目的通过shRNA敲低下咽癌FaDu细胞(简称FaDu细胞)蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)的表达,了解其在下咽癌发生发展中的作用。方法设计特异性shRNA序列,...目的通过shRNA敲低下咽癌FaDu细胞(简称FaDu细胞)蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)的表达,了解其在下咽癌发生发展中的作用。方法设计特异性shRNA序列,包装慢病毒并转染FaDu细胞,特异性敲低CIP2A的表达,分别通过RT-PCR和Western blot检测CIP2A mRNA和CIP2A蛋白的表达情况。结果(1)shRNA敲低FaDu细胞中CIP2A后,实验组CIP2AmRNA和CIP2A蛋白的表达量均较空白组显著降低。(2)细胞克隆和CCK8实验结果显示,实验组细胞较空白组细胞增殖能力明显下降(t=50.86,P<0.01;t=12.406,P<0.001)。细胞划痕实验结果显示,实验组细胞横向迁移能力较空白组细胞明显下降。Transwell实验结果显示,实验组细胞纵向迁移能力较空白组细胞明显下降(t=40.038,P<0.01;t=12.247,P<0.001)。结论敲低FaDu细胞CIP2A后细胞增殖和迁移能力均下降,表明CIP2A参与调控下咽癌细胞的生物学行为,可作为潜在的抗癌靶点。展开更多
文摘目的通过shRNA敲低下咽癌FaDu细胞(简称FaDu细胞)蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)的表达,了解其在下咽癌发生发展中的作用。方法设计特异性shRNA序列,包装慢病毒并转染FaDu细胞,特异性敲低CIP2A的表达,分别通过RT-PCR和Western blot检测CIP2A mRNA和CIP2A蛋白的表达情况。结果(1)shRNA敲低FaDu细胞中CIP2A后,实验组CIP2AmRNA和CIP2A蛋白的表达量均较空白组显著降低。(2)细胞克隆和CCK8实验结果显示,实验组细胞较空白组细胞增殖能力明显下降(t=50.86,P<0.01;t=12.406,P<0.001)。细胞划痕实验结果显示,实验组细胞横向迁移能力较空白组细胞明显下降。Transwell实验结果显示,实验组细胞纵向迁移能力较空白组细胞明显下降(t=40.038,P<0.01;t=12.247,P<0.001)。结论敲低FaDu细胞CIP2A后细胞增殖和迁移能力均下降,表明CIP2A参与调控下咽癌细胞的生物学行为,可作为潜在的抗癌靶点。