黄芪甲苷对人视网膜色素上皮细胞线粒体氧化损伤的调控作用

目的探究黄芪甲苷对H_(2)O_(2)诱导人视网膜上皮细胞(Retinal pigment epithelium,RPE)线粒体氧化损伤的调控作用。方法建立H_(2)O_(2)诱导人RPEARPE-19和hTERT RPE-1氧化损伤模型,并加入不同剂量黄芪甲苷,用CCK-8法检测ARPE-19和hTERT RPE-1细胞增殖活性,用荧光探针标记法检测ARPE-19细胞活性氧(Reactive oxygen,ROS)和脂质过氧化水平,用化学显色法检测ARPE-19细胞内SOD、LDH和MDA水平,用JC-1标记法检测ARPE-19细胞线粒体膜电势,用Calcein AM荧光染色法检测ARPE-19线粒体通透性,用蛋白质免疫印迹实验检测ARPE-19细胞Nrf2表达及磷酸化水平。结果与对照组比较,H_(2)O_(2)模型组ARPE-19和hTERT RPE-1细胞增殖活性明显下降(P<0.05),细胞内ROS积累增加(P<0.05),脂质过氧化水平升高(P<0.05),SOD和LDH表达水平下降(P<0.05),MDA水平升高(P<0.05),线粒体膜电势下降(P<0.05),通透性增加(P<0.05),Nrf2表达水平升高(P<0.05),磷酸化水平增加(P<0.05)。与H_(2)O_(2)模型组比较,低剂量、中剂量和高剂量黄芪甲苷处理的ARPE-19细胞增殖活性明显升高(P<0.05),中剂量和高剂量黄芪甲苷处理的hTERT RPE-1细胞增殖活性明显升高(P<0.05)。ARPE-19细胞内ROS和脂质过氧化水平下降(均P<0.05),SOD和LDH表达水平升高(P<0.05),MDA水平下降(P<0.05),线粒体膜电势升高(P<0.05),通透性降低(P<0.05),Nrf2表达无明显变化(P>0.05),磷酸化水平增加(P<0.05)。结论黄芪甲苷缓解H_(2)O_(2)诱导的人RPE氧化应激和线粒体功能损伤。