产气荚膜梭菌和腐败梭菌在厌氧菌基础培养基中的生长特性

测定了产气荚膜梭菌B型、D型和腐败梭菌在新研制的厌氧菌基础培养基中的生长曲线和产毒能力等特性。结果表明,这些细菌可以在新培养基中良好生长和产毒。产气荚膜梭菌B 型经2 h 的适应期后,很快进入对数生长期,培养到8 h细菌密度接近最高值,OD630为4.329;经检测,培养4 h^24 h的细菌所产生的毒素(培养物上清)1μL^2μL可致死KM小鼠。产气荚膜梭菌D型的生长速度也较快,无适应期就直接进入对数生长期,培养到12 h 时细菌密度最高, OD630 为1.75;细菌最佳产毒期在6 h^14 h,培养物上清0.5μL^0.65μL可致死KM小鼠。腐败梭菌生长速度较慢,经6 h的适应期后,才进入对数生长期,培养到14 h时细菌密度最高,OD630为1.335;细菌毒力在培养后的6 h^24 h内10μL菌液可达到在24 h内致死KM小鼠的效果。

牛分支杆菌DNA疫苗工程菌的高密度培养研究

对牛分支杆菌三价DNA疫苗工程菌进行了高密度培养的探索。通过摇瓶培养试验对3种培养基进行了筛选,选择出具有高密度培养潜力的半合成培养基作为中试规模的发酵罐培养基;经对培养温度、溶氧、pH、转速、补料方式等各种条件优化,培养的工程菌密度OD600达到22.92,细菌湿重达到27.173 g/L,质粒产量为1.44 mg/g湿菌。试验还对培养物质粒的稳定性进行了证实。

羊梭菌病多联灭活疫苗生产用厌氧培养基的研究

通过多次培养试验 ,研制成功了新的厌氧培养基。该培养基用于羊梭菌病多联灭活疫苗中的产气荚膜梭菌 (B型、D型 )和腐败梭菌的培养 ,细菌的产毒能力和免疫原性均达到了《中华人民共和国兽用生物制品规程》(简称《规程》)的要求 ,配制的疫苗成品检验全部合格。该培养基与《规程》提供的肉肝胃酶消化汤培养基相比 ,配制方法简单 ,节约人力和时间 ,所用试剂均可从市场购买 ,所需原料成本低廉 ,仅为肉肝胃酶消化汤培养基的 2 1 %～ 2 7%。

布鲁氏菌病活疫苗加改良保护剂冻干后的效果观察

为了提高冻干产品的档次 ,对现有的老式冻干机进行了改造 ,冻干工艺由原来的间接板层冻干改变为直接板层冻干 ,由于冻干工艺的改变 ,使用明胶蔗糖保护剂冻干的布鲁氏菌病活疫苗 (M5株 )物理性状不好 ,出现结晶、不易脱壁、残余水分超标等现象。在原明胶蔗糖保护剂的基础上添加了规程容许的其它保护剂成分后 ,问题得到了解决 ,经活菌计数、残余水分测定、物理性状检查 ,保存 4个月、7个月、12个月后活菌计数等与 2 0 0 2 0 3批布鲁氏菌病活疫苗 (S19号 )比较 ,证明疫苗质量并没有下降。试验成果运用在布鲁氏菌病活疫苗(M5株 ) 2 0 0 2 0 7～ 2 0 0 2 15批的生产中 ,疫苗质量有了明显提高 ,完全达到了《规程》

产气荚膜梭菌D型、B型提纯抗原冻干后的保存期与抗原性

原生产羊梭菌病灭活疫苗的羊肠毒血症 (产气荚膜梭菌D型 )、羔羊痢疾 (产气荚膜梭菌B型 )冻干干粉85 0 2批 (干粉分别保存 )在 2～ 8℃保存 17年后 ,与 2 0 %铝胶生理盐水配成疫苗 ,以 2、4、6、8和 12mg剂量免疫家兔 ,采血分离血清 ,与产气荚膜梭菌D型、B型相应毒素作中和试验 ,测定血清中和效价 ,检验两种干粉的抗原性。结果表明 ,干粉抗原保存 17年后 ,其羔羊痢疾、肠毒血症干粉抗原最小免疫剂量由制出时的 4mg下降为 6mg ,证明B型、D型干粉抗原 6mg免疫剂量所产生的羔羊痢疾、猝狙。

羊快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联四防灭活苗的保存条件与效力试验

对羊快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联四防灭活疫苗进行了保存条件与效力试验,证实在2～8℃(冷藏)保存近48个月后,疫苗效力无显著变化,均达到《中华人民共和国兽用生物制品规程》(2000版)规定的标准;13～29℃(室温)保存48个月后,疫苗效力不减;保存84个月后,3批疫苗中2批疫苗的效力已达不到《规程》规定的标准。

使用合成培养基生产羊大肠杆菌病灭活疫苗的初步试验

设计了一种适用于羊大肠杆菌病灭活疫苗生产的合成培养基 (MM培养基 ) ,与原生产用 2 %蛋白胨肉汤培养基比较试验。经活菌计数、无菌检验、安全检验和效力试验证明 ,两种培养基在实验室制备的疫苗 ,均达到了《规程》

羊快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联四防灭活疫苗(浓缩苗)的质量检验

羊快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联四防灭活疫苗(以下简称三联四防苗)。由于注射剂量大,动物反应大,不便于运输和占用很 大的贮藏空间。给用户使用带来不便。我公司生物制品事业部进行了三联四防苗浓缩疫苗的试制,取得成功。对生产的11批三联四防浓缩苗 进行检验,其结果全部达到了《中华人民共和国兽用生物制品生产及检验规程》规定的标准。

不同保存温度对布氏菌病活疫苗(S2株)细菌存活的影响

（《中华人民共和国兽用生物制品规程》规定布氏菌病活疫苗贮藏条件为2℃～8℃，有效期为一年。但在疫苗检验过程中，发现保存在2℃～8℃条件下的布氏菌病活疫苗活菌数下降的幅度较大，造成活菌数时有不达标的情况。为了保证疫苗在一年有效期内的活菌数量，常常采用增大附加量（计算头份时一般不少于30％的附加量）或低温冷冻条件保存（-15℃以下）的方法。

牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗生产菌种的复壮及鉴定试验

牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗自20世纪50年代研究成功并投放市场以来,对防治牛出败起到了重要作用。《规程》规定该疫苗用家兔效检免疫保护至少2/4,对照死亡2／2为合格。近来我们在检验中发现，疫苗攻毒保护2／4的居多，虽然也达到合格标准，但保护率相对偏低。

羊大肠埃希氏菌病灭活疫苗效力检验方法的改进试验

我公司从1962年生产羊大肠埃希氏菌病灭活疫苗以来，效力试验一直采用豚鼠经免疫后腹腔注射强毒的方法，来验证疫苗效力是否合格。据笔者统计：1962—1987年共计生产99批，做了241组次效力（攻毒）试验，其中有62次对照动物不死、死亡不全或保护差，占全部检验次数的25．73％。经过分析认为，造成这种现象的原因是最小致死量（MLD）掌握不准确所致。

不同菌数配苗对牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗生产影响

牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗的生产采用合成培养基通气培养,活菌计数在10亿/ml～30亿/ml、60亿/ml～130亿/ml;活菌计数在60亿/ml～130亿/ml的菌液稀释配苗后,菌数在27亿/ml～50亿/ml之间的各产品,其效力检验和安全检验差异性不明显,均可达到兽医生物制品制造及检验规程规定。同时培养菌数高的菌液稀释配苗可节约生产成本14.6148元/万ml左右,对降低劳动强度,缩短生产周期,优化生产工艺有重大意义。

口蹄疫A型油佐剂和leo佐剂弱毒灭活疫苗免疫持续期的研究

用实验室配制的口蹄疫油佐剂和leo佐剂A型弱毒灭活疫苗各免疫6月龄健康敏感牛(乳鼠中和抗体滴度小于1∶4)5头,免疫后每月采血一次,分离血清;采用固定病毒稀释血清的方法,通过乳鼠中和试验检测免疫牛血清中的口蹄疫A型中和抗体的产生与消长情况,用karber法计算中和效价,绘制动态曲线图。结果显示,口蹄疫弱毒灭活疫苗免疫牛,可以产生高滴度的血清中和抗体,免疫牛血清中和抗体效价均在免疫后1个月左右达到高峰。油佐剂疫苗免疫的牛,血清中和抗体效价比较高,但下降比较迅速;leo佐剂疫苗免疫的牛,血清中和抗体效价比较低,但下降比较平缓。

布氏杆菌病疫苗生产工艺的改进后的效果观察

通过对布氏杆菌病疫苗的生产工艺方面进行了部分优化:在原明胶蔗糖保护剂的基础上添加改良剂10%脱脂奶粉后,残余水分比原来有所下降,基本上解决了残余水分偏高的现象;结晶现象、不脱壁现象已完全解决;同时活菌计数的活菌数提高了3%。结果表明新的布氏杆菌复合培养基不受培养基原材料的质量因素影响,且疫苗的生产工艺稳定,易于保存,半成品的活菌数提高了28%,疫苗冻干后的活菌数提高了39%。

不同佐剂牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗的对比试验

牛巴氏杆菌病也称牛出败，是由多杀性巴氏杆菌引起的急性传染病，常用牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗（简称牛出败苗）来预防。牛巴氏杆菌病灭活疫苗系用免疫原性良好的B型多杀性巴氏杆菌，接种适宜培养基培养，将培养物用甲醛溶液灭活，加氢氧化铝胶制成。

羊快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联四防菌苗生产的体会

羊快疫、羔羊痢疾，肠毒血症三联四防菌苗（以下简称羊三联四防菌苗）。是我厂自行研制成功的给羊注射一针，能够预防羊快疫、羔羊痢疾、猝狙、肠毒血症等四种传染病的灭活菌苗。自１９８１年投产以来，已累计生产５７８批，１００％合格。羊三联四防菌苗由于其可靠的防疫...

用MM培养基生产羊大肠杆菌病灭活疫苗的试验

本试验研制出一种适于生产羊大肠杆菌病灭活疫苗的培养基 (MM培养基 )。该培养基不需要牛肉 ,可替代 2 %蛋白胨肉汤培养基 ,使疫苗生产成本由原成本 0 .0 1 4元 /mL下降至0 .0 0 2 1元 /mL。活菌计数、无菌检验、安全检验和效力试验证明 ,用该培养基制备的疫苗 ,均达到了《中华人民共和国兽用药物制品规程》

裂解血球全血与健康动物血清在牛多杀性巴士杆菌病灭活疫苗生产中使用效果对比试验

兽用生物制品制造及检验规程中规定:牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗在通气培养过程中,需添加0.1%裂解血球全血。本试验通过在合成培养基中添加裂解血球全血与健康动物血清培养对比,发现在牛多杀性巴士杆菌病灭活疫苗生产中添加一定量健康动物血清,其生长菌数、效力检验、安全检验均与添加0.1%裂解血球全血生产检验指标相一致,且有降低污染率、降低生产成本的效果,值得生产中推广使用。

羊快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联四防菌苗在室温中保存期的检测

羊快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联四防菌苗在室温中保存期的检测柳晓冰刘福荣乌斯满江张读朴新疆生物药品厂乌鲁木齐８３００１３我厂研制的羊快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联四防菌苗（以下简称羊三联四防菌苗）是我厂生物药品中的主要产品，自１９８１年投产以来，已制造了...