寄生蠕虫免疫逃避机制的研究进展

蠕虫感染可导致宿主脏器、消化道等发生病理损伤,危害人和动物的健康,造成繁殖能力下降,抑制幼年动物的生长发育,严重情况下甚至可导致人和动物的死亡,对公共卫生和畜牧业经济发展造成重大影响。目前,蠕虫病的防控主要依靠包括驱虫在内的综合防治措施,但由于药效不佳、药物残留、耐药性的产生等问题,新型药物及疫苗研发迫在眉睫,迄今为止少有理想的疫苗来防治蠕虫病。这是由于蠕虫在长期进化的过程中,进化出了逃避宿主免疫攻击的机制,例如免疫隔离、抗原变异、分子模拟等。因此,本文综述近年来寄生蠕虫免疫逃避机制的最新研究进展,旨在为开发有效防控蠕虫病的新型疫苗或药物提供参考。

大片吸虫Ras家族蛋白基因的克隆表达及免疫反应性研究

Ras家族相关蛋白是多种信号转导途径的关键组成蛋白，在寄生虫的生长发育过程中发挥着重要作用，但犬片吸虫的Ras家族蛋白基因（FgRap1）尚未见报道。本研究旨在对FgRapl进行克隆、表达、序列分析及免疫反应性评价。根据肝片吸虫的基因组及转录组数据．设计肝片吸虫Ras家族蛋白基因引物．以大片吸虫总RNA为模板，通过RT—PCR获得Fg尺apl基因；对其进行生物信息学分析及鉴定；然后构建pET—SUMO-FgRap1重组表达栽体，在大肠杆菌Transetta（DE3）感受态细胞中进行诱导表达；对纯化的目的蛋白进行SDS—PAGE和Western—blot分析。结果表明．大片吸虫FgRapi基因大小为648bp，编码215个氨基酸残基。生物信息学分析表明，该蛋白含有9个亲水区，但无跨膜区，有6个α螺旋、8个口折叠、2个较长的口转角、1个较长的无规则卷曲和8个主要的线性B细胞抗原表位。FgRapl蛋白为包涵体表达，用大片吸虫排泄分泌抗原免疫家兔的阳性血清进行Western—blot分析，表明其具有良好的免疫反应性。本研究首次克隆并鉴定了大片吸虫Ras家族蛋白基因，表达的重组蛋白具有良好的免疫反应性，该蛋白是潜在的大片吸虫诊断候选抗原。

犬弓首蛔虫enol-1基因的克隆及序列分析

对犬弓首蛔虫烯醇化酶(enolase)基因(enol-1)进行克隆及序列分析,预测其作为抗犬弓首蛔虫疫苗候选抗原的潜力。从犬弓首蛔虫的cDNA中扩增出enol-1基因,连接至pMD18-T载体,并筛选阳性克隆后,测序鉴定。将测序结果正确的核苷酸序列翻译成氨基酸序列,运用生物信息学软件分析enol-1蛋白的结构,预测抗原表位及功能位点,并运用Maximum likelihood(ML)法构建了系统发育树。结果表明:enol-1基因长1 311 bp,可编码437个氨基酸。Enol-1蛋白中包含18个α-螺旋区,7个β-折叠区,10个亲水区域和16个柔性区域,并预测含有9个线性B细胞抗原表位,enol-1蛋白可能具有潜在的免疫原性。并对犬弓首蛔虫enol-1基因进行了克隆及序列分析,为评价enol-1蛋白作为犬弓首蛔虫亚单位疫苗及表位疫苗奠定了基础。