培养基组分对水稻源Globotriose合成酶异源表达的影响

Globotriose是一种具有重要生理功能的α-低聚半乳糖,难以从天然产物中直接提取,酶法合成是主要的制备方式。水稻源GH36族α-半乳糖苷酶具有一步合成Globotriose的能力,但该酶在重组大肠杆菌中表达量和酶活力较低。为进一步提高酶蛋白的表达,以酶活力、菌体质量以及总酶活力为指标,研究LB、SOB、SOC、SB、NB等基础发酵培养基对酶表达量的影响。在此基础上讨论碳源(葡萄糖、乳糖、半乳糖、蔗糖、甲醇、柠檬酸)、氮源(硫酸铵、尿素、谷氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、精氨酸、半胱氨酸)、无机盐(KCl、FeCl_(3)、FeSO_(4)、MgSO_(4)、MgCl_(2)、MnCl_(2)、CoSO_(4)、CaCl_(2)、CuCl_(2)、ZnSO_(4))以及其他辅因子(维生素C、茶多酚、谷胱甘肽)的作用,根据筛选结果对可以提高总酶活力的提升因子进行浓度依存分析。结果表明:LB培养基最适合作为基础发酵培养基,在此基础上,额外添加20mmol·L^(-1)葡萄糖、5mmol·L^(-1)亮氨酸、1mmol·L^(-1) FeSO_(4)以及3mmol·L^(-1)维生素C可以有效提高目的蛋白的活性表达。经验证,利用该培养基在50mL培养体系中,总酶活力提高4倍,达到8.65U。上述研究结果将为Globotriose的高效生物转化及其在医药、食品生产领域的应用提供有效的途径,同时也为同类酶的高效表达提供有益参考。

物性修饰对方便面皮抗老化的影响

方便面皮储藏期间淀粉易发生老化,使面皮变硬,降低食用品质。为延缓其老化,采用物性修饰的方法以降低面皮储藏期间硬度的增幅,优化最佳工艺配方。单因素试验结果表明,适宜的含水量、马铃薯淀粉、羧甲基淀粉(CMS)、魔芋胶、聚丙烯酸钠均表现出较强的抗老化能力。由于聚丙烯酸钠具有优质的增稠性,添加极少量便可显著延缓老化,为降低生产成本,将聚丙烯酸钠与魔芋胶进行复配,比例1︰1时效果显著。响应面优化结果表明,方便面皮最佳配方为:水分63%,马铃薯淀粉添加量8.66%,羧甲基淀粉(CMS)添加量0.34%,魔芋胶(0.06%)与聚丙烯酸钠(0.007%)最佳配比27︰25。此时, 4℃冷藏4 d的方便面皮其硬度增幅由原配料对照组的134.58%降至66.51%。研究表明,物性修饰可有效延缓方便面皮的老化。