铜仁缬草不同部位药效成分的质量研究

建立铜仁宽叶缬草的质量标准研究。方法:在500 nm波长处采用紫外-可见分光光度法对铜仁宽叶缬草药材中总黄酮进行含量测定。结果标准曲线的回归方程为y=10.6736x+0.0024(r=0.999935,n=5)。结果表明,芦丁进样量在0.008~0.056 mg范围内与吸光度呈良好的线性关系;精密度试验,结果,RSD=0.0011%(n=5),表明仪器精密度良好;稳定性试验,结果,RSD=0.0026%(n=6),表明供试品溶液在120 min内稳定性良好;重复性试验,结果,样品中芦丁的平均质量分数为0.71%,RSD=0.13%(n=6),表明本方法重复性良好;加样回收率试验,结果,RSD=1.66%(n=6)。结论:本方法能准确反映铜仁宽叶缬草不同部位中总黄酮的含量,作为参考只有在符合宽叶缬草叶子、茎部、根部样品中芦丁的平均质量分数分别在11.59%、0.98%、0.71%以上才符合铜仁宽叶缬草的质量要求;本实验在实现资源利用充分的同时,其总黄酮的质量要求范围为铜仁宽叶缬草的质量标准提供了一定的参考价值。

慢性髓系白血病疾病进展相关基因的生物信息学分析与初步实验验证

本研究探讨慢性髓系白血病(CML)的疾病进展机制,为该疾病临床转归的评估及治疗选择提供新的分子标志物。从NCBI数据库GEO下载一组与CML疾病进展相关的基因芯片数据,利用生物信息学工具分析并得到与加速期(AP)和急变期(BC)相关的基因集,将这两组基因集进行信号通路分析和网络图谱分析得到与进展相关的关键基因和信号通路,并应用荧光定量PCR方法对其中的关键基因进行初步实验验证。结果表明,将AP相关基因和BC相关基因交叉比较,得到在AP和BC都有异常表达的9个基因;信号通路分析发现,整合素介导的细胞黏附,黏着斑细胞粘附以及细胞骨架调节在AP和BC始终发生异常;网络构建分析发现,关键节点的基因分别是MLLT4,WDR35和EPHB4。应用荧光定量PCR方法对疾病进展期和慢性期的患者进行比较发现,EPHB4在进展期的表达水平显著高于慢性期。结论:发现了与CML进展相关的9个基因,其中MLLT4,WDR35,EPHB4基因可能是导致CML进展的关键基因。

融合基因Tat-HPV16L1的克隆及在大肠杆菌中的表达

目的:构建人乳头瘤病毒16型L1基因和蛋白转导肽基因Tat的融合表达载体,以大肠杆菌作为表达系统,探索制备经济而高效的人乳头瘤病毒疫苗的新方法。方法:以pBR322-HPV16质粒为模板扩增L1基因,与原核表达载体pET28a连接,重组质粒再与自行设计蛋白转导功能片段Tat连接,经测序鉴定后转入大肠杆菌表达菌株DE3进行诱导表达Tat-HPV16L1融合蛋白。结果:融合基因Tat-HPV16L1测序结果与预期完全符合,经过IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳分析,结果诱导表达成功。结论:本研究为制备经济而高效的人乳头瘤病毒疫苗打下了基础。

hnRNP K调控细胞自噬参与急性髓系白血病阿霉素耐药研究

目的:探索核内不均一的核糖核蛋白K(hnRNP K)调控细胞自噬参与急性髓系白血病耐药机制,为白血病治疗提供新的分子标志物。方法:应用荧光定量PCR技术,分别从临床标本及细胞株水平验证hnRNP K与髓系白血病耐药的关系;利用RNA干扰技术调节hnRNP K的表达水平,Western blot方法检测细胞自噬相关蛋白LC3I/Ⅱ表达变化,并进一步检测hnRNP K调控前后细胞对化疗药物(阿霉素)的敏感性。结果:在骨髓未缓解及复发的原代细胞及耐药细胞株中,hnRNP K的表达水平明显增高,而细胞自噬相关蛋白LC3I/Ⅱ表达水平也明显升高,将hnRNP K的表达水平降低后,LC3I/Ⅱ蛋白水平亦降低,而细胞对于阿霉素的敏感性可以恢复。结论:hnRNP K可能通过调控细胞自噬参与急性髓系白血病阿霉素耐药的形成。

hnRNPK/Beclin1信号异常对Ph^(+)白血病伊马替尼耐药的影响

目的:探索hnRNPK/Beclin1信号异常与Ph^(+)白血病伊马替尼耐药的相关性。方法:用WB法检测hnRNPK在伊马替尼敏感和耐药细胞株中的表达水平差异。RNAi法沉默hnRNPK在耐药株中的表达水平。在hnRNPK表达调变前后,分别使用CCK-8法检测耐药细胞株对伊马替尼药物敏感性的变化,以及使用WB法检测自噬蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ及Beclin1的表达水平变化。结果:hnRNPK在伊马替尼耐药细胞株中的表达水平较敏感株明显增高,使用RNAi法降低hnRNPK的表达水平后,耐药株对伊马替尼的敏感性可以部分恢复,且自噬相关蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ及Beclin1的表达与hnRNPK的表达变化一致。结论:hnRNPK/Beclin1信号异常调控细胞自噬,进而参与Ph^(+)白血病伊马替尼耐药。

乙酰谷氨酰胺锌抗实验性胃溃疡的作用研究

目的 研究新化合物乙酰谷氨酰胺锌 (Zn GL)对大鼠实验性胃溃疡的防治作用及机制。方法 分别采用大鼠水浸应激性胃溃疡 ,无水乙醇、吲哚美辛和慢性醋酸诱导的胃溃疡为实验模型。以胃黏膜损伤程度 ,溃疡指数及胃壁结合黏液含量为观察指标。结果 1 0 0或 1 50mg·kg- 1Zn GL灌胃给药对 4种大鼠急慢性胃黏膜损伤均有明显的预防或治疗作用 ,胃溃疡指数显著降低 ,胃液分析显示该化合物能显著升高胃壁结合黏液含量 ,光镜下观察未见胃黏膜组织炎性细胞浸润。结论 该化合物具有较强的抗溃疡作用 ,这一作用依赖于内源性的PGE2 ,并与加强胃黏液屏障防御功能 ,促进溃疡愈合有关。

八探针荧光原位杂交技术在急性髓系白血病诊断中的应用

目的探讨八探针间期荧光原位杂交技术(FISH)在检测急性髓系白血病(AML)常见细胞遗传学异常中的价值。方法采用八探针FISH系统,即以针对AML1/ETO融合基因、PML-RARα融合基因、CBFβ/MYH11融合基因、MLL基因、P53基因、De(l5q)、-7/Del(7q)、Del(20q)八种DNA探针对40例AML患者细胞遗传学异常进行检测,并与常规G显带核型分析技术相比较。结果 40例AML中,共22例多探针FISH检出了细胞遗传学改变,总阳性率为57.50%,包括:AML1/ETO融合基因、PML-RARα融合基因、MLL基因断裂重排、Del(5q)、-7/Del(7q)、P53基因缺失、8号染色体三体7种细胞遗传学异常。而常规G显带核型分析技术(CCG)对于相对应的遗传学异常仅检出8例,另检出3例八探针FISH不能检出的异常,总阳性率为27.50%。结论 FISH八探针诊断技术较常规G显带核型分析技术具有省时、准确、高效等优点,可作为急性髓系白血病临床诊断的一个重要手段。

人工蛹虫草子实体对小鼠免疫功能的影响

目的考察人工蛹虫草子实体对小鼠免疫功能的影响。方法采用蛹虫草子实体微粉（粒径17～20μm）水溶液给小鼠连续灌胃12d，分别观察对小鼠脾淋巴细胞转化、血清溶血素水平和2，4-二硝基氟苯（DNFB）诱导小鼠迟发型变态反应的影响。结果小鼠灌胃给予蛹虫草子实体微粉水溶液10～90mg·kg^-1，可显著促进淋巴细胞的自然增殖作用（与阴性对照组比较，P〈0．05），但对刀豆蛋白（ConA）或脂多糖（LPS）活化后的细胞无协同作用，同时增加血清溶血素水平，能增强DNFB诱导的小鼠迟发型变态反应，但对小鼠胸腺指数和脾脏指数无明显影响。结论人工蛹虫草子实体的微粉具有免疫调节作用。

TGF-β1/Smad4在乳腺癌细胞中的表达及意义

目的:探讨TGF-β1/Smad4信号通路与乳腺癌发生发展的关系。方法:采用荧光定量PCR技术、免疫组织化学技术对30例乳腺癌临床标本及恶性程度不同的乳腺癌细胞株中TGF-β1及Smad4的表达情况进行检测。结果:TGF-β1和Smad4mRNA表达及蛋白表达随着乳腺癌细胞恶性程度增加而逐步下降。结论:TGF-β1/Smad4信号通路参与了乳腺癌的发生、发展过程,TGF-β1/Smad4信号通路可能在乳腺癌演变中起抑制作用,与乳腺癌的恶性程度呈负相关。

国产尼美舒利的药效学研究

本文研究了国产尼美舒利在小鼠、大鼠及家兔体内的抗炎、镇痛和解热作用.结果表明.尼美舒利抑制巴豆油致小鼠耳廓肿胀(ED_(50)为49.2mg·kg^(-1));抑制角叉菜胶致大鼠足肿(ED_(50)为2.75mg·kg(-1));0.6mg·kg^(-1)剂量对大鼠佐剂关节炎有显著预防和治疗作用。100mg·kg^(-1)对小鼠醋酸扭体法的抑制率为68％;对热板法致痛的痛阈提高率为55％。ip给药对蛋白胨致家兔发热的解热作用.其最小有效剂量为2mg·kg^(-1);5mg·kg^(-1)ig可显著降低啤酒酵母致大鼠升高的体温.证实国产尼美舒利具有很强的抗炎、镇痛和解热作用。

金叶败毒冲剂的解热抗炎作用

金叶败毒冲剂（ＪＹ）具有一定的解热作用和抗炎作用。４．４ｇ／ｋｇ剂量给药一次可显著降低内毒素（ＬＰＳ）引起的家兔发热；７．４ｇ／ｋｇ能降低啤酒酵母诱发发热大鼠的体温。１０．５ｇ／ｋｇｂｉｄ连续５天，对角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀有显著抑制作用，６．５ｇ／ｋｇ能显著抑制组织胺引起的大鼠皮肤毛细血管通透性增高，对巴豆油致小鼠耳廓肿胀模型无抑制作用。

慢性髓系白血病急变期差异表达基因的筛选

目的筛选慢性髓系白血病急性变相关关键基因,探寻疾病进展机制及潜在的生物标志物。方法应用基因芯片技术筛选与慢性髓系白血病急变期相关基因,采用生物信息学方法对这些差异表达基因进行基因本体分类,亚细胞定位以及组织选择性分析,结合转录因子预测和网络谱图构建,找出差异表达基因中的关键分子并进行初步验证。结果得到一组定位于白细胞膜的基因集,在整个调控网络中,CD40、CCR3、LGALS3、RGS3、CEACAM3及转录因子RAC1、CTNNB1、TP53、NF-kB处于网络节点位置,可能是疾病进展的关键调控基因,采用RT-PCR方法初步证实CEACAM3、RGS3、CTNNB1和RAC1在急变期患者表达显著增高。结论 CEACAM3、RGS3、CTNNB1和RAC1可能是慢性髓系白血病由慢性期向急变期转变的关键基因和生物标志物。

TMEP对肾上腺素受体的阻断作用

采用离体和在体标本研究新化合物 TMEP即 ( 1- (萘满酮 - 5 -氧基 ) - 3 - [2 - ( 2 -甲氧基苯氧基 )乙胺基 ]- 2 -丙醇盐酸盐 )对肾上腺素受体的阻断作用。结果发现 ,TMEP可使激动剂的量效曲线平行右移 ,最大反应不降低。阻断α1 受体的 PA2 为 7.4 6± 0 .2 0 ( n=8) ;阻断 β1受体的 PA2 值为 7.11± 0 .2 7( n=8)。可呈剂量依赖性地使异丙肾上腺素诱发家兔心率加快的量效曲线右移 ,同时降低血压。证明 TMEP是一竞争性 α1 和 β1 肾上腺素受体的阻断剂。

多探针荧光原位杂交检测急性髓系白血病常见细胞遗传学异常

目的:评价多探针荧光原位杂交(FISH)在检测急性髓系白血病(AML)常见细胞遗传学异常中的价值,探讨细胞遗传学异常与临床诊断、治疗、预后的关系。方法:采用针对AML/MDS的FISH多探针诊断系统,即以针对AML1/ETO融合基因、PML-RARα融合基因、CBFβ/MYH11融合基因、MLL基因、P53基因、Del(5q)、Del(7q)、Del(20q)8种DNA探针对40例患者进行多探针FISH检测,同时联合染色体核型、临床资料进行研究。结果:40例AML中,共22例多探针FISH检出了细胞遗传学改变,包括:AML1/ETO、PML-RARα、MLL基因断裂重排、Del(5q)、Del(7q)、P53基因缺失、8号染色体三体7种细胞遗传学异常。而常规染色体核型分析仅检出11例遗传学异常。多探针FISH与染色体核型分析的总阳性率分别为57.50%及27.50%。AML1/ETO、PML/RARα阳性者首次诱导化疗效果较理想;而Del(7q)、MLL基因断裂重排阳性、伴复杂细胞遗传学改变者可能预示不良预后。结论:FISH多探针诊断系统检测AML患者常见遗传学异常更省时、准确、高效,有利于完善白血病的分层诊断及指导临床个体化治疗。

β肾上腺素受体阻断剂TMEP的降压作用

观察了化合物 1- (萘满酮 - 5 -氧基 ) - 3- [2 - (2 -甲氧基苯氧基 )乙胺基 ]- 2 -丙醇盐酸盐 (TMEP)对麻醉家兔、大鼠及清醒肾性高血压大鼠的降压作用 ,以探讨其作为抗高血压药物的有效性和应用前景。结果发现 ,给予 TMEP可使麻醉动物的平均动脉压呈剂量依赖性下降 ,持续时间与剂量相关。i.g给予 3种剂量 (0 .8、1.6和 3.2 mg/ kg) TMEP1h后使清醒肾性高血压大鼠的收缩压和舒张压显著下降 ,且对舒张压的作用强于收缩压 ,各剂量组与给药前比较有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ,血压降低后心率无显著变化 (P>0 .0 5 )。结果显示 ,TMEP是一口服吸收好 ,起效快。

人类牙髓干细胞体外诱导多向分化潜能研究进展

人体牙髓干细胞主要包括成人恒牙牙髓干细胞(hDPSCs)和儿童乳牙牙髓干细胞,它们均是源自人体牙髓组织的一类归属间充质干细胞特性的、具有高度增殖能力与多向分化潜能的成体干细胞.因其来源丰富、获取方便,作为未来组织工程领域的候选种子细胞备受重视和关注.继研究发现牙髓干细胞有形成牙本质样结构的特性后,越来越多的体内外实验证实,在体外特定诱导培养条件下牙髓干细胞还可向骨、软骨、脂肪、神经、血管、肌肉、黏膜上皮等方向分化,且具备其相应的组织生物学特征,并已逐渐被证实牙髓干细胞在抗衰老医学、组织工程及再生医学领域有着广阔应用前景.本文将围绕近年来学者对人体牙髓干细胞的多向分化潜能及其研究机制、应用进展进行综述.

浅析企业人力资源管理中激励机制的问题与对策

激励机制是企业人力资源管理的重要手段，但往往也是企业管理的薄弱环节。特别是中小企业，员工常常因为得不到应有的激励，不愿为实现企业目标做出最大的努力。本文先是指出激励机制在人力资源管理中发挥的重要作用，然后客观分析了激励机制存在的主要问题，最后对企业管理者如何选择和运用激励机制提出了几点建议。

铁道罐车用双金属合金板材研制

研究了铁道罐车用双金属合金热轧板材的性能,以及退火温度和退火时间对22mm厚双金属板材组织和性能的影响规律,确定双金属板材的退火工艺:340～380℃/1h。