关于吖啶橙测定溶酶体H^＋—ATPase转运H^＋的研究

揭示了吖啶橙的吸收光谱和荧光光谱对其浓度依赖性上的区域性特征，分析了测定溶酶体Ｈ￣＋转运时合理选用吖啶橙浓度及溶酶体用量的重要性、机理和原则，探讨了其与溶酶体的温育时间和Ｋ￣＋／Ｈ￣＋交换对测定Ｈ￣＋转运的明显影响。

Merocyanine 540对亚线粒体能量化过程膜电位变化的荧光响应

研究了Ｍｅｒｏｃｙａｎｉｎｅ５４０对亚线粒体能量化过程膜电位变化的荧光响应的“ｏｎ－ｏｆｆ”机制，揭示了其快、慢双相反应的特征，探讨了该荧光响应的影响因素，如膜结合二聚体对膜上单体荧光的猝灭，探针与膜的相对浓度以及激发波长的影响。

原卟啉(PP)的光敏作用——Ⅰ.Ⅰ型和Ⅱ型反应机制的ESR研究

卟啉类光敏剂,即血卟啉衍生物(HPD),作为临床诊治恶性肿瘤的有效光敏药物,已引起很大重视.其中,美国的Photofrin Ⅱ和中国的扬州光卟啉(YHPD)的光敏损伤作用都优于HPD,但它们所含的几种卟啉组分的百分含量差别却很大.这就提出,何种卟啉组分为有效组分,而哪种又最有效?有效或无效的原因又何在?为此,国际光化学界和医药界近十年来一直在探讨卟啉组分的化学结构、生物活性、光敏特性和作用机制.

DHE阴离子自由基的生成与氧浓度关系的ESR研究

由于肿瘤的乏氧状态不利于光敏杀伤癌细胞的~1O_2和·OH的生成,因此Moan等学者提出的光敏剂阴离子自由基对癌细胞可能有损伤作用的观点就很有意义。要探讨上述作用的机制,首先要搞清阴离子基的生成与氧的关系,为此,本文用ESR方法研究了卟啉类光敏药物Photofrin Ⅱ等的有效成分Dihematoporphyrin ether(DHE)的阴离子基DHE^(?)的生成与[O_2]的关系。结果表明,空气饱和条件DHE光敏反应生成~1O_2的同时还伴有DHE^(?)

卟啉类光敏药物(HPD)的组分HP,PP和DHE光敏反应特性的ESR研究

用ESR方法,比较了HP,PP和DHE的光敏反应特性。结果表明,3种组分均可产生~1O_2,O_2^-,·OH和光敏剂阴离子基。几种浓度的3种组分生成上述活性物质的速率均呈现出HP>DHE>PP;而生成~1O_2和O_2^(?)的持续时间,HP短于DHE和PP;持续光照后,3种组分光敏反应生成的~1O_2和O_2^(?)的程度相近。在O_2^(?)转换生成·OH上,PP主要经Fenton反应途径,而HP和DHE则经Haber-Weiss和Fenton反应两种途径,其中以Fenton反应为主。经测定,氮氧自由基4-Oxo-TEMPO的ESR线宽变化,证明在光敏反应中的耗氧速率上,HP>DHE>PP。文中还结合Ⅰ型和Ⅱ型反应的原理,探讨了3种组分产生上述活性物质的光敏反应机制。

单重态氧、羟自由基和过氧化氢对溶酶体H^+-ATPase功能的损伤作用

溶酶体是个重要的细胞器,执行着诸如分解细胞吞噬异物的水解老化的细胞结构、使死细胞自溶等防御和代谢功能.其数十种水解酶必须在弱酸性的内环境中才能发挥上述作用.溶酶体内部比胞浆的pH低2—3个单位,维持这种跨膜H^+梯度是靠其膜上的H^+-ATPase向内转运H^+,该酶受损伤将导致溶酶体功能紊乱并影响整个细胞.

核黄素光敏反应对溶酶体H^+-ATPase产电性的影响

溶酶体是执行多种代谢和防御功能的细胞器.以往自由基医学领域对溶酶体的研究集中于活性氧对其膜的脂质过氧化作用及该损伤是否可导致细胞死亡,未注意对其膜H^+-ATPase损伤的研究.该H^+泵维持溶酶体内的弱酸性,其所具有的产电性(electrogenicity)可增强膜的渗透稳定性,还可促进把蛋白质降解生成的胱氨酸转运出溶酶体,我们认为,对该H^+-ATPase的光敏损伤值得重视,因此研究了几种活性氧对该H^+-ATPase转运H^+功能的损伤作用,本文揭示了核黄素光敏反应中~1O_2和氧自由基对该酶产电性的破坏.

原卟啉(PP)的光敏作用——Ⅱ.PP~后继反应引发的活性氧自由基形式

卟啉类光敏剂,即血卟啉衍生物(HPD),作为诊治恶性肿瘤的有效光敏药物,虽已多年,但其光敏作用机制,仍有分歧。HPD的哪些组分起主要作用,其机制又是什么,至今未成定论。本文以HPD、Photofrin Ⅱ和扬州光卟啉主要组分之一的PP为对象。

Merocyanine 540对溶酶体H^+-ATPase转运H^+过程中膜电位变化的光谱响应

Merocyanine 540是一种带负电的荧光探针,曾用于测定神经轴突的动作电位及支原体和线粒体的膜电位变化,也可用于研究膜脂的堆积程度,Merocyanine 540又是一种光敏剂,常用于光化学和光生物学的研究.以往测定溶酶体的膜电位变化主要是用carbocyanine类阳离子型荧光探针diS-C_3-(5)和oxonols类阴离子型荧光探针Oxonol VI,本文是探讨Merocyanine 540对溶酶体膜电位变化的光谱响应及其“on-off”机制,并讨论了用“null point＂法进行校正的问题.

竹红菌甲素激发态结构——激基缔合物和激基复合物

竹红菌甲素(Hypocrellin A,简称HA)是我国首先发现并应用的一种高效光敏剂,并已用来治疗某些顽固性皮肤病.它是从天然资源中分离的一种苝醌颊衍生物(分子式C_(30)H_(26)_O_(10)).作为外源醌,它有可能发展成为一种抗癌药物.关于HA激发态特征已有一些报道.众所周知,激基缔合物的光谱特征是在激发态单体荧光峰的红侧有一个新的,依浓度而变化的无振动结构的宽峰,但由于在极稀HA溶液中,

Merocyanine 540对亚线粒体能量化过程膜电位变化的吸收光谱响应的on-off机制

Merocyanine 540是一种多用途的荧光染料,可反映膜脂的堆集程度,作细胞染色,进行光敏反应,还可测定膜电位.carbocyanine阳离子型和oxonol阴离子型两类最常用的膜电位探针,但它们对线粒体的氧化磷酸化抑制较大,Rhodamine 123常用于测定线粒体膜电位,但较亲水,不易通过膜,因而不能对膜电位变化作出快速可逆的反应,而Merocyanine 540对线粒体抑制作用很小,而且反应快、信噪比大,因此宜用于测定线粒体和亚线粒体的膜电位.

Photosensitization of Protoporphyrin——ESR Research on Type Ⅰ and Type Ⅱ Reaction Mechanisms

More attention has been paid to hematoporphyrin derivative (HPD), an useful porphyrin photosensitizer used in tumor detection and treatment.Although the photosensitization of Photofrin Ⅱ and YHPD made in China is higher than that of HPD, the percentages of some of their porphyrin components are greatly different. This raises questions. Which porphyrin component is active? Why is it active? International photochemical and medical scientists have been discussing the chemical structure,