酸性铁蛋白放免分析中抗体纯化的可行性

用改进的工艺自人心肌组织中提取的高纯度酸性铁蛋白（ＡＩＦ），与经溴化氰（ＢｒＣＮ）活化的ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ偶联，制得ＡＩＦ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ亲和层析柱。用经该柱纯化的兔抗ＡＩＦ抗血清来组建酸性铁蛋白放免分析法（ＡＩＦＲＩＡ）用四参数Ｌｏｇｉｓｔｉｃ数据处理程序处理数据。批内、批间ＣＶ分别为１．６５％和９．７１％，灵敏度为１．８９μｇ／ｌ，回收率为１０２％，可测范围为７．０—３６９．６μｇ／ｌ，ＥＤ５０为２７．５０μｇ／ｌ，与ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＬＦ无交叉反应，同常规铁蛋白的交叉反应率为１．７４％。对照组男、女性各３０例，血清ＡＩＦ含量（ｘ±２ｓ）分别为１６．７６±６．９８μｇ／ｌ和１３．３２±６．２５μｇ／１，差异不显著（Ｐ＜０．０５）。１０例肝癌患者血清ＡＩＦ含量为３６．０９±１５．８４μｇ／ｌ，较对照组有非常显著的增高（Ｐ＜０．００１）。上述结果提示，用亲和层析技术纯化ＡＩＦ抗血清是可行的，有利于提高ＲＩＡ的灵敏度、特异性、准确性及临床有效性。