鸡鸣散对心肌梗死小鼠心肌纤维化的影响及作用机制研究

鸡鸣散是一种传统古方,临床用于心力衰竭的治疗有较好疗效,但其机制缺乏进一步探讨。该研究采用小鼠冠状动脉结扎模型,评估其对心肌梗死小鼠心肌纤维化的影响及作用机制。拟采用冠状动脉左前降支结扎的方法构建心肌梗死后心力衰竭小鼠模型,通过超声影像图检测、苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、Masson染色及天狼猩红染色、血清心肌酶谱检测等多角度对鸡鸣散的药效进行评价;基于Western blot法对心室重构的关键蛋白转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、无翅型MMTV整合位点家族成员3a(wingless-type MMTV integration site family member 3a,Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶2(matrix metallopeptidase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶3(matrix metallopeptidase 3,MMP3)、TIMP金属蛋白酶抑制剂1(TIMP metallopeptidase inhibitor 1,TIMP1)和TIMP金属蛋白酶抑制剂2(TIMP metallopeptidase inhibitor 2,TIMP2)进行检测。结果显示,与模型组相比,鸡鸣散高、低剂量组小鼠左心室收缩末内径(left ventricular intemal diameter in systole,LVID;s)和舒张末内径(left ventricular intemal diameter in diastole,LVID;d)均显著降低,左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)和短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)明显提高,心肌梗死后小鼠心脏功能有效改善;可有效降低心肌梗死后心肌损伤标志物如肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)和乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)的水平,保护缺血心肌;HE染色显示,鸡鸣散可减弱心肌梗死后心肌炎症细胞浸润;Masson染色和天狼猩红染色显示,鸡鸣散能够有效抑制心肌纤维化水平,降低心肌组织中胶原Ⅰ/Ⅲ的含量比,改善心肌梗死后胶原重构。Western blot结果显示,鸡鸣散可降低TGF-β1、α-SMA、Wnt3a和β-catenin蛋白表达,降低MMP2、MMP3和TIMP2蛋白表达,提高TIMP1蛋白表达,提示其通过干预心脏成纤维细胞转分化来源、心肌细胞外基质代谢降低胶原Ⅰ和α-SMA含量,发挥抗心肌梗死后心肌纤维化的作用。该研究揭示了鸡鸣散通过改善心室重构发挥治疗心肌梗死的作用,为后续探究鸡鸣散物质药效研究铺路。