人工智能在辅助生殖中的应用及伦理规范

随着科技的不断进步,人工智能(Artifi cial Intelligence,AI)逐渐应用于各个领域,其中包括医疗和生殖领域。在辅助生殖技术中,人工智能为医生和患者提供了诊断、预测、治疗方案选择等方面的支持。然而,这种技术的使用也带来了一系列伦理问题。因此,制定和遵守伦理规范尤为重要。

人皮下脂肪来源脂肪干细胞的分离培养及鉴定

目的:建立从切除得到的人皮下脂肪组织分离及培养脂肪干细胞(ADSC)的方法。方法:以人皮下脂肪组织为材料来源,分离、培养、扩增ADSC,并应用针对相对特异性分子的免疫组化、流式细胞术及多向诱导分化等方法鉴定干细胞特性。结果:本实验培养的ADSC具有干细胞生长特性并表达相对特异分子,有多向分化的潜能,并且具有遗传稳定性。结论:从切取的人皮下脂肪组织可成功分离得到ADSC,为组织工程提供了新的来源丰富、提取方便的种子细胞。

脂肪细胞分化相关转录因子的结构和功能

关于脂肪细胞分化调控的研究主要集中在转录因子的作用上。目前了解得比较清楚的分化转录因子有多种,其中CAAT增强子结合蛋白家族(C/EBPs)中的C/EBPα和过氧化物酶体增殖物激活受体家族(PPARs)中的PPARγ是转录调控中起主要作用的两种因子。两者有各自的结构特点和功能,但在脂肪细胞中它们之间相互协同促进细胞的分化成熟。本文主要就C/EBPs和PPARs家族中主要成员的结构和功能及相互作用进行综述。

脂肪干细胞:细胞治疗的新选择

成体干细胞在组织修复和再生中具有强大的优势并已成为一种新型的细胞治疗肢体缺血性疾病的细胞来源。本文阐述了关于脂肪组织来源的基质细胞(adipose tissue-derived stromal cells,ADSCs)在组织重建细胞治疗上的巨大潜能。ADSC最大优点在于能方便取得而且容易在体外培养。体外培养的ADSCs能够在特定条件下诱导成为成熟脂肪细胞、骨细胞、神经细胞和内皮细胞。ADSCs还能分泌一定数量的与细胞成熟有关的细胞因子。另外,近年有报道ADSC具有向心肌细胞分化的能力。这些脂肪组织来源的基质细胞有望在不久的将来取代骨髓细胞成为再生细胞治疗的重要材料。

结膜松弛症泪液中细胞因子的检测

目的:分析结膜松弛症泪液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的表达量的变化。方法:收集25例结膜松弛症患者和13例正常对照组的泪液样本,毛细管从每眼收集15μL泪液,采用放射免疫测定法测定结膜松弛症组和正常对照组的泪液中TNF-α,IL-6和IL-8的浓度并进行统计学分析。结果:结膜松弛症患者TNF-α浓度为19.05±6.35ng/mL,正常对照组TNF-α浓度为14.13±7.76ng/mL;IL-6浓度为13.16±8.97pg/mL,正常对照组IL-6浓度为4.24±3.97pg/mL;IL-8浓度为34.40±20.73pg/mL,正常对照组IL-8浓度为18.31±11.62pg/mL;两组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:应用放射免疫的方法可检测泪液中的细胞因子含量,结膜松弛症组泪液中三种细胞因子的含量显著增高提示结膜松弛症可能与细胞因子的增加及免疫反应有关。

男性生育力保存需要知道的问题

01.男性生育力与年龄相关吗?孕育新生命,精子是关键。从第一次遗精开始到死亡,男性睾丸内一直都在产生精子,可见男性的“精力”是非常旺盛的。但是,要想顺利和卵子结合,生育健康的后代,不仅需要保证精子的数量和质量,还要考虑到遗传基因。《自然生态与进化》(Nature Ecology&Evolution)刊发的一项研究显示,在包括人类在内的诸多物种中,年长的父亲往往会遗传给后代更多的新发突变。因此,研究人员认为,随着年龄的增长,个体对基因突变的修复能力下降,远不如年轻个体。

女性生育力保存需要知道的问题

1.什么是生育力?什么又是生育力保护?生育力是指男性或女性所具有的生育子女的能力。据统计,女性的生育力自15岁开始,历时30年,高峰年龄在25岁,生育力随年龄增长自然下降,35岁生育力下降50%,38岁减少到25%,40岁以上不足高峰年龄的5%,随着绝经的到来女性生育能力终止。由于生育能力极易受到周围环境的影响,女性生育能力远比理想的生理生育能力低。生育力保护是指对于可能会引起生育力下降的各种因素进行提前预防或早期治疗的方式以达到使得外界环境因素对生育能力影响最小,最大限度地保证生育可能。

第一次减数分裂中期未成熟卵子行卵胞质内单精子注射的受精和胚胎发育分析

目的：探讨超排卵周期中的第一次减数分裂中期（MI期）未成熟卵子行胞质内单精子注射（ICSI）后受精及胚胎的发育潜能。方法：选取46个ICSI周期，收集MI未成熟卵子共64枚，对照组为264枚第二次减数分裂中期（MII期）卵子，行卵胞质内单精子注射后，比较2组的受精率、卵裂率、退化率和优胚形成率。结果：行ICSI后，MI组受精率34．38％，优胚率33．33％，均显著低于MII组受精率81．06％，优胚率95．65％，而卵裂率在2组间无差异，MI组的退化率（15．62％）及异常受精率（36．36％）显著高于MII组的退化率（2．27％）及异常受精率（6．54％）。结论：在常规超排周期中，MI期卵子具有一定的受精能力和卵裂能力，虽然其优胚率显著低于MII组，但其增加了患者的有效胚胎数，并且具有一定的发育潜力。

血清CA72-4、MG-7在胃癌诊断中的意义

为探索血清肿瘤标志物CA72-4、MG-7在胃癌诊断中的意义,本文分别采用电化学发光法和免疫放射分析法(IR-MA)检测血清CA72-4及MG-7在53例胃癌患者、27例其它肿瘤患者、56例良性疾病患者及36名健康人中的含量,分析上述两种指标在胃癌诊断中的意义。结果显示,CA72-4在胃癌组和其它肿瘤组中的阳性率分别为86.8%和88.9%,含量较健康对照组高(P<0.05),但其在良性疾病组和健康对照组中也有一定的检出率(分别为32.1%、19.4%)。MG-7在胃癌组含量同样较健康对照组高(P<0.05),阳性率为52.8%,但MG-7在良性疾病组中检出率很低(3.6%),在健康对照组中无检出。CA72-4与MG-7联合检测在胃癌组和健康对照组中检出率分别为92.5%和19.4%。血清CA72-4、MG-7在胃癌诊断中具有重要作用。

年龄对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的评估年龄因素对不孕女性行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET妊娠结局的影响。方法回顾性分析2016年11月至2017年11月间同济大学附属同济医院生殖医学科因不孕行IVF-ET的665例不孕妇女的1 092个移植治疗周期的临床、实验室和随访资料。将研究对象按年龄分为4组(≤35岁、36～39岁、40～42岁、≥43岁),比较各年龄组妇女在不同基础情况、不同获胚情况的临床妊娠结局,分析各年龄组段妇女使用不同超促排卵方案(长方案、拮抗剂和短方案)和不同移植方式(冻胚和鲜胚移植)行IVF-ET治疗的临床结局。单因素和多因素回归分析研究不孕妇女行IVF-ET治疗临床妊娠结局的影响因素。结果单因素分析发现,女性年龄、窦卵泡计数、基础卵泡刺激素、获卵数、2PN数、卵裂数、优质胚胎数和移植胚胎数均影响临床妊娠结局(P<0.05)。多因素回归模型分析发现年龄(OR=2.232,95%CI:1.315～3.772)是不孕女性行IVF-ET治疗临床妊娠结局的独立风险因素。不同年龄组之间的临床妊娠率、流产率和活产率差异有统计学意义(P<0.05)。高龄女性窦卵泡计数显著降低(P<0.001),基础卵泡刺激素较年轻女性组明显升高(P<0.001)。≥40岁的高育龄妇女获卵数、卵裂数、2PN数、优质胚胎数明显减少。不同年龄组的移植胚胎数差异无统计学意义。使用长方案促排,≥43岁组活产率明显下降,流产率显著升高(P<0.05),但临床妊娠率无差异。拮抗剂方案促排各年龄组临床妊娠结局差异无统计学意义。短方案促排,≥36岁组临床妊娠率、活产率和流产率均显著下降(P<0.05)。年轻女性(≤39岁)新鲜周期的妊娠率高于复苏周期,流产率低于复苏周期,差异有统计学意义(P<0.05),而活产率差异无统计学意义。40～42岁组冻胚移植妊娠成功率和活产率明显高于新鲜周期。结论女性年龄是预测IVF-ET治疗临床妊娠结局的独立影响因素。应用GnRH拮抗剂促排能增加高龄患者IVF-ET治疗临床活产率,降低流产率,

重组pcDNA3.0-FGF10的构建及其转染人间充质干细胞的生物学表达

目的构建成纤维细胞生长因子10(FGF10)的载体pcDNA3.0-FGF10,观察FGF10在体内外的生物学作用。方法人早胚组织总RNA,扩增得到人FGF10cDNA片段并将其插入载体pcDNA3.0中,构建成pcDNA3.0-FGF10重组真核表达载体。将其转染入人胚源间充质干细胞(MSC),得到pcDNA3.0-FGF10-MSC。利用免疫荧光、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western-blot等方法鉴定转染效果。结果成功构建能持续稳定表达目的蛋白FGF10的重组质粒表达载体pcDNA3.0-FGF10-MSC。结论成功构建并转染质粒载体,为观察FGF10在体内外的生物学作用提供了实验工具。

人成熟卵母细胞玻璃化冷冻复苏后行ICSI-ET的妊娠结局

目的回顾性分析卵母细胞玻璃化冷冻复苏后行卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(ICSI-ET)的妊娠结局,为卵母细胞玻璃化冷冻的临床应用提供参考。方法收集2013年5月至2015年1月于我中心行辅助生殖助孕治疗、女方取卵当日无精子可用的6对夫妇为研究对象,收集6例女性的成熟卵母细胞进行玻璃化冷冻,复苏后行ICSI-ET,观察6例患者的卵母细胞复苏率、受精率、卵裂率、临床妊娠率等。结果 6例女性患者的6个取卵周期共获得成熟MⅡ卵母细胞94枚,均行玻璃化冷冻。择期复苏64枚,存活62枚,复苏率为96.8%。行ICSI授精后观察到正常受精卵43枚,卵裂40枚,获得可利用胚胎28枚,优质胚胎19枚,可利用胚胎率和优质胚胎率分别为70.0%和47.5%。鲜胚移植获得临床妊娠3例,孕囊5个;冻融胚胎移植1例,孕囊1个,均足月分娩,新生儿状况及Apgar评分良好。结论玻璃化冷冻卵母细胞技术可以在有适应证的患者中应用,并可获得较好的临床妊娠结局。但仍需更大样本量的临床研究予以验证。

冷冻胚胎复苏后发育情况与妊娠结局的关系

目的观察冷冻胚胎复苏并过夜培养后的卵裂球增殖情况与临床妊娠结局的关系。方法回顾性分析2015年1月—2016年12月在同济大学附属同济医院生殖医学中心行冷冻胚胎复苏培养后移植的周期991例,按照复苏胚胎过夜培养后卵裂球增殖与否及增殖比例进行研究。依据移植的2枚胚胎是否增殖分为2枚增殖(S2)、1枚增殖(S1)及2枚均未增殖(S0)三组;在S2中,再根据卵裂球增殖比率分为a:增殖形成桑葚胚或早期囊胚;b:卵裂球增殖率≥50%;c:50%>卵裂球增殖率≥25%;d:卵裂球增殖率<25%,进一步分为A(aa、ab、ac、ad)、B(bb、bc、bd)和C(cc、cd、dd)三个区段共10组,统计各组临床妊娠率、流产率等指标。结果 S2、S1、S0三组临床妊娠率分别为46.41%、23.08%及12%,差异有统计学意义(P<0.05);A、B、C各区段的临床妊娠率分别为59.77%、47.43%及24.43%,差异有统计学意义(P<0.05);在各区段中,随着其中一枚胚胎的增殖比率下降,妊娠率均有不同程度降低。结论冷冻胚胎复苏后过夜培养,选择移植进一步发育的胚胎具有更好的妊娠结局。

不同年龄不孕患者卵泡液中CFTR水平与卵子及胚胎发育结局的关系

目的探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)在不同年龄不孕患者卵泡液中表达的变化与卵子及胚胎发育结局的相关性。方法采用全自动电化学发光仪测定血清中卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH),黄体生成素(luteotropic hormone,LH),雌二醇(estradiol,E2),孕激素(progesterone,P)水平;采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定卵泡液中CFTR的浓度;收集取卵日卵丘颗粒细胞,采用间接免疫荧光染色法检测卵丘颗粒细胞上CFTR蛋白的定位及表达; Real-time PCR测定卵丘颗粒细胞CFTR mRNA的表达。结果 CFTR在不同年龄段不孕患者卵泡液中均有表达,不同年龄段患者卵泡液中CFTR浓度差异有统计学意义(P<0. 05),卵泡液中CFTR水平与年龄呈明显正相关(r=0. 497,P<0. 05)。不同年龄组胚胎培养结局中获卵数和优质胚胎率与卵泡液中CFTR含量呈反比。不同年龄组胚胎培养结局中2PN形成率与卵泡液中CFTR含量呈正比。免疫荧光染色表明颗粒细胞胞浆和胞膜上均有CFTR蛋白的表达。不同年龄患者的卵丘颗粒细胞上均有一定量的CFTR mRNA表达;不同年龄患者卵丘颗粒细胞中CFTR mRNA表达与年龄呈正相关(r=0. 440)。不同年龄可用胚胎率与CFTR mRNA表达量呈反比趋势。结论 CFTR可能参与人卵泡正常生长的调控,与不孕患者年龄有密切的相关性,直接影响获卵数、2PN形成率、优质胚胎率等卵子及胚胎的发育结局,CFTR有可能作为预测体外受精患者卵子及胚胎发育结局的一种无创、定量的标记分子。

辅助生殖技术中低出生体质量儿相关风险因素及CFTR/HLA-G相关性分析

目的探讨辅助生殖技术中低出生体质量(low birth weight, LBW)儿的相关风险因素及其影响机制。方法回顾性分析2014年3月—2016年12月在同济大学附属同济医院生殖医学科接受辅助生殖技术助孕分娩的患者,用EXCEL软件建立数据库,计算机录入资料并整理数据后,采用χ 2检验及多因素Logistic回归分析等方法,探讨影响辅助生殖技术子代中LBW儿发生的危险因素及其影响机制。结果女方免疫性不孕(OR=0.31)、男方少弱精(OR=2.843)、轻度子痫前期(OR=2.438)、妊娠期肝内胆汁淤积症(OR=0.478)、双胎(OR=1.728)、胎膜早破(OR=0.351)、短方案(OR=0.608)、分娩孕周(<37周,OR=5.018),均与LBW相关(P<0.05)。HCG日低雌激素组(E 2<3 000 pg/mL)的新生儿出生体质量高于高雌激素组(E 2>3 000 pg/mL);鲜胚组新生儿体质量低于冻胚组;自然妊娠组新生儿体质量高于鲜胚和冻胚组;差异均有统计学意义(P<0.05)。新鲜周期妊娠组卵泡液中囊性纤维化跨膜转导调节因子(cystic fibrosis transmebrane conductance regulator, CFTR)浓度和新生儿体质量呈负相关,可溶性人白细胞抗原-G(sduble human lecucocyte antigen G, sHLA-G)浓度和新生儿体质量呈正相关。结论女方免疫性不孕、男方少弱精症、轻度子痫前期、妊娠期胆汁淤积症、双胎、胎膜早破、短方案、分娩孕周(<37周)均与辅助生殖子代LBW密切相关。HCG日雌激素水平低于3 000 pg/mL的新生儿体质量较高。卵泡液中适宜的CFTR和sHLA-G水平是影响ART新生儿体质量的重要因素。

PCOS患者卵泡液外泌体miRNA谱差异表达及生物信息学分析

目的检测多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡液外泌体微小RNA(miRNA)的表达差异,探究其成为胚胎质量相关的潜在生物标志物的可能性。方法收集2017年9月至2018年2月在同济大学附属同济医院生殖医学中心接受卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕的女性不孕症患者[包括12例PCOS患者(PCOS组)和12例卵巢功能正常的不孕症患者(对照组)]的卵泡液。依据D3胚胎质量将两组卵泡分为优胚组(PCOS-1,n=11;对照-1,n=15)和非优胚组(PCOS-2,n=11;对照-2,n=15),将对应卵泡液等量混合形成4个25 ml卵泡液池。利用试剂盒提取卵泡液外泌体,使用Illumina HiSeq 2500平台检测外泌体miRNA表达量,构建miRNA差异表达谱。利用生物信息学方法(miRanda、miRDB和miRTarBase软件和KOBAS数据库)预测差异miRNA的靶基因,再对靶基因进行GO功能注释和KEGG通路分析;利用Cytoscape_v3.8.2软件进行互作网络分析并计算网络及各个节点的拓扑特性。结果(1)与优胚组相比,非优胚组有9个显著差异表达的外泌体miRNA,其中7个表达上调,2个表达下调(P<0.05且|-log2(Fold Change)|≥1)。预测靶基因后采用GO和KEGG、Cytoscape_v3.8.2分析发现,hsa-miR-200a-3p、hsa-miR-141-3p共同调控靶基因,主要富集在P13K-Akt、调节干细胞多能性信号通路,涉及蛋白结合、核酸结合等分子功能。(2)与PCOS-1组相比,PCOS-2组有120个显著差异表达的外泌体miRNA,其中57个表达上调,63个表达下调(P<0.01且|-log2(Fold Change)|≥2)。预测靶基因后采用GO和KEGG、Cytoscape_v3.8.2分析发现,hsa-miR-26b-5p、hsa-miR-483-5p、hsa-miR-218-5p、hsa-miR-320b、hsa-miR-320c等关键miRNA调控靶基因,主要富集在MAPK、P13K-Akt、FoxO、FAK、mTOR、Ras/MAPK胰岛素信号通路、AGE-RAGE信号通路以及癌症、细胞周期等信号通路,参与细胞代谢调控、细胞大分子代谢、细胞调控等生物过程,涉及离子结合、DNA结合、酶活性等分子功能。结论筛选所得的核心外泌体miRNA可能影响PCOS患者胚胎发育的过程,有可能成为预测胚胎质量的生物标志物。

基质金属蛋白酶在结膜松弛症球结膜组织中的表达

结膜松弛症是一种年龄相关性老年人常见眼病。随着人口老龄化加快，结膜松弛症患病人群日趋增多。结膜松弛症患者常主诉眼部干涩、异物感、泪溢，严重病例伴有刺痛、灼痛感，影响眼视觉和生活质量。结膜松弛症发病机制研究表明球结膜成纤维细胞功能发生改变，

左卡尼汀联合他莫昔芬治疗少弱精症的观察

分析少弱精症采取左卡尼汀联合他莫昔芬治疗后的效果分析。方法 选择我院近2年(2019年1月到2021年1月)住院收治的150例少弱精症患者,按照随机数表方式分组,对照组75例采取他莫昔芬单独治疗;观察组75例在对照组基础上联合左卡尼汀结合治疗。分析对照组(75例,他莫昔芬单独治疗)和观察组(75例,他莫昔芬单独治疗联合左卡尼汀结合治疗)治疗后的效果。结果 观察组治疗后精液参数、性激素水平均明显增高,治疗后总有效率更高,QOL评分更高,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 少弱精症采取左卡尼汀联合他莫昔芬治疗能够改善精液质量,提高性激素水平,临床取得切实疗效,有较高的应用价值。