科研型研究生实验经费的管理

作为一个开放、大型、综合科研实验室,每年要接受医院内外近百名研究生进行课题实验工作。几年来,通过不断完善和建立各项管理规章制度,尤其在对研究生科研实验进行了合理收费,合理安排研究生之间使用实验用品后,使有限的科研经费发挥了较大效能。

风湿病多肽抗体谱测定意义的评价

风湿病多肽抗体谱测定意义的评价０５００５１河北医学院附属第三医院检验科张进贵，庞英，贾秀芹内一科王金凯，尹乃宁风湿性疾病是一种常见病和多发病。本文采用风湿病多肽抗体谱印迹薄膜试剂，对六种常见的风湿性疾病七种自身抗体进行了检测，结果显示对疾病鉴别有一定...

脑动脉狭窄与同型半胱氨酸和MTHFR基因多态性的关系

目的探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)和5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)两个常见突变位点与脑动脉狭窄的关系。方法选择年龄、性别匹配的病例组80例,对照组55例,采用荧光偏振免疫法(FPIA)测定血浆Hcy水平,聚合酶链反应-限制片段长度多态性(PCR-RFLP)技术进行基因分型。结果病例组和对照组血浆Hcy水平分别为17.18μmol/L和12.54μmol/L,差别显著(P<0.05)。血浆Hcy水平与血管狭窄数目无关。两组MTHFR677TT及T等位基因频率差异均显著(P<0.05),1298AC/CC及C等位基因频率、677CT/1298AC频率均无显著差异。各组内677TT Hcy水平显著高于677CT或677CC型,A1298C突变对Hcy水平无明显影响。结论677TT突变可引起血浆Hcy水平显著升高,与脑动脉狭窄密切相关。A1298C突变对血浆Hcy水平及脑动脉狭窄无显著影响。

轮状病毒肠炎患儿血清和大便白细胞介素8的检测及意义

采用双抗体夹心ELISA法检测40例RV肠炎患儿及30例同龄健康儿童血清和大便IL-8的水平。结果:RV肠炎急性期血清和大便IL-8水平显著高于正常对照组(P<0.01),恢复期血清IL-8已降至正常,而大便IL-8水平仍高于正常对照组(P<0.05)。急性期血清和大便IL-8水平在中重症组显著高于轻症组(P<0.01)。提示:IL-8作为重要的炎症介质参与了RV肠炎的发病机制,急性期血清和大便IL-8水平与RV肠炎病情轻重密切相关。

ACE基因插入缺失多态性与糖尿病肾病病情发展的关系

目的：探讨非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）肾病（ＤＮ）病情进展与血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因插入缺失（ＩＤ）多态性的关系。方法：用ＰＣＲ方法分别检测了９２例不同程度蛋白尿的ＮＩＤＤＭ患者的ＡＣＥ基因型。结果：随着ＤＮ蛋白尿程度加重，ＤＤ型频率逐渐增高（微白蛋白尿期１７％，显性蛋白尿期２５％，肾功能不全期４６％），而ＩＩ型频率逐渐下降（在３组分别为３３％、２９％和８％），ＤＩ型在３组分布无显著性差异；在肾功能不全期组，ＤＤ型频率（４６％）显著高于肾功能正常期组（２０％），Ｉ型频率（８％）显著低于肾功能正常期组（３２％），ＤＩ型频率在２组无显著性差异。结论：ＤＤ型ＮＩＤＤＭ患者发生ＤＮ后，病情进展较快，ＤＤ型是ＤＮ恶化的促进因素；ＩＩ型为保护性因素。

河北地区非胰岛素依赖型糖尿病患者冠心病与血管紧张素转换酶基因多态性的关系

目的研究血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与非胰岛素依赖型糖尿病并发冠心病的关系。方法应用ＰＣＲ方法分析１４９例患者及１００例正常对照的ＡＣＥ基因型。结果①ＡＣＥ基因型及等位基因构成比，正常对照组与患者组差异无统计学意义；②ＤＤ型及Ｄ等位基因频率并发冠心病组显著高于无冠心病组（Ｐ＜０．０１）。

狂犬病疫苗皮内接种一次作为基础免疫的效果观察

狂犬病疫苗皮内接种一次作为基础免疫的效果观察杨裕华，张进贵，黄捷通，刘传新，陶小润，陈伟迄今为止，用现行的组织培养疫苗对暴露于狂犬病毒者进行免疫预防均报告在疫苗接种后仍有发病的情况［１，２］。我国自八十年代开始用地鼠肾组织细胞狂犬病疫苗（ＰＨＫＣＶ）...

大鼠剑突软骨细胞的体外分离与培养

目的探讨大鼠剑突软骨细胞的培养方法，以及多聚2一羟乙基甲基丙烯酸脂（poly-2-hydroxyethylmethacrylate，poly-HEMA）在培养过程中对软骨细胞生物学特性的影响。方法无菌条件下取Wistar大鼠的剑突。用剪刀将其剪成1mm。大小，加入0．25o．4的胰酶消化30min，然后用0．15％的胶原Ⅱ消化3～5h。将分离得到的细胞分别接种在预先用poly-HEMA包被的平皿和普通的平皿内，并将普通平皿的细胞进行差速贴壁。通过形态学及甲苯胺蓝染色对细胞进行鉴定。结果①从剑突软骨可获得大量软骨细胞，每克软骨可获得软骨细胞（3．1±0．5）×10^7个细胞，活性率为（95．2±0．3）％。②在普通平皿内经过两次差速贴壁得到的软骨细胞较纯，甲苯胺蓝染色阳性率达90％。③软骨细胞在poly-HEMA包被的平皿内始终悬浮生长，且能长期保持软骨细胞的特性。结论从剑突获得大量软骨细胞的方法是可行的，poly-HEMA能使体外培养的软骨细胞未经传代的情况下长期保持其生物学特性，为体外实验及组织工程研究提供优质种子细胞。

胆固醇酯转运蛋白及其基因多态性与2型糖尿病大血管病变的关系

探讨胆固醇酯转运蛋白在 2型糖尿病大血管病变发生中所起的作用及胆固醇酯转运蛋白TaqⅠB基因多态性与大血管病变的关系。对 96例正常对照者及 2 2 6例 2型糖尿病患者的血清胆固醇酯转运蛋白水平及胆固醇酯转运蛋白TaqⅠB基因型进行研究。结果发现 :① 2型糖尿病组胆固醇酯转运蛋白水平较正常对照组明显升高 ,大血管病变组升高更显著 ;②糖尿病大血管病变组B1B1基因型频率 (37.3% )显著高于无大血管病变组(16 .4 % ) ,B1B1基因型大血管病变发生率 (6 8.3% )明显高于B1B2 (4 6 .6 % )和B2B2 (2 9.1% )型 ;③多元回归分析显示 ,高胆固醇酯转运蛋白水平和B1等位基因是 2型糖尿病大血管病变的危险因素。提示 :① 2型糖尿病患者血清胆固醇酯转运蛋白水平升高 ,后者是 2型糖尿病大血管病变的危险因素 ;②胆固醇酯转运蛋白TaqⅠB基因多态性与 2型糖尿病大血管病变发生有关 ,B1等位基因是 2型糖尿病大血管病变的易感基因。

高糖状态下肾脏系膜细胞葡萄糖转运蛋白1的表达及氟伐他汀的干预研究

目的观察高糖环境中大鼠肾脏系膜细胞(MC)葡萄糖转运蛋白1(GluT-1)及转化生长因子1(TGF-β1)mRNA表达变化以及氟伐他汀(Flu)的干预作用,探讨其保护肾脏的可能机制。方法原代培养MC分为正常对照(NG)组、甘露醇(MG)组、高糖(HG)组及HG+Flu组,RT-PCR法检测细胞中GluT-1 mRNA和TGF-β1 mRNA的表达,放免法测定各组细胞培养上清液中Ⅳ型胶原含量。结果HG组各时相点GluT-1 mRNA、TGF-β1 mRNA表达量均高于NC组(P<0·01),从48h开始HG组细胞上清液Ⅳ型胶原的含量较NC组增高(P<0·05),而HG+Flu组GluT-1 mRNA表达量、TGF-β1 mRNA的表达、细胞上清液Ⅳ型胶原含量均较同时点HG组明显降低(P<0·01)。结论高糖刺激使MC内GluT-1 mRNA表达增高,TGF-β1 mRNA表达上调,Ⅳ型胶原分泌增多。高糖状态下,Flu抑制细胞外基质积聚的作用可能与其抑制高糖引起MCGluT-1过表达、减少TGF-β1的合成有关。

婴幼儿轮状病毒肠炎大便IL-8和TNF-α的检测及意义

目的：探讨IL-8和INF-α在RV肠炎发病中的作用及临床意义。方法：采用双抗体夹心ELISA法。结果：RV肠炎患儿急性期大便IL-8和TNF-α水平与对照组相比显著升高（P＜0．01），恢复期二者迅速下降，但仍高于对照组（P＜0．05）。急性期中重症组大便IL-8和TNF-α水平显著高于轻症组（P＜0．01），且大便IL-8水平和TNF-α水平呈显著正相关（P＜0．01）。结论：IL-8和TNF-α作为重要的炎症介质共同参与了RV肠炎肠道的炎症反应，二者的大便水平与RV肠炎病情轻重密切相关。

透析液内毒素检测采样方法的探讨

为加强血液透析医院感染管理，透析液内毒素的检测已成为至关重要的监测项目。透析液内毒素监测过程灵敏性高、易污染，采样过程的影响因素也颇多。我院经多次采样，总结了透析液及透析水的采样方法并对采样中的影响因素进行分析。

白藜芦醇诱导人成骨肉瘤细胞凋亡及其机制

目的探讨白藜芦醇(resveratrol)诱导人成骨肉瘤细胞株MG63的凋亡作用及其分子机制。方法应用不同浓度的白藜芦醇作用于MG63细胞,利用透射电镜观察细胞形态学变化;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物对细胞的增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡、细胞周期分布;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测P21cip1/WAF1 mRNA、Survivin mRNA的表达。结果白藜芦醇能明显抑制MG63细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性。经白藜芦醇处理MG63细胞后,透射电镜下可见到凋亡细胞,FCM分析发现,10、20μg/ml的白藜芦醇处理细胞72h后,凋亡率分别为(11.9±0.6)%、(19.7%±0.9)%(P<0.01),处理后的细胞G0/G1期比例增高,S期、G2/M期细胞比例减少;RT-PCR检测到P21cip1/WAF1表达升高,Survivin表达降低(P<0.01)。结论白藜芦醇能明显抑制MG63细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与促进P21cip1/WAF1表达、抑制Survivin的表达有关。

干扰素抗体在慢性丙型肝炎干扰素治疗中的意义

目的:了解干扰素抗体(抗-IFN)在慢性丙型肝炎干扰素(IFN)治疗中的意义.方法:应用ELISA法对49例应用基因重组α2b干扰素(rIFNα2b)治疗的慢性丙型肝炎患者的抗-IFN进行检测.结果:疗程结束后24 49%(12/49)抗-IFN阳性.抗-IFN出现在治疗后2.95±1.25个月.抗体水平与治疗效果有关,高浓度抗体临床效果差.抗-IFN阳性者较阴性者治疗效果差,复发率高(P=0.0056).结论:抗-IFN产生可影响IFN抗病毒效果,降低临床疗效,可作为IFN治疗中预测疗效的指标之一.

HGV感染的临床及流行病学研究

1 材料和方法1.1 材料病例选自我院1992-05/1998-05门诊及住院肝炎患者共81例,其中男54例,女27例,年龄19岁～67岁,平均44.5岁.根据1995年北京全国传染病与寄生虫病学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》诊断标准,急性肝炎26例,其中急性黄疸型肝炎15例,急性无黄疸型肝炎11例;慢性肝炎51例,轻度21例,中度26例,重度4例;慢性重型肝炎1例;肝炎肝硬变3例.甲型肝炎(HA)5例,乙型肝炎(HB)12例,丙型肝炎(HC)57例,乙、丙型肝炎病毒重叠感染(HB+HC)7例.50例有输血、应用血制品或光量子治疗史(包括49例 HC 和1例HB+HC).1.2 方法 81例患者均检测甲-庚型肝炎病毒标志,抗-HAVIgM、抗-HCV、HDAg、抗-HD、抗-HDIgM、抗-HGV,采用ELISA 法;HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc、抗-HBcIgM,SPRIA 法:HBV DNA,HCV RNA,采用 RT-PCR 法.

血清前列腺特异性抗原检测218例结果回顾性分析

目的 探讨血清前列腺特异性抗原 (T PSA)、游离前列腺特异性抗原 (F PSA)及其比值在前列腺癌 (PCa)中的诊断价值。方法 采用ELISA法检测T PSA及F PSA的含量 ,并将PCa组与前列腺增生 (BPH)组进行比较。结果 PCa组T PSA、F PSA及其比值与BPH组相比差异都非常显著 ;以T PSA>10ng ml、F T <0 .16为诊断前列腺癌的界值最为恰当。结论 应用以上三种指标可提高PCa诊断的敏感性和特异性。