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突变型低氧诱导因子1α腺病毒载体对骨髓间充质干细胞增殖的影响
1
作者
张蔚威
王钰
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2017年第25期3956-3963,共8页
背景:目前发现低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1,HIF1α)可提高组织和细胞在缺血环境下继续生存的能力,在促进血管再生方面有重要意义。目的:构建三点突变型HIF1α联合示踪因子hrGFP双基因重组腺病毒载体Ad-CMV-HIF1α^(mu)-...
背景:目前发现低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1,HIF1α)可提高组织和细胞在缺血环境下继续生存的能力,在促进血管再生方面有重要意义。目的:构建三点突变型HIF1α联合示踪因子hrGFP双基因重组腺病毒载体Ad-CMV-HIF1α^(mu)-IRES-hrGFP-1,研究其对骨髓间充质干细胞增殖的影响。方法:将第3代骨髓间充质干细胞分组培养,实验组以突变基因Ad-CMV-HIF1α^(mu)-IRES-hrGFP-1病毒液转染细胞,阳性对照组以未突变基因Ad-CMV-HIF1α-IRES-hrGFP-1病毒液转染细胞,阴性对照组以Ad-CMV-IRES-hrGFP-1空病毒液转染细胞,空白对照组不转染任何病毒液。转染72 h后,进行HIF1α基因mRNA及蛋白检测;转染24,48,72,96,120 h,MTT法检测细胞增殖。结果与结论:(1)HIF1α基因mRNA检测:实验组、阳性对照组HIF1α基因mRNA表达高于阴性对照组、空白对照组(P<0.05),其余组间两两比较差异无显著性意义;(2)HIF1α蛋白检测:实验组细胞中HIF1α蛋白表达高于阳性对照组、阴性对照组、空白对照组(P<0.05),后3组间比较差异无显著性意义;(3)细胞增殖:阳性对照组与空白对照组细胞生长速度均较慢,两组间相比较无显著性意义;实验组细胞增殖程度高于阳性对照组、空白对照组(P<0.05);(4)结果表明,重组腺病毒介导的三点突变型HIF1α联合hrGFP基因转染骨髓间充质干细胞后,不仅可在常氧条件下持续表达目的蛋白HIF1α,同时也可促进骨髓间充质干细胞的增殖。
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关键词
干细胞
骨髓干细胞
骨髓间充质干细胞
低氧诱导因子1Α
基因突变
hrGFP
病毒载体
血管化
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突变型低氧诱导因子1α腺病毒载体对骨髓间充质干细胞增殖的影响
1
作者
张蔚威
王钰
机构
锦州医科大学附属第一医院整形外科
锦州医科大学附属第一医院临床生物样本中心
出处
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2017年第25期3956-3963,共8页
基金
辽宁医学院校长基金--临床医学建设专项基金项目资助(XZJJ20140215)~~
文摘
背景:目前发现低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1,HIF1α)可提高组织和细胞在缺血环境下继续生存的能力,在促进血管再生方面有重要意义。目的:构建三点突变型HIF1α联合示踪因子hrGFP双基因重组腺病毒载体Ad-CMV-HIF1α^(mu)-IRES-hrGFP-1,研究其对骨髓间充质干细胞增殖的影响。方法:将第3代骨髓间充质干细胞分组培养,实验组以突变基因Ad-CMV-HIF1α^(mu)-IRES-hrGFP-1病毒液转染细胞,阳性对照组以未突变基因Ad-CMV-HIF1α-IRES-hrGFP-1病毒液转染细胞,阴性对照组以Ad-CMV-IRES-hrGFP-1空病毒液转染细胞,空白对照组不转染任何病毒液。转染72 h后,进行HIF1α基因mRNA及蛋白检测;转染24,48,72,96,120 h,MTT法检测细胞增殖。结果与结论:(1)HIF1α基因mRNA检测:实验组、阳性对照组HIF1α基因mRNA表达高于阴性对照组、空白对照组(P<0.05),其余组间两两比较差异无显著性意义;(2)HIF1α蛋白检测:实验组细胞中HIF1α蛋白表达高于阳性对照组、阴性对照组、空白对照组(P<0.05),后3组间比较差异无显著性意义;(3)细胞增殖:阳性对照组与空白对照组细胞生长速度均较慢,两组间相比较无显著性意义;实验组细胞增殖程度高于阳性对照组、空白对照组(P<0.05);(4)结果表明,重组腺病毒介导的三点突变型HIF1α联合hrGFP基因转染骨髓间充质干细胞后,不仅可在常氧条件下持续表达目的蛋白HIF1α,同时也可促进骨髓间充质干细胞的增殖。
关键词
干细胞
骨髓干细胞
骨髓间充质干细胞
低氧诱导因子1Α
基因突变
hrGFP
病毒载体
血管化
Keywords
Stem Cells
Mesenchymal Stem Cells
Cell Proliferation
Tissue Engineering
分类号
R394.2 [医药卫生—医学遗传学]
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作者
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发文年
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1
突变型低氧诱导因子1α腺病毒载体对骨髓间充质干细胞增殖的影响
张蔚威
王钰
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2017
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