Gal和PEI修饰磁性纳米颗粒载体介导的c-Met siRNA构建及其抗肝癌细胞效应观察

目的构建半乳糖(Gal)和聚乙烯亚胺(PEI)修饰磁性纳米颗粒(SPIO)载体介导的c-MetsiRNA,并观察其抗肝癌细胞效应。方法制备Gal-PEI-SPIO纳米载体,以琼脂糖凝胶电泳检测载体与siRNA的结合情况,采用CCK-8试验检测纳米载体复合物的细胞毒性;分别采用q-PCR和Westernblotting法检测纳米载体携带c-MetsiRNA在细胞中的沉默效率,使用Transwell法观察Gal-PEI-SPIO/c-MetsiRNA纳米复合物对肝癌细胞MHCC-97H迁移和侵袭能力的影响。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示,Gal-PEI-SPIO和siRNA以SPIO、siRNA质量比≥4∶1时两者可紧密结合;细胞毒性分析显示,当SPIO、siRNA质量比≥4∶1时细胞活性迅速降低;q-PCR、Westernblotting结果显示,Gal-PEI-SPIO/c-MetsiRNA纳米复合物有效降低了MHCC-97H细胞中c-MetmRNA及蛋白表达(P均<0.01);在细胞侵袭、迁移实验中,Gal-PEI-SPIO/c-MetsiRNA纳米复合物使MHCC-97H侵袭、迁移的穿膜细胞减少(P均<0.05)。结论Gal-PEI-SPIO纳米载体能够与siRNA紧密结合,并能携带c-MetsiRNA进入肝癌细胞发挥对c-Met的沉默作用,从而抑制肝癌细胞MHCC-97H的侵袭和迁移能力。