胃肠道癌症患者肠道原虫共感染的分子流行病学调查

目的寄生虫感染与癌症的关系已成为研究热点之一。目前胃肠癌患者肠道单一原虫感染已有报道,但共感染报道较少见。本研究旨在明确胃肠癌患者肠道原虫共感染情况。方法根据人五毛滴虫、十二指肠贾第虫、微小隐孢子虫、人芽囊原虫、脆弱双核阿米巴和毕氏肠微孢子虫特异的基因序列设计引物进行巢氏PCR扩增,检测195例临床胃肠癌患者肠道原虫共感染情况。结果巢氏PCR检测结果显示胃肠癌患者肠道原虫总感染率为48.72%(95/195)。其中2种原虫共感染23例(8例:人五毛滴虫+人芽囊原虫;11例:人五毛滴虫+微小隐孢子虫;3例:人五毛滴虫+十二指肠贾第虫;1例:十二指肠贾第虫+微小隐孢子虫),占肠道原虫感染的24.21%。3种原虫共感染为3例(1例:人五毛滴虫+微小隐孢子虫+人芽囊原虫;2例:人五毛滴虫+十二指肠贾第虫+微小隐孢子虫),占原虫感染的3.16%。1种原虫感染67例(56例:人五毛滴虫;9例:微小隐孢子虫;1例:人芽囊原虫;1例:脆弱双核阿米巴),占原虫感染的70.52%,未检测到毕氏肠微孢子虫感染。结论胃肠癌患者存在肠道原虫共感染且感染率较高。单因素方差分析发现人五毛滴虫单独感染病例显著高于含人五毛滴虫的2种原虫共感染(P=0.0022)以及3种原虫共感染病例(P=0.0019),而2种和3种原虫共感染病例的感染率间无明显差异(P=0.2775),表明胃肠道癌症患者中人五毛滴虫单独感染病例高于2种或以上原虫共感染病例。BLAST和单核苷酸多态性分析发现,不同感染原虫的基因序列除个别与GenBank参考序列同源性为100%外,其他基因序列在不同位点出现不同程度的碱基突变、插入或丢失现象。该研究结果为今后胃肠癌患者病因学以及诊断和防治提供了重要参考。

球虫散防治鸡柔嫩艾美尔球虫病试验

试验观察了中药制剂球虫散分别以 0 .5 %、1%和 2 %添加于饲料中的抗鸡柔嫩艾美尔球虫效力 ,结果发现将球虫散按 1%以上添加于饲料中其抗球虫指数达到 180以上 ,具有高效抗球虫作用。由于中药具有毒性低、残留少等优点 ,在防治鸡球虫病方面具有很好的应用前景。

双抗夹心─ELISA诊断兔隐孢子虫病初步研究

本文报道了应用双抗夹心─ＥＬＩＳＡ检测兔粪便中隐孢子虫卵囊抗原方法的建立。试验所用抗体为抗小球隐孢子虫（Ｃ．ｐａｒｖｕｍ）卵囊壁的单克隆抗体，经对２０头份兔粪便样本分别进行抗酸染色和双抗夹心─ＥＬＩＳＡ试验．结果抗酸染色法检出８份有隐孢子虫卵囊，而ＥＬＩＳＡ法除对抗酸染色阳性的８份粪样判为阳性外，还对抗酸染色阴性的１份粪样判为阳性；并不与兔球虫粪便发生类属反应。此外，本试验还在稀释液中加入ＥＤＴＡ，并增加了反应温度，使得试验在抗体包被反应板并封闭完成后３０分钟结束整个检测过程。

兔球虫病治疗药物筛选

本研究通过对球虫消１号、球虫消２号治疗兔球虫病的试验观察，发现球虫消１号对球虫病具有较好的治疗效果。将球虫消１号以２５０倍稀释，让兔自然饮用７ｄ，粪检卵囊转阴，停药后连续粪检６ｄ，卵囊检查仍为阴性，而且具有极好的安全性。用球虫消１号处理组兔的体重在１０ｄ内比用传统药物氯苯胍处理组兔的体重平均增加０．４５ｋｇ，这就为兔球虫病的临床治疗提供了极有效药物。

宠物重要人兽共患寄生虫病

随着宠物饲养的盛行,与宠物相关的人兽共患寄生虫病愈加得到高度重视。为了避免和减少人兽共患寄生虫病的流行,本文就几种重要的宠物人兽共患寄生虫病的流行情况、诊断及防治等作一介绍,以期提高认识,防患未然。

隐孢子虫卵囊部分特性研究

本试验对小球隐孢子虫(C.parvum)卵囊、鼠隐孢子虫卵囊(C.muris)以及新发现的隐孢子虫亚型卵囊的抗酸染色特性进行了观察,发现只有小球隐孢子虫卵囊具有抗酸染色特性。同时,利用抗小球隐孢子虫卵囊壁的3C3株单抗腹水对3种类型的卵囊进行免疫组化染色,发现三种卵囊存在相同抗原,这就为以后隐孢子虫病的诊断和防治提供了依据。

费氏艾美尔球虫(E.ferrisi)某些生物学特性的研究

采用从自然感染球虫的小鼠粪便中分离的单卵囊接种小鼠获得成功。观察了此种球虫的卵囊形态、孢子化时间、潜隐期和寄生部位等，确定此球虫为费氏艾美尔球虫（Ｅ．ｆｅｒ－ｒｉｓｉ）。同时观察该球虫的卵囊排出规律和致病性等。

球虫散防治鸡柔嫩艾美尔球虫病试验

本试验观察了中药制剂球虫散分别以0.5％、1％和2％添加于饲料中的抗鸡柔嫩艾美尔球虫效力,结果发现将球虫散按1％以上添加于饲料中其抗球虫指数达到180以上,具有高效抗球虫作用,由于中药具有毒性低、残留少等优点,在防治鸡球虫病方面具有很好的应用前景。

不同地理株鸡柔嫩艾美耳球虫致病性的研究

采用盲肠病变记分、每克粪便含有的卵囊数、粪便记分、肉鸡增重等检查方法对来自山东、吉林、黑龙江、北京4个不同地区的鸡柔嫩艾美耳球虫的致病性进行了研究。将上述各株球虫分别接种10日龄AA肉鸡,并于接种后5d开始进行各项指标的检测。结果表明:山东株(S株)的致病性最强,黑龙江株(H株)和吉林株(J株)的致病性次之,北京株(B株)最弱。

旋毛虫新生幼虫差减cDNA文库的构建及其初步筛选

利用差减杂交 (减法杂交 ,subtractive hybridization)技术 ,以旋毛虫新生幼虫 ( newborn larvae,NBL)的 c DNA作为试验方 ( tester) ,以肌幼虫 +成虫的 c DNA作为驱动方 ( driver) ,制备新生幼虫差减 c DNA;利用 T载体构建 NBL差减 c DNA文库 ,获克隆株 90个。以试验方的差减 c DNA第 2次 PCR产物 +未差减c DNA为试验方探针 ,以驱动方的差减 c DNA第 2次 PCR产物 +未差减 c DNA为驱动方探针 ,在 NBL差减c DNA文库中初筛 NBL的期特异性克隆 ,获初筛克隆 2 4个。这些初筛期特异性克隆进一步用 Southern blot确认鉴定 ,获真阳性期特异性克隆 2个 ( NBL SSC1 ,NBL SSC2 )。DNASIS以及 Blaster的分析结果显示 ,这2个克隆为旋毛虫的 2个新基因 ,其中 NBL SSC1编码糖蛋白 ,NBL SSC2编码丝氨酸蛋白酶。本试验为旋毛虫期特异性基因全长序列的调取、分析。

中国蜱传病主要流行趋势及防控科技对策

蜱是一种寄生在动物体表常见的吸血寄生虫,具有从宿主获得多种病原体的能力,是多种人畜共患传染病的重要传播媒介。随着近几年蜱传病的发生具有增加的趋势,蜱及蜱传病再次成为公众关注的焦点。综述了中国蜱传病的主要类型、发生流行因素和病原体危害特点、防控的主要技术手段以及目前防治蜱传病存在的主要科技问题和今后防控蜱传病的科技对策,以期使人们更深入地了解蜱传病,制定相应的防控措施以降低其危害性。

旋毛虫对BALB/c小鼠体内人结肠癌HCT-8细胞的作用

目的观察旋毛虫感染对BALB/c小鼠体内人结肠癌HCT-8细胞生长的作用。方法用不同剂量的旋毛虫感染BALB/c小鼠,并在不同时间接种HCT-8细胞,荷瘤20 d后解剖小鼠,测定小鼠体内肿瘤的体积、重量,计算抑瘤率,并检测T淋巴细胞亚群。结果各实验组小鼠肿瘤体积和重量均显著低于对照组,CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值、未长瘤小鼠比例、小鼠死亡率和抑瘤率均显著高于对照组;先接虫后荷瘤组抑瘤效果优于先荷瘤后接虫组。结论旋毛虫对BALB/c小鼠体内的人结肠癌HCT-8细胞的生长有一定的抑制作用。

旋毛虫抗肿瘤机制研究进展

旋毛虫具有抗多种肿瘤的作用,宿主感染的旋毛虫数量不同,其体内肿瘤受抑制程度亦不同;宿主在感染旋毛虫后的不同时间接种肿瘤细胞,体内肿瘤的生长速度降低程度也不同。旋毛虫在宿主体内发育的不同阶段,均可能具有抗肿瘤作用。旋毛虫通过细胞免疫、肿瘤抗原和抗肿瘤活性物质发挥抗肿瘤作用。

旋毛虫抗小鼠体内A549肺癌细胞作用的研究

目的观察旋毛虫对BALB/c小鼠体内A549瘤细胞生长的抑制作用。方法将实验小鼠(BALB/c)随机分为7组,每组10只,1～6组分别接种未处理或不同方法处理的旋毛虫,在不同时间段接种A549细胞。7组为不接种旋毛虫对照组。荷瘤后第30d解剖小鼠,测定小鼠体内肿瘤的体积、重量和无瘤生长小鼠比率,检测T淋巴细胞亚群变化。结果未处理旋毛虫接种组,紫外线处理及60Co处理旋毛虫接种组小鼠肿瘤体积和重量均显著低于未接种对照组(P<0.01),脾脏CD3+、CD4+、CD8+百分率、CD4+/CD8+比值及无瘤生长小鼠比率显著高于未接种对照组(P<0.05或P<0.01);接种前7d和接种后11d荷瘤组小鼠的肿瘤体积、重量均显著低于未接种对照组(P<0.01),脾脏CD3+、CD4+、CD8+百分率及CD4+/CD8+比值显著高于未接种对照组(P<0.05)。结论未处理旋毛虫和经不同方法处理的旋毛虫对BALB/c小鼠体内的A549肺癌细胞的生长均有抑制作用,接种11d后荷瘤组的抑瘤效果更显著。

微小隐孢子虫CP15/60-DNA滴鼻免疫小鼠诱导的粘膜与系统免疫反应

为了观察微小隐孢子虫表面蛋白基因的重组质粒 pc DNA3- 15 /6 0诱导机体产生的免疫应答情况 ,用重组质粒经鼻粘膜接种 BAL B/c小鼠 ,采用淋巴细胞转化实验、流式细胞仪、EL ISA和免疫组化染色法检测了其诱导的系统和粘膜免疫反应 ,并在免疫后经口接种微小隐孢子虫卵囊。结果为免疫小鼠淋巴细胞增殖反应二免后 SI均大于 2 (P<0 .0 1) ;免疫后 ,CD+ 4 T细胞增加了 (32 .4 2± 2 .19) % (P>0 .5 ) ,CD+ 8T细胞增加了(2 6 .73± 3.33) % (P<0 .5 ) ;小肠粘膜 Ig A分泌型浆细胞数增加了 94 .3± 6 .3;血清中 Ig G和小肠液中 Ig A滴度分别提高了 0 .6 8± 0 .0 6和 0 .77± 0 .0 5 (P<0 .0 1) ;实验组小鼠排出卵囊减少了 2 .2倍 ,排卵时间缩短了4 .5 d(P<0 .5 )。研究表明重组质粒诱导机体产生多种免疫反应 。

应用RAPD技术对鸡柔嫩艾美耳球虫不同地理株的多态性研究

利用RAPD技术对鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)GZ株、HB株、JL株及HB株与JL株杂交虫株FZ1进行了研究。结果表明:E.tenella不同地理株间及同一地理株亲代与子代间均存在DNA多态性。其中不同地理株间种内变异程度较大(SI=0.6225～0.6977)。而同一地理株子代与亲代间也发生遗传变异,但变异程度不大(SI=0.9813～0.9910)。同时对本室培育的HB株与JL株的杂交虫株FZ1的基因组DNA进行RAPD分析,发现该杂交株与其亲本HB株、JL株的相似值为0.8215,0.7916,大于HB株与JL株间相似值(0.6977),小于传代虫株间的相似值(0.9813～0.9910),且其扩增条带显示出与亲本株间的相似,且又有不同,表明该杂交虫株是1株既具有两亲本株的遗传性状,又发生了变异的虫株。

IL-18增强日本血吸虫DNA疫苗Sj23的免疫保护效果(英文)

将小鼠IL-18基因和日本血吸虫Sj23膜蛋白基因分别插入pVAX1载体,构建真核表达质粒pVAX/ mIL-18和pVAX/Sj23 ,联合或单独免疫小鼠,以pVAX1空载体作对照,免疫2次,间隔2周,2次免疫后4周攻击日本血吸虫尾蚴。体液和细胞免疫检测结果表明,联合免疫组能诱导小鼠产生较强的抗日本血吸虫成虫可溶性抗原(SWAP)IgG,较高水平的IFN-γ和IL-2。攻虫试验表明,联合免疫小鼠成虫减虫率和肝脏减卵率分别达41 .6 %和49 .4 %,明显高于pVAX/Sj23单独免疫组(减虫率和肝脏减卵率分别为26 .5 %和41 .4 %)。以上试验结果表明,IL-18能明显增强Sj23 DNA疫苗在小鼠体内的免疫应答,并且产生较强的保护作用。

旋毛虫新生幼虫期特异性T668全长cDNA的克隆及序列分析

利用旋毛虫新生幼虫期特异性 c DNA片段 T6 6 8- SS2作为核酸探针 ,在新生幼虫 c DNA文库中筛选出 10个阳性克隆。序列测定及分子生物学软件分析表明 ,克隆 G10 - 6的 c DNA片段全长 16 0 0 bp,含 12 90 bp的开放阅读框架 ,编码 1个由 4 30个氨基酸残基组成的多肽 ,其相对分子质量理论推导值为 4 6 84 0 ,等电点 (PI)为 9.6 5。主导氨基酸为Ser(11.39% )和 Thr(10 .93% )。开放阅读框架中具有丝氨酸蛋白酶保守功能区及酶活性位点结构 ,其 N末端的信号肽及 2个糖基化位点表明 ,其为分泌性糖蛋白 ,预示其可能在细胞外起着重要作用。DNA同源性分析表明 ,该 c DNA为一新的 c DNA分子。