自拟柴郁寄生汤治疗肝郁肾虚型高泌乳素血症月经后期临床研究

目的观察自拟柴郁寄生汤疏肝补肾调周疗法治疗肝郁肾虚型高泌乳素血症月经后期的临床疗效,并探讨其作用机制。方法将60例高泌乳素血症月经后期患者,随机分为治疗组(柴郁寄生汤)和对照组(溴隐亭)各30例。观察临床综合疗效、治疗前后中医证候改善情况、血中泌乳素(PRI)和相关性激素(E_2、LH)水平,并进行疗效比较。结果与治疗前比较,2组治疗后各项积分均有改善,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组在改善月经周期及腰膝酸软、乳房胀痛、经行少腹胀痛等症状方面疗效明显优于对照组(P<0.05),治疗组总证候积分指数为81.0%,对照组为33.0%。与治疗前比较,2组治疗后PRL、P、LH、E_2水平均降低(P<0.05),且治疗组在改善E_2水平疗效明显优于对照组(P<0.05),2组FSH水平治疗后与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组总有效率比较差异有统计学意义(86.7%vs.73.3%,P<0.05)。结论自拟柴郁寄生汤补肾疏肝调周疗法治疗高泌乳素血症安全、有效。

自拟柴郁寄生汤对高催乳素血症大鼠卵巢PRL/PRLR-JAK2-STAT5信号传导通路的影响

目的观察自拟柴郁寄生汤对高催乳素血症(HPRL)模型大鼠卵巢组织PRL/PRLR-JAK2-STAT5信号传导通路的影响及其改善卵巢功能的机制。方法 Wistar大鼠60只皮下注射多巴胺受体阻断剂灭吐灵造成高催乳素血症模型。造模成功后按拉丁方法随机分为模型组、溴隐亭组、大剂量组、中剂量组、小剂量组各10只,并设正常组10只。中药高剂量组柴郁寄生汤剂量为18 g·kg^(1)·d^(1),中剂量组为9 g·kg^(1)·d^(1),低剂量组为4.5 g·kg^(1)·d^(1)。各药物组每只大鼠每次灌胃量均为2 ml。溴隐亭组给溴隐亭2 mg·kg^(1)·d^(1);模型组及正常组依据体质量予等容量蒸馏水灌胃;各组每日给药1次,连续给药30 d。治疗结束后将大鼠处死,量取大鼠卵巢体积;检测血清雌二醇(E_2)、促黄体生成素(FSH);通过Western blot及PCR法检测卵巢STAT、PRLR表达水平,以观察高催乳素血症环境对PRL/PRLR-JAK2/STAT5信号传导通路及卵巢功能的影响,并探讨其可能机制。结果与正常组比较,模型组大鼠血清PRL水平明皿升高,E_2、FSH水平均明显下降(P<0.05);卵巢STAT、PRLR蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。与模型组比较,各治疗组血清PRL水平均明显下降,血清E_2、FSH水平及卵巢STAT、PRLR表达水平均明显升高。不同治疗组间比较,中药中剂量组大鼠血清E_2、FSH水平改善最显明,卵巢STAT、PRLR蛋白表达明显最强(P<0.05),而PRL水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论柴郁寄生汤治疗高催乳素血症对改善卵巢功能有良好疗效,其作用机制可能是调节卵巢PRL/PRLR-JAK2/STAT5信号传导通路相关因子的表达,进而改善E_2、FSH等生殖激素水平。

金哲应用川夏宁坤汤治疗子宫腺肌病1例

子宫腺肌病（adenomyosis，AD）是指具有生长功能的子宫内膜侵入和扩散至子宫肌层引起的一种良性病变。中医文献无此病名，按其症状及体征属“痛经”“癜瘕”“月经过多”等范畴。金哲教授依据多年临床经验指出此病以痰瘀之邪为主，在治疗中应活血化瘀散结与祛痰除湿并重，其创制了川夏宁坤汤用于治疗痰湿瘀结型痛经（子宫腺肌病），疗效较好。现举1例介绍如下。

卵母细胞玻璃化冷冻损伤相关因素及进展

卵母细胞玻璃化冷冻损伤的机制及影响因素的研究是近年来关于生殖能力贮存的研究热点。近年来随着细胞生物学及分子生物学的迅速发展,对卵母细胞冷冻损伤的影响因素研究取得了巨大进展。综述冷冻保护剂、卵母细胞特点及发育阶段、降温速率、卵母细胞的外围结构、冷冻方法等因素对卵母细胞冷冻损伤的影响机制及降低卵母细胞冷冻损伤的最近进展。

蔗糖浓度对GV和MⅡ期冻融卵母细胞纺锤体结构的影响

目的探讨蔗糖浓度对GV期和MⅡ期冻融卵母细胞纺锤体质量的影响。方法运用纺锤丝观测仪(PolScope)、免疫荧光标记技术和激光共聚焦显微镜,对不同蔗糖浓度(0.1～0.6mol/L)下GV期和MⅡ期冻融卵母细胞体外成熟后的纺锤体分别进行检测,以未冷冻处理的卵母细胞作为对照组。结果与对照组比较,冻融组卵母细胞纺锤体的排列明显受到影响。蔗糖浓度为0.3mol/L时,GV期冻融组卵母细胞纺锤体的正常率最高(P<0.05);蔗糖浓度为0.5mol/L时,MⅡ期冻融组卵母细胞纺锤体的正常率最高(P<0.05);当蔗糖浓度继续升高时,冻融组GV期和MⅡ期卵母细胞纺锤体的正常率则显著下降(P<0.05)。冻融组卵母细胞纺锤体的正常率,MⅡ期显著高于GV期(P<0.05)。结论一定浓度范围的蔗糖可提高冻融卵母细胞纺锤体正常率;MⅡ期冻融卵母细胞的渗透耐受性及其在渗透耐受范围内的冷冻效率均高于GV期卵母细胞。

原发性卵巢黏液性癌的临床特征分析

目的:探讨原发性卵巢黏液性癌的临床特点,寻求恰当的治疗策略。方法:回顾分析24例卵巢黏液性癌和108例非黏液性癌患者的年龄、手术病理分期、残留病灶、化疗反应率,比较生存情况,分析影响预后的因素。结果:黏液性癌患者FIGO分期早(P=0.001)、肿瘤分级低(P=0.000)。两组患者的年龄没有差异,Ⅲ～Ⅳ期患者的手术满意率无差异(P=0.453)。黏液性癌组与非黏液性癌组初治时对紫杉醇+卡铂的化疗反应率无差异(63.2%vs 85.2%,P=0.212),黏液性癌组的耐药病例似乎与肿瘤分期、手术满意度无关,而且复发后耐药率明显升高至60%。黏液性癌组和非黏液性癌组患者的总体中位无进展生存期(PFS)(22个月vs 17个月,P=0.393)和中位总生存期(OS)(22个月vs 37.5个月,P=0.670)无差异。Ⅰ～Ⅱ期黏液性癌与非黏液性癌两组患者中位PFS(37.5个月vs 44个月,P=0.304)和OS(49个月vs 45个月,P=0.621)亦无差异。满意肿瘤细胞减灭术后的Ⅲ～Ⅳ期患者,黏液性癌组中位PFS比非黏液性癌组短(12个月vs27个月,P=0.003),中位OS也缩短(18个月vs 45个月,P=0.044);不满意肿瘤细胞减灭术后的Ⅲ～Ⅳ期患者两组中位PFS(7.5个月vs 16个月,P=0.533)和中位OS(18个月vs 33个月,P=0.192)无统计学差异。Cox多因素回归分析结果提示,影响患者无进展生存期的因素包括肿瘤病理类型、FIGO分期和手术满意度;而影响总生存期的因素只有手术满意度。结论:卵巢黏液性癌是上皮癌的一个独立类型,晚期黏液性癌患者比非黏液性癌预后差,化疗耐药可能是预后差的原因,需要筛选有效的化疗方案。

自拟固胎煎对复发性流产小鼠脾脏Th17/Treg细胞平衡的影响

[目的]观察自拟固胎煎对自然流产模型小鼠脾脏Th17/Treg细胞及对妊娠结局的影响。[方法]采用CBA/J雌鼠×BALB/c雄鼠建立正常妊娠模型,以CBA/J雌鼠×DBA/2雄鼠建立自然流产模型,自然流产孕鼠分为自然流产组、地屈孕酮组、中药低、中、高剂量组,正常妊娠组和自然流产组给予生理盐水,中药低、中、高剂量组分别给予7.125、14.25、28.5 g/kg自拟固胎煎汤剂,地屈孕酮组给予3.0 mg/kg地屈孕酮溶液,连续2周灌胃,每日1次。给药结束后处死并解剖小鼠,观察子宫胚胎数量并计算胚胎丢失率,流式细胞法检测脾脏中Th17细胞、Treg细胞含量及Th17/Treg细胞比例。[结果] 1)与自然流产组相比,中药低剂量组胚胎丢失率差异无统计学意义(P>0.05);中药中剂量组、高剂量组和地屈孕酮组胚胎丢失率均显著降低(P<0.05),且中药中剂量组、中药高剂量组、地屈孕酮组3组间比较,胚胎丢失率差异均无统计学意义(P>0.05)。2)与自然流产组相比,中药低剂量组Th17细胞数、Treg细胞数及Th17/Treg细胞百分率比值均无统计学差异(P>0.05);中药中剂量组、高剂量组和地屈孕酮组,Th17细胞数及Th17/Treg细胞百分率比值均显著降低(P<0.05),Treg细胞数均显著升高(P<0.05);且中药中剂量组、中药高剂量组、地屈孕酮组3组间比较,Th17细胞数、Treg细胞数及Th17/Treg细胞百分率比值差异均无统计学意义(P>0.05)。[结论]自拟固胎煎可降低Th17/Treg比例,诱导免疫耐受,减少胚胎丢失率,改善妊娠结局。

自拟固胎煎对复发性流产小鼠外周血IL-6、IL-10、IL-17及TGF-β1的影响

目的观察自拟固胎煎对复发性流产模型小鼠外周血白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达及对妊娠结局的影响。方法选取SPF级CBA/J雌鼠(n=48)、BALB/C雄鼠(n=4)、DBA/2雄鼠(n=20)作为研究对象。采用CBA/J雌鼠×BALB/c雄鼠建立正常妊娠模型,以CBA/J雌鼠×DBA/2雄鼠建立复发性流产模型,复发性流产模型孕鼠随机分为中药组、地屈孕酮组和复发性流产组,且将中药组分为高剂量亚组、中剂量亚组、低剂量亚组,正常妊娠组和复发性流产组给予生理盐水,中药高剂量亚组、中剂量亚组、低剂量亚组依次给予28.5g/kg、14.25g/kg、7.125g/kg自拟固胎煎汤剂,地屈孕酮组给予3.0mg/kg地屈孕酮溶液,连续灌胃2周,每天1次。给药结束后处死并解剖小鼠,观察子宫胚胎数量并计算胚胎丢失率,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血IL-6、IL-10、IL-17及TGF-β1的表达水平。结果与复发性流产组比较,中药中剂量亚组、高剂量亚组和地屈孕酮组胚胎丢失率均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与复发性流产组比较,中药中剂量亚组、高剂量亚组和地屈孕酮组的IL-6和IL-17的表达均显著降低,IL-10和TGF-β1的表达均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论自拟固胎煎可能通过上调IL-10、TGF-β1的表达水平,下调IL-6、IL-17的表达水平,诱导免疫耐受,减少胚胎丢失率,从而改善妊娠结局。

未成熟卵体外培养研究综合进展

尽管体外培养成熟(IVM)技术已基本接近成熟,但其成熟率还很低而且还存在许多不足和缺点。近年来随着医学细胞与分子生物学技术的迅速发展,未成熟卵体外培养研究取得巨大进展,并进行了相关改进。对近几年一些较新的研究发现进行总结,主要从卵母细胞成熟动力学,内分泌学,培养液及培养方案的选择,卵母细胞成熟指标等方面予以综述。

自拟固胎煎对复发性流产小鼠蜕膜组织Foxp3、RORγt表达的影响

目的探讨自拟固胎煎对复发性流产小鼠蜕膜组织中叉头/翼状螺旋转录因子3(forkhead/pterygoid spiral transcription factor 3,Foxp3)、维甲酸相关核孤儿受体(retinoic acid related nuclear orphan receptor,RORγt)表达的影响。方法将CBA/J雌鼠与BALB/c雄鼠2∶1合笼,建立正常妊娠模型(CBA/J×BALB/c组)作为对照组。CBA/J雌鼠与DBA/2雄鼠2∶1合笼,建立复发性流产模型(CBA/J×DBA/2组),并随机分为中药高、中、低剂量组、西药组以及模型组,HE染色观察各组蜕膜细胞形态,免疫组化法及Western Blot法分别检测各组小鼠蜕膜组织中Foxp3和RORγt的表达。结果与模型组相比,自拟固胎煎中、高剂量组小鼠蜕膜组织内细胞数量及血管数量增多,胞质丰富,胞浆水肿减轻,核仁大而明显。且Foxp3表达均显著增加(P<0.05),RORγt的表达均显著降低(P<0.05)。结论自拟固胎煎能增加蜕膜组织Foxp3的表达,减少RORγt的表达,改善小鼠蜕膜组织细胞局部环境,提示自拟固胎煎治疗复发性流产可能与其参与免疫调节,改善蜕膜环境作用机制相关。