唑沙宗、6β-羟基睾酮)的生成速率(V)来确定CYP450的各亚酶活性。结果表明,对乙酰氨基酚、4-羟基甲苯磺丁脲、右菲烷、6-羟基氯唑沙宗及6β-羟基睾酮线性关系良好,精密度、稳定性、平均回收率符合要求,所建方法可行;优化的肝微粒体体外孵育条件,符合药物相互作用指导原则的要求;葛根芩连汤对CYP450 5个亚型(CYP1A2,CYP2C11,CYP2D2,CYP2E1,CYP3A1/2)酶均有不同程度的抑制,其主要药效成分中小檗碱在高浓度下可对各亚型酶有一定的抑制(CYP1A2,CYP3A1/2除外)。

葛根芩连汤中黄芩活性成分在大鼠体内的组织分布

目的:考察大鼠灌服葛根芩连汤后黄芩活性成分在心、肝、胃、肺、脾、肾、小肠中分布特性。方法:采用LC-MS/MS测定黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷及汉黄芩素在大鼠各组织中的含量,Shiseido CAPCELL PAK C18色谱柱(2.0 mm×100 mm,5μm),流动相0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,采用ESI正离子检测,多反应监测模式测定。按15 g·kg-1灌胃葛根芩连汤,分别于给药后2,4,6,8,12 h断颈动脉放血处死动物,立即分取心、肝、胃、肺、肾、脾、小肠7个组织处理,测定各组织中活性成分的分布情况。结果:黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷及汉黄芩素的线性范围分别为6.150～3 077,3.030～1 515,6.170～3 085,3.140～1 569μg·L-1,日内精密度RSD 5.4%～11.7%,日间精密度RSD 7.8%～11.9%,准确度RE-6.4%～7.5%,各组织中4种活性成分的提取回收率均>75.5%,基质效应可忽略,大鼠肝脏组织中4种活性成分在放置4℃保存24h,-20℃冰箱内反复冻融1,3次及-70℃冰箱内保存4周条件下稳定性良好。结论:活性成分在各组织中浓度差异较大,大鼠灌服葛根芩连汤后黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷及汉黄芩素主要分布于肝脏、胃及小肠中,其次为肾、心、肺、脾。

大黄中一个新的蒽醌苷(英文)

为了对药用大黄的根进行化学成分研究,采用硅胶、凝胶、反相等柱色谱和高效液相色谱方法分离和纯化化合物,根据理化性质和波谱方法鉴定化合物结构。从大黄的乙醇提取物中分离得到了1个新的和1个已知的蒽醌苷类化合物。此外,还测试了化合物对肝癌细胞的细胞毒活性。