苦参碱对人口腔鳞状细胞癌细胞抑制作用的体外研究

目的探讨苦参碱对口腔鳞癌细胞系CAL27生物学行为的影响。方法体外培养CAL27细胞至对数生长期,采用不同浓度苦参碱处理细胞24 h、48 h、72 h,四甲基偶氮唑盐法检测其对细胞增殖的影响并计算半数抑制浓度,划痕实验检测苦参碱对细胞迁移能力的影响,Transwell实验检测苦参碱对细胞侵袭能力的影响,克隆形成实验检测苦参碱对细胞克隆形成能力的影响。结果应用苦参碱可抑制CAL27细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力。结论苦参碱可以抑制人口腔鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力,有望成为治疗口腔鳞状细胞癌的新型辅助药物。

基于网络药理学和分子对接探讨姜黄素对口腔鳞状细胞癌抑制作用的潜在机制

目的 通过网络药理学与分子对接探究姜黄素对口腔鳞状细胞癌抑制作用的分子机制。方法 使用SwissTargetPrediction数据库获得姜黄素靶点,检索GeneCards数据库和OMIM数据库获得口腔鳞癌的靶点,二者取交集得到潜在作用靶点。交集靶点导入String数据库构建PPI网络,使用Cytoscape软件进行优化并借助CytoHubba插件得到核心靶点。交集靶点导入Metascape数据库进行GO和KEGG富集分析。借助Autodock软件和Pymol软件进行姜黄素和核心靶点蛋白间的分子对接和可视化。结果 姜黄素在口腔鳞癌中的作用靶点有36个。PPI分析得到的核心靶点为AKT1、STAT3、EGFR、EP300、CCNA2、CDK2。GO分析结果揭示了潜在作用靶点主要涉及蛋白的磷酸化、对炎症的反应、有丝分裂细胞周期的调控等生物学功能。KEGG分析结果揭示了潜在作用靶点主要涉及FoxO信号通路、PI3K-Akt信号通路和趋化因子信号通路等。分子对接提示,姜黄素与核心靶点(AKT1、STAT3、EGFR、EP300、CCNA2、CDK2)之间结合稳定。结论 姜黄素对口腔鳞癌的抑制作用具有多靶点、多通路的特点,这为进一步的研究和药物研发提供了依据。

敲除Nrf2对4NQO诱导的小鼠舌癌变过程中增殖与分化的影响

目的研究核因子E2相关因子(Nrf2)在4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)诱导的小鼠舌癌发生中对增殖和分化的影响。方法野生型(WT)与Nrf2基因敲除(Nrf2-/-)C57BL/6J小鼠各36只,其中阴性对照组10只,饮用纯净水,4NQO组26只,饮用4NQO水溶液(50μg/ml)16周。24周末处死小鼠,取舌组织用于病理学分析、Brdu和免疫组化(IHC)染色。通过生物信息学分析Nrf2与KLF4的相关性。结果构建了4NQO诱导的小鼠舌癌模型,并发现Nrf2-/-小鼠的舌癌发生率和Brdu染色的阳性细胞数明显高于WT小鼠。IHC染色显示,Nrf2-/-小鼠舌组织中分化相关基因KLF4、Loricrin、CK5的表达显著低于WT小鼠。在舌癌和正常组织中Nrf2的表达与KLF4成显著正相关。结论敲除Nrf2可以促进舌癌发生和细胞增殖,并抑制癌变过程中的细胞分化。

莱菔硫烷对RhoC敲低的口腔鳞癌细胞的调控作用

目的 观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对RhoC稳定敲低的口腔鳞癌细胞系CAL27 RhoC/shRNA的影响。方法 选取口腔鳞癌细胞系CAL27 RhoC/shRNA进行培养,用不同浓度的SFN处理对数期CAL27RhoC/shRNA细胞,通过RT-PCR和western blot检测SFN对细胞中Nrf2 RNA和蛋白水平的影响。分别通过MTT实验、克隆形成实验和侵袭实验检测SFN对口腔鳞癌细胞增殖能力、克隆形成能力和侵袭能力的影响;PHOD染色检测SFN对口腔鳞癌细胞F-actin聚合能力的影响。结果 应用SFN能有效抑制口腔鳞癌细胞CAL27 RhoC/shRNA的增殖能力、克隆形成能力、侵袭能力和F-actin蛋白聚合能力。结论 SFN可减弱RhoC敲低的口腔鳞癌细胞的恶性能力。

抗卵巢癌单链免疫细胞因子真核表达载体的构建及表达

为将细胞因子IL 2靶向卵巢癌局部 ,提高肿瘤局部细胞因子的浓度 ,构建并表达了抗卵巢癌单链免疫细胞因子IL 2 1 83B2scFv .通过基因工程将两段基因IL 2和 1 83B2scFv开放读码框架的编码序列克隆在一起 ,在CHO细胞内人巨细胞病毒启动子的作用下表达可溶性融合蛋白 .酶联免疫吸附法检测其免疫学活性 ,并检测其促淋巴细胞增殖活性 .构建成功的抗体细胞因子融合蛋白能够在哺乳动物细胞内表达并能分泌到细胞外 ,且融合蛋白既能与卵巢癌相关抗原OC1 83B2很好地结合 ,又能刺激IL 2依赖细胞株的增殖 。

cDNA微矩阵筛选卵巢癌相关基因的研究

背景与目的:导致卵巢癌发生、发展的分子机制目前还不完全清楚,有研究者认为癌发生可能是许多基因表达水平的改变导致细胞内出现一系列分子变化的结果。本研究的目的是应用cDNA微矩阵方法对正常人卵巢组织及卵巢癌组织基因表达的差异性进行比较研究,筛选卵巢癌的相关基因。方法:将512个人癌基因和抑癌基因的cDNA用点样仪点在特制玻片上,制成表达谱芯片;分别提取人正常卵巢组织及卵巢癌组织的mRNA,通过逆转录PCR方法,将Cy3和Cy5两种荧光分别标记到两种组织的cDNA,制备成cDNA探针,并与表达谱芯片进行杂交及扫描,通过计算机应用ImaGene3.0软件分析和处理数据。结果:对正常卵巢组织和卵巢癌组织的癌基因和抑癌基因表达谱分析,在3例或3例以上组织有共表达差异性的基因有38个,其中在卵巢癌组织中下调的基因有23个,上调的基因有15个。结论:应用cDNA微矩阵技术研究卵巢癌的基因表达谱,初步筛选出了肿瘤相关基因。

抗体-白细胞介素2融合蛋白183B2scFv-Interleukin2的表达及活性检测

目的在哺乳动物细胞内表达抗体细胞因子融合蛋白183B2scFv Interleukin2,为卵巢癌提供一种新的治疗方法。方法通过基因工程的方法将两段基因IL2和183B2scFv开放读框的编码序列克隆在一起,在CHO K1细胞内人巨细胞病毒启动子的作用下表达可溶性融合蛋白,并检测其对肿瘤细胞的靶向性。结果采用哺乳动物细胞表达,系统表达的这种小分子融合蛋白,既保留了与卵巢癌OC183B2抗原结合的特性,又保持了IL2的生物学活性。融合蛋白在细胞培养上清中保持稳定,更重要的是融合蛋白将IL2靶向表达OC183B2抗原的卵巢癌细胞表面化的同时,又能刺激IL2依赖细胞株的增殖,从而诱发局部有效的抗肿瘤反应。既提高了融合蛋白的穿透组织能力和肿瘤组织部位的浓聚,又避免了大剂量全身应用细胞因子引起的副作用。结论真核表达系统表达的融合蛋白具有很好的生物学活性。

前列腺素E2和白三烯B4对口腔癌促进作用的研究

目的通过在DMBA诱导的金黄地鼠口腔癌颊囊模型上,局部应用白三烯B4(LTB4)或前列腺素E2(PGE2),探讨LTB4和PGE2在口腔癌形成中的作用,进一步阐明口腔癌的发病机制。方法用DMBA涂抹金黄地鼠左侧颊囊粘膜4周,第五周开始分别局部涂抹LTB4和PGE220周,处死动物,取全部颊囊进行肉眼观察计数和组织学检查,并进行统计学分析。结果LTB4+DMBA组癌变率为51.4%(18/35);PGE2+DMBA组癌变率为45.7%(16/35),均显著高于DMBA组20.0%(7/35)。另外两组不使用DMBA启动,同时局部分别涂抹LTB4和PGE220周,两组均有异常增生发生,但是没有癌变。结论PGE2和LTB4是口腔癌形成的促进剂,并且有可能成为化学预防作用的重要靶点。

双特异性抗体治疗恶性肿瘤的研究进展

双特异性抗体 (BsAb) ,一方面结合免疫效应细胞上的激活分子或偶联毒素 ,另一方面利用抗体的特异性与肿瘤相关抗原 (TAA)结合。通过双结合 ,激活效应细胞如细胞毒性T细胞和NK细胞 ,或通过免疫毒素发挥靶向抗肿瘤效应 ,是一种很有潜力的恶性肿瘤免疫治疗方式。本文对双特异性抗体的构建方法。

卵巢癌相关基因的克隆

目的 筛选和克隆卵巢上皮癌相关基因。 方法 用 3种锚定引物和 8种随机引物 ,共 2 4种组合进行PCR扩增 ,通过 DD- RTPCR分析正常卵巢上皮和卵巢上皮癌 m RNA的基因表达差异 ,将差异片段分离出来 ,并回收 ,克隆和进行斑点杂交鉴定、DNA序列测定 ,并通过国际互联网络检索 Gen Bank进行同源性分析。 结果 获得30个差异表达的片段 ,经斑点杂交初步筛选 ,克隆 11个差异显示的阳性片段。选取其中的 5个进行序列分析。 结论 计算机同源性分析表明 ,5个均为新基因片段 ,已收录入 Gen Bank。

“Journal club”在口腔医学研究生培养中的应用

医学期刊联谊会(Journal club)在国外经常被应用于医学研究生教育,可以帮助学生在新的学习领域尽快熟悉前沿的科学文献,提高理解能力和讨论技巧,以及对文献的批判性评价技巧的培养。本文作者组织和带领课题组的研究生定期举行"Journal club",帮助研究生加深了对科学文献的理解,培养了他们对文献的归纳整理能力,提高了研究生的科研兴趣和口头表达能力,显著提高了研究生的科研素质和能力。

mRNA差异显示筛选卵巢癌相关基因

目的 :利用mRNA差异显示技术研究正常卵巢上皮和卵巢上皮癌之间的基因表达差异状况 ,筛选和克隆卵巢上皮癌相关基因。方法 :通过DD PCR分析正常卵巢上皮和卵巢上皮癌总RNA将差异片段分离并显示出来 ,将其回收 ,利用基因克隆技术将其筛选和克隆出来作为探针进行斑点杂交鉴定、DNA序列测定、通过国际互联网络检索GenBank进行同源性分析。结果 :共筛选克隆鉴定 6个差异显示片段。其中 4个为未知基因片段 ,已收录入GenBank ,GenBank登录号为AF136 413～AF136 417。两个为已知基因片段 ,其中一个克隆 3AOSKN3与GenBank中染色体 17hCIT克隆 98%同源。另外一个克隆 3AON2 8与GenBank中人类NADH :辅酶Q氧化还原酶有 99%的同源性 ,研究表明该基因与肿瘤相关。结论 :上述结果证明mRNA差异显示方法和杂交分析结合已成为一种敏感、高效。

抑癌基因P16和P15在口腔黏膜癌前病变中的甲基化改变

目的:探讨口腔黏膜癌前病变组织中抑癌基因P16、P15启动子甲基化与患者病理学及人口学资料的关系。方法:收集2008年以来就诊于首都医科大学附属北京口腔医院黏膜科口腔白斑87例和口腔癌39例,20例正常口腔黏膜为对照,采用内切酶消化法和实时定量PCR的方法对P16和P15甲基化状态进行研究。结果:正常口腔黏膜中,P16、P15启动子区处于未甲基化状态,口腔白斑中P16和P15甲基化阳性率分别为41.38%和44.83%,与正常对照相比显著增高(P<0.001);口腔鳞癌P16和P15甲基化阳性率分别为20.51%和23.08%,与正常对照相比明显增高(P<0.05)。P16、P15启动子甲基化与患者性别、年龄、病变部位、性质、类型、吸烟等因素无相关性。结论:抑癌基因P16和P15启动子甲基化可能是口腔黏膜白斑和早期癌变的标志物。

人垂体肿瘤转化基因1在卵巢癌组织中的表达及其意义

背景与目的:人垂体肿瘤转化基因1(humanpituitarytumortransforminggene1,hPTTG1)是新近发现的一个癌基因。我们用基因表达谱芯片对晚期卵巢低分化浆液性癌进行卵巢癌相关基因的筛查,发现该基因在这种卵巢癌中明显高表达。本研究对不同临床分期、不同病理类型及不同组织学分级的上皮性卵巢癌组织hPTTG1的表达进行检测,探讨该基因在卵巢癌发生发展中的作用。方法:用非竞争性RT-PCR方法半定量检测27例卵巢癌及4例正常卵巢组织中hPTTG1mRNA的表达,用免疫组化方法检测该27例卵巢癌及18例正常卵巢组织中hPTTG1蛋白的表达。结果:在正常卵巢组织中hPTTG1mRNA有低水平的表达,而卵巢癌组织hPTTG1mRNA表达高于正常,两者之间有显著性差异(P<0.01),卵巢癌组织较正常卵巢组织表达倍增1.1～4.8,中位倍增2.4。进一步分析卵巢癌组织中hPTTG1mRNA表达水平与临床分期及病理分级的关系,未发现hPTTG1mRNA表达水平的高低与临床分期具有相关性,但发现hPTTG1mRNA倍增与肿瘤分化程度密切相关(r=0.686,P<0.05)。hPTTG1蛋白在所有卵巢癌组织中表达,而在正常卵巢组织中未检测到hPTTG1蛋白的表达。结论:hPTTG1表达在早期卵巢癌即发生改变,其表达可能与不良分化有关;hPTTG1在卵巢癌组织中高表达,可能是卵巢癌的一个分子标志。

8-烯丙基山竹醇在口腔鳞癌化学预防中的作用

目的评估8-烯丙基山竹醇在口腔鳞癌化学预防中的作用。方法培养人口腔鳞癌细胞系CAL27,以不同浓度的山竹醇和8-烯丙基山竹醇处理细胞,采用MTT实验、克隆形成实验、划痕实验及流式细胞术检测其对CAL27细胞生物学行为的影响。建立对二甲基苯并蒽(DMBA)诱导的地鼠颊囊异常增生模型,阴性对照为不做处理,阳性对照为左侧颊囊涂DMBA 3周,实验组为涂DMBA 3周后分别涂0. 5、1. 0 mmol/L山竹醇或8-烯丙基山竹醇2周,实验结束后处死动物,取左侧颊囊进行组织病理学观察和BrdU免疫组织化学染色。结果 MTT实验结果显示,山竹醇和8-烯丙基山竹醇均可抑制CAL27细胞增殖,且呈一定浓度和时间依赖关系。药物作用72 h,8-烯丙基山竹醇的半数抑制浓度(IC50)为(13. 13±2. 55)μmol/L,明显低于山竹醇的(32. 20±3. 24)μmol/L (t=8. 008,P=0. 001);两种药物同种浓度作用效果相比,8-烯丙基山竹醇对细胞增殖的抑制作用明显强于山竹醇,以10 (24 h:t=8. 012,P=0. 001; 48 h:t=5. 939,P=0. 001; 72 h:t=12. 551,P=0. 001)和20μmol/L (24 h:t=8. 887,P=0. 001; 48 h:t=9. 324,P=0. 002; 72 h:t=5. 361,P=0. 002)浓度时差异最为显著。克隆形成实验结果显示,山竹醇和8-烯丙基山竹醇用药组20μmol/L浓度时的克隆形成率分别为(44. 1±0. 4)%和(23. 6±0. 6)%,明显低于10μmol/L浓度时(55. 6±2. 8)%(t=6. 894,P=0. 019)和(31. 0±0. 6)%(t=15. 556,P=0. 001); 10 (t=14. 682,P=0. 003)和20μmol/L (t=51. 514,P=0. 001)浓度时8-烯丙基山竹醇对CAL27细胞菌落形成的抑制作用明显强于山竹醇。划痕实验结果显示,用药12 h时,10和20μmol/L山竹醇组的细胞相对迁移率分别为(16. 00±4. 55)%(t=3. 139,P=0. 026)和(3. 00±3. 16)%(t=6. 608,P=0. 001),明显低于阴性对照组的(30. 33±7. 64)%; 10和20μmol/L 8-烯丙基山竹醇组的细胞相对迁移率分别为(16. 25±3. 86)%(t=3. 245,P=0. 023)和(6. 00±2. 65)%(t=5. 214,P=0. 006),也均明显低于阴性对照组的(30. 33±7. 64)%。用药24 h时,10和20μmol/L山竹醇组的细胞相对迁移率分别为(23. 75±4. 57)%(t=4. 718,P=0. 005)和(5. 75±1. 50)%(t=10. 432,P=0. 001),均明显低于阴性对照组的(45. 33±7. 64)%; 10和20μmol/L 8-烯丙基山竹醇组的细胞相对迁移率分别为(23. 50±2. 38)%(t=5. 529,P=0. 003)和(11. 67±2. 31)%(t=7. 308,P=0. 002),也均明显低于阴性对照组的(45. 33±7. 64)%。20μmol/L浓度作用24 h时,山竹醇组的细胞相对迁移率明显低于8-烯丙基山竹醇(t=4. 151,P=0. 009)。凋亡实验结果显示,10μmol/L时,山竹醇组的早期凋亡率为(5. 00±0. 10)%,明显高于阴性对照组的(1. 57±0. 21)%(F=70. 950,P=0. 001)。20μmol/L时,山竹醇组的早期和晚期凋亡率分别为(5. 90±0. 78)%(t=39. 384,P=0. 001)和(9. 73±1. 67)%(t=10. 101,P=0. 001),均明显高于阴性对照组; 8-烯丙基山竹醇组的早期凋亡率为(4. 63±1. 16)%,明显高于阴性对照组(t=4. 511,P=0. 041)。同种浓度作用效果相比较,8-烯丙基山竹醇对细胞凋亡的促进作用明显弱于山竹醇(10μmol/L:t=5. 982,P=0. 004; 20μmol/L:t=8. 578,P=0. 001)。组织病理学观察结果显示,0. 5 mmol/L山竹醇处理组(t=2. 546,P=0. 031)、0. 5 mmol/L 8-烯丙基山竹醇处理组(t=3. 485,P=0. 008)、1. 0 mmol/L山竹醇处理组(t=4. 556,P=0. 001)和1. 0 mmol/L 8-烯丙基山竹醇处理组(t=5. 393,P=0. 001)地鼠的口腔黏膜上皮单纯增生面积均明显低于阳性对照组; 0. 5 mmol/L 8-烯丙基山竹醇处理组(t=2. 130,P=0. 046)、1. 0 mmol/L山竹醇处理组(t=3. 434,P=0. 010)和1. 0 mmol/L 8-烯丙基山竹醇处理组(t=4. 518,P=0. 004)地鼠的口腔黏膜上皮异常增生面积也均明显低于阳性对照组,1. 0 mmol/L山竹醇处理组(t=2. 793,P=0. 023)和1. 0 mmol/L 8-烯丙基山竹醇处理组(t=4. 997,P=0. 001)均明显低于0. 5 mmol/L山竹醇处理组。BrdU免疫组织化学染色结果显示,阴性对照组(t=7. 563,P=0. 001)、0. 5 mmol/L山竹醇处理组(t=2. 862,P=0. 029)、0. 5 mmol/L8-烯丙基山竹醇处理组(t=4. 693,P=0. 002)、1. 0 mmol/L山竹醇处理组(t=5. 071,P=0. 002)和1. 0 mmol/L 8-烯丙基山竹醇处理组(t=5. 133,P=0. 001)地鼠的BrdU增殖指数均明显低于阳性对照组,0. 5 mmol/L 8-烯丙基山竹醇处理组(t=3. 724,P=0. 007)、1. 0 mmol/L山竹醇处理组(t=7. 000,P=0. 001)和1. 0 mmol/L 8-烯丙基山竹醇处理组(t=4. 413,P=0. 003)均明显低于0. 5 mmol/L山竹醇处理组。结论 8-烯丙基山竹醇可抑制人口腔鳞癌细胞CAL27的增殖和迁移,促进细胞凋亡;对DMBA诱导的地鼠口腔颊囊异常增生具有显著抑制作用,但作用效果与山竹醇存在一定差异。

三氧化二砷对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨不同剂量三氧化二砷(As2O3)对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及机制。方法体外培养人口腔鳞癌细胞株SCC-4,将处于对数生长期的SCC-4细胞接种于24只裸鼠后腿皮下,建立裸鼠移植瘤模型。荷瘤裸鼠随机分为四组,每组6只,分别为对照组(A)、As2O3低剂量组(B组)、中剂量组(C组)和高剂量组(D组)。分别于肿瘤细胞接种第6、9、12、15、18、21天按上述剂量给予裸鼠腹腔注射As2O3,对照组注射生理盐水。停药1周后处死动物,完整取出瘤块,测量肿瘤重量和体积,计算肿瘤抑制率,免疫组织化学法检测各组标本中Ki67、cleaved caspase-3、CD31的表达情况,计数阳性细胞数及微血管密度(MVD)并进行统计学分析。结果As2O3低、中、高剂量组均能抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,中剂量组移植瘤体积抑制率最大为64.95%,低剂量组为32.99%,高剂量组为44.33%。免疫组化结果显示,用药后As2O3中剂量组Ki67的表达及MVD值明显低于对照组,凋亡蛋白cleaved capase-3的表达显著高于对照组(P<0.01),高剂量组凋亡蛋白cleaved capase-3的表达亦显著高于对照组(P<0.01),MVD值明显低于对照组(P<0.05),低剂量组Ki67、cleaved caspase-3、CD31的表达与对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。用药前各组裸鼠体重无差异(P>0.05),用药后高剂量组裸鼠体重显著低于对照组和中、低剂量组(P<0.05)。结论 As2O3对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤具有一定的抑制作用,其可能的机制为抑制肿瘤细胞增殖及血管生成,诱导肿瘤细胞凋亡。As2O3对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用与剂量有关。

口腔癌和癌前病变细胞中氧化应激相关基因差异表达

目的筛选口腔鳞状细胞癌和癌前病变细胞中与氧化应激相关的差异表达基因,探讨氧化应激损伤与口腔癌发生的相关性及其作用机理。方法采用核酸微阵列技术,对口腔鳞状细胞癌细胞株Tca8113、KB及口腔癌前病变细胞株DOK细胞的基因表达谱进行比较研究,检测、筛选口腔鳞状细胞癌中与氧化应激相关的差异表达基因。结果与氧化应激相关的差异表达基因有28条。与氧化应激关系较密切的差异表达基因有9条,如过氧化物酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽合成酶、谷胱甘肽S-转移酶、硫氧还原酶及硒蛋白等。另外,细胞角蛋白17、细胞角蛋白10及细胞角蛋白7在Tca8113和KB细胞中表达明显增高。结论氧化应激损伤可能通过某种信号通路引起细胞角蛋白发生变化,从而导致口腔鳞状细胞癌的发生。氧化应激损伤可能与口腔鳞状细胞癌的发生密切相关。

口腔鳞癌发生过程中Survivin促血管生成作用的研究

目的探讨口腔鳞癌发生过程中Survivin促进血管生成的作用。方法选取北京口腔医院病理科存档石蜡标本45例,其中口腔白斑伴上皮轻-中度异常增生16例,口腔白斑伴上皮重度异常增生12例,口腔高-中分化鳞状细胞癌17例,另取正常口腔粘膜组织10例作对照。采用免疫组化SP法对各组织病损中Survivin和VonWillebrandFactor的表达情况进行检测。结果免疫组化结果显示,从正常粘膜→白斑伴上皮轻-中度异常增生→白斑伴上皮重度异常增生→口腔鳞癌,Survivin的表达量呈增加趋势;微血管密度则由正常对照组的28.49±11.87条/mm2升高到口腔鳞癌组的91.98±40.20条/mm2,各组之间有显著性差异。结论Survivin的过度表达是口腔鳞癌发生过程中的早期事件。随着Survivin表达量的增加,微血管密度明显升高。Survivin的过表达可能抑制了血管内皮细胞的凋亡,从而促进血管的生成。

山竹醇对人口腔鳞癌细胞糖酵解代谢通路的影响

目的观察山竹醇(Garcinol)对人口腔鳞癌细胞系CAL27增殖和克隆形成能力的影响,以及对CAL27细胞糖酵解代谢的影响。方法培养人口腔鳞癌细胞系CAL27,不同浓度的Garcinol处理CAL27细胞,MTT法检测其对细胞增殖能力的影响。克隆形成实验检测对细胞克隆形成能力的影响。RT-PCR检测Garcinol对细胞内糖酵解通路关键酶表达的影响,以及对糖酵解通路的重要基因表达的影响。并检测细胞上清液中葡萄糖、乳酸含量的变化来评估Garcinol对CAL27细胞内糖酵解水平的影响。通过酶活性实验检测细胞内糖酵解关键酶(HK、PK、LDH)的酶活性变化。结果 Garcinol能显著抑制CAL27细胞的增殖,呈浓度和时间依赖性(P<0.01);能明显抑制CAL27细胞的克隆形成能力(P<0.01)。同时,Garcinol能促进糖酵解关键酶己糖激酶(HK),丙酮酸激酶(PK),乳酸脱氢酶(LDH)的基因表达,增强糖酵解关键酶(HK、PK、LDH)的酶活性(P<0.05)。Garcinol也能增加AKT和m TOR的基因表达水平(P<0.05)。Garcinol还能促进CAL27细胞的葡萄糖吸收和乳酸分泌。结论 Garcinol能够抑制人口腔鳞癌细胞系CAL27的增殖和克隆形成能力,同时也增加了细胞内的糖酵解水平。

过氧化氢对小鼠口腔癌发病影响的实验研究

目的检测氧化应激相关基因Nrf2、GST-π、HO1在4NQO小鼠舌癌标本中的表达水平,分析氧化损伤对4NQO诱导的小鼠口腔癌的促进作用。方法 190只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、6%、15%和30%过氧化氢处理组。阴性对照组不做任何处理,其余4组以0.005%4NQO诱癌16周后,分别用水(阳性对照组)和6%、15%、30%的过氧化氢涂抹小鼠舌部,每周3次,共8周。第24周末处死全部动物,取舌组织进行组织病理学分析及免疫组化染色。结果在粘膜从正常到异常增生、再到癌变的过程中,Nrf2、GST-π和HO1的表达持续升高,并且30%过氧化氢组中重度异常增生和癌变的组织中上述三者的积分光密度值显著高于阳性对照组(P<0.01);6%和15%组中,GST-π的积分光密度值均显著高于阳性对照组(P<0.05),Nrf2和HO1的积分光密度值与阳性对照组无统计学差异。结论过氧化氢造成的氧化损伤进一步促进了4NQO小鼠口腔癌的发展。