免疫检查点抑制剂治疗肿瘤的不良反应及管理策略

免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICPIs)是现今备受关注的肿瘤治疗新方法,其拓宽了肿瘤传统治疗的边界,开启了肿瘤免疫治疗的新时代。与传统化疗药物相比,其在显著延长患者生存期(overall survival,OS)的同时减轻了免疫相关不良反应(immune-related adverse events,ir AEs)。由于ICPIs全新的作用机理,且上市时间较短,其不良反应尚未有标准化的处理方案。随着免疫治疗在临床上的广泛应用,ir AEs日益获得关注。本文旨在对ir AEs的处理原则予以综述,为ICPIs在临床上的安全应用提供理论依据。

α7-nAchR激动剂GTS-21对放射性肠炎小鼠的疗效及对其血清炎症因子的影响

目的探讨α7-n AchR激动剂GTS-21对放射性肠炎小鼠的临床疗效,并观察其对血清炎症因子水平的影响。方法选取100只成年雌性BALB/c小鼠,对其腹部进行10 Gy照射建立放射性肠炎模型,并随机分为GTS-21组和对照组,各50只。其中GTS-21组分别在照射前1 d和照射后1 d腹腔注射GTS-21,对照组腹腔注射无菌生理盐水。分别于照射后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d抽取小鼠尾静脉血检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)水平。对比不同时刻两组小鼠体质量、粪便成型量、血清炎症因子水平变化。另在照射5 d后处死并采用HE染色观察肠道隐窝深度。结果对照组小鼠体质量、粪便成型量每2个时刻间对比差异均有统计学意义(P<0.05),且治疗后2 d、3 d、4 d和5 d时GTS-21组小鼠体质量、粪便成型量均明显高于对照组(P<0.05);两组血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平均随着时间的延长逐渐显著升高,除1 d后每2个时刻间对比差异均有统计学意义(P<0.05),且治疗后2 d、3 d、4 d和5 d时GTS-21组小鼠血清炎性因子水平均明显低于对照组(P<0.05);GTS-21组小鼠肠道隐窝深度明显高于对照组。结论α7-n AchR激动剂GTS-21对放射性肠炎小鼠有理想的治疗作用,并且能够降低血清炎症因子水平,增多肠道隐窝结构。

程序性死亡分子1／程序性死亡分子1配体信号通路在肺癌细胞株上的表达及其生物学意义

目的观察程序性死亡分子1配体（PD—L1）在肺癌细胞株上的表达及其对T细胞杀伤效应的调节作用。方法取对数生长期的肺癌H1299、A549细胞与抗人PD—L1单克隆抗体及相应的同型对照IgG共孵育，经流式细胞仪（FCM）检测细胞表面PD—L1分子的表达。采用常规方法从健康人外周血单个核细胞诱导树突状细胞（DCs），并经凋亡肿瘤细胞和激发型CD40单克隆抗体刺激获得成熟DCs，与自体T细胞共孵育后获得肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）；FCM检测肺癌细胞上PD—L1分子的表达；人连接附着分子（JAM）法和单克隆抗体阻断实验分析CTL细胞对肺癌细胞株的杀伤效应，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞培养上清中干扰素（IFN），1的含量。结果（1）经凋亡肿瘤细胞负载的成熟DCs可诱导自体T细胞分化为肿瘤特异性CTL；（2）H1299细胞高表达PD—L1分子，表达率为（91．1±7．8）％，而A549细胞低表达PD—L1分子，表达率仅为（20．6±2．4）％，两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）CTL能有效杀伤A549细胞，联合PD—L1单克隆抗体并不能进一步促进CTL对A549细胞的杀伤效应。单独CTL组和CTL联合PD．L1单克隆抗体组的DNA片段形成率分别为（81．1±8．9）％、（83．3±9．4）％，两组比较差异无统计学意义（t=0．048，P〉0．05）。单独CTL不能有效杀伤H1299细胞，但联合PD—L1单克隆抗体可有效促进CTL对H1299细胞的杀伤效应。单独CTL组和CTL联合PD—L1单克隆抗体组的DNA片段形成率分别为（46．2±7．3）％、（80．7±10．3）％，两组比较差异有统计学意义（t=7．952，P〈0．01）。（4）T细胞和A549细胞共培养上清中分泌的较高含量的IFN-1[（683．0±66．0）pg／m1]，且加入PD—L1单克隆抗体并未进一步上调IFN-1的分泌[（705．2±79．6）pg／m1]，而H1299细胞和CTL共培养上清中IFN-1含量较低[（547．7±50．6）pg／m1]，但加入PD—L1单克隆抗体可上调IFN-1的分泌[（1162．9±136．2）pg／m1]，两组比较差异有统计学意义（t=5．431，P〈0．05）。结论在肺癌细胞株上表达的PD—L1分子，可降低CTL对肺癌细胞的杀伤效应。

氯化锂增加获得性耐药人肺癌细胞系H460R对TRAIL的敏感性

目的:通过人工诱导建立肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)获得性耐药的肺癌细胞系,氯化锂联合rhTRAIL作用细胞,以期了解氯化锂增敏TRAIL的现象及机制。方法:通过低剂量rhTRAIL诱导人肺大细胞癌细胞系H460,建立TRAIL耐药细胞株H460R并鉴定,应用MTT和流式细胞术分析氯化锂和rhTRAIL联合给药后亲本株与耐药株细胞增殖和凋亡差异,应用RT-PCR和Western blot检测死亡受体表达。结果:rhTRAIL处理亲本株H460和耐药株H460R后细胞存活率存在显著差异(P<0.01),IC50分别为59.2ng/ml和294.8ng/ml。60ng/ml rhTRAIL处理耐药株及亲本株后平均细胞凋亡比例存在显著差异(10.5%vs 19.4%,P<0.01),耐药株表现出显著的TRAIL耐受现象。但联合20mmol/L氯化锂后,MTT及流式细胞术检测耐药株细胞增殖及凋亡发现H460R对rhTRAIL的敏感性显著增加。进一步研究发现死亡受体DR4和DR5的mRNA及蛋白水平升高,这可能是药物增敏的机制之一。结论:氯化锂能够增加获得性耐药细胞系H460R对TRAIL的敏感性,死亡受体表达增加是可能的增敏机制之一。