窄谱中波紫外线对自体黑素细胞移植治疗白癜风疗效影响的研究

目的：评价不同方式联合窄波UVB照射对于自体黑素细胞培养移植治疗白癜风疗效的影响。方法：将符合纳入标准的稳定期白癜风患者随机分为四组，A组：移植前进行窄波UVB照射20次；B组：移植后予窄波UVB照射30次；C组：移植前予窄波UVB照射20次，移植后再予窄波UVB照射30次；D组：仅进行自体黑素细胞移植，未照射窄波UVB。治疗后至少随访6个月观察复色效果。结果：共治疗221例白癜风患者，移植前后均照光组48例，有81．3％的患者获得90％-100％的复色，获得50％以上复色率的患者达93．8％；移植前照光组54例患者的痊愈率为68．5％，有效率为92．6％；移植后照光组63例患者的痊愈率为61．9％，有效率为88．9％；仅移植未照光组56例，仅有44．6％的患者获得90～100％的复色，获得50％v7,上复色率的患者为73．2％。四组的痊愈率和有效率均有统计学差异。结论：体外培养的自体黑素细胞移植治疗稳定期白癜风疗效肯定，用少量供皮区即可治疗大面积皮损，联合窄波UVB治疗可显著提高疗效，其中移植前后均进行窄波UVB照射者效果最佳。

治疗白癜风外用中药对大鼠皮肤微环境的影响

目的:从调节局部免疫、影响黑素细胞黑素合成和迁移3个方面研究外用中药对大鼠皮肤的作用。方法:用中药乙醇提取液外涂大鼠背部皮肤,3周后活检取材,用半定量RT-PCR检测酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)、干细胞生长因子(stem cell factor,SCF)、干细胞生长因子受体(stem cell factor receptor,c-KIT)、白介素-2(interleukine-2,IL-2)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)mRNA的含量。结果:中药3、5、6、7外用后,大鼠皮肤中SCF mRNA表达显著增加,分别为对照组的2.59倍、5.82倍、2.60倍和3.74倍(P<0.01);中药1、2、4使IL-2 mRNA表达水平降至对照组的42.9%、50.5%和68%(P<0.01或P<0.05);而中药1、2、3、4、7外用后,大鼠皮肤中TNF-αmRNA表达水平也降低,分别为对照组的25.7%、22.8%、51.7%、53.4%和51.5%(P<0.01或P<0.05);中药5还明显上调TYR mRNA的表达为对照组的2.41倍(P<0.01)。结论:外用中药治疗白癜风有效的机制可能与调节皮肤局部微环境有关。

女贞子对黑素细胞的黑素合成、细胞增殖和c-kit基因表达的影响

目的研究女贞子对体外培养的黑素细胞的影响。方法采用免疫印迹法检测酪氨酸酶蛋白(TRP)和酪氨酸激酶受体蛋白(KIT)含量;405nm比色测定黑素细胞黑素含量;采用细胞数统计和显微镜观察的方法测定细胞毒性和对细胞增殖的影响。结果研究表明女贞子对黑素细胞的增殖和黑素合成有促进作用;对KIT蛋白合成有显著的促进作用。结论女贞子对黑素细胞增殖和黑素合成具有促进作用,该药物治疗白癜风的疗效可能与酪氨酸激酶受体蛋白含量提高相关。

InnVit基因沉默对黑素细胞B10BR黑素合成和细胞凋亡的影响

目的观察siRNA抑制InnVit基因后对小鼠永生化B10BR黑素细胞黑素合成和细胞凋亡的影响,进一步探讨InnVit基因的生物学功能。方法将InnVit基因的三对siRNA转染B10BR黑素细胞,半定量RT-PCR检测InnVit基因抑制后对黑素细胞InnVit基因mRNA水平的变化;采用MTT法测定InnVit基因抑制后对细胞增殖率的影响;采用流式细胞仪检测InnVit基因抑制后对黑素细胞凋亡的影响。结果siRNA1转染后,InnVit基因在黑素细胞中的表达明显下降,试验组细胞的早期凋亡率(35.80%)较对照组(6.47%)明显增加。结论通过RNA干扰技术可抑制InnVit在黑素细胞中的表达,可诱导B10BR细胞的凋亡增加。

生殖器疱疹患者复发的社会因素研究

目的:探讨生殖器疱疹(GH)患者复发的社会因素,以指导GH患者避免相关的社会因素而减少GH的复发和传播。方法:选择确诊的96例GH患者,详细询问并记录GH复发前的相关社会因素,并对男女GH患者复发的社会因素及频繁复发(复发频率>6次/年)和非频繁复发(复发频率≤6次/年)社会因素进行比较。结果:65.6%(63/96)的复发性GH患者有较明确的诱发因素,诱发因素排在前3位的是过度疲劳(17.7%)、精神紧张(12.5%)及频繁性接触(9.4%),此外熬夜(8.3%)及酗酒(7.3%)也是GH复发的较常见社会因素。男女GH患者复发的社会因素间差异均无显著性(P均>0.05)。21例频繁复发和75例非频繁复发GH患者复发的社会因素间差异均无显著性(P均>0.05)。结论:过度疲劳、精神紧张及频繁性接触是GH患者复发的主要社会因素。指导患者尽量避免相关的社会因素对降低GH的复发及人免疫缺陷病毒(H IV)和梅毒的传播具有重要意义。

黑素生成素对黑素瘤mel586细胞白癜风相关基因-1和酪氨酸酶表达的影响

采用MTT法测定黑素生成素对细胞增殖率的影响;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性;半定量RT-PCR检测黑素生成素对黑素细胞白癜风相关基因-1(VIT-1),酪氨酸酶(TYR)和酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP1)基因表达的影响。结果:黑素生成素能促进黑素瘤细胞mel586的增殖,并与浓度呈正相关性,对TYR和TRP-1mRNA表达无明显促进作用;黑素生成素在浓度为6μg/mL和12μg/mL时对黑素瘤细胞mel586酪氨酸酶活性有促进作用(P<0.05)。黑素生成素治疗白癜风有效的机制可能与提高VIT-1的表达量和促进细胞增殖有关。

复方倍他米松注射液联合治疗后进展期非节段型白癜风稳定率及影响因素分析

目的探讨复方倍他米松注射液联合治疗进展期非节段型白癜风患者后病情稳定率及影响因素。方法回顾性收集2022年10月至2023年4月杭州市第三人民医院皮肤科白癜风专病门诊就诊并接受复方倍他米松注射液联合治疗的进展期非节段型白癜风患者,记录治疗后3个月的皮损稳定率。分析发病特征、病程、病情或治疗方法等因素对白癜风稳定率的影响。计数资料的组间比较采用χ2检验。采用logistic回归分析治疗效果的影响因素。结果纳入145例复方倍他米松注射液联合治疗的进展期非节段型白癜风患者,男56例,女89例,14~67(35.43±11.54)岁。18例接受1次注射,稳定10例(55.6%);105例注射2次,稳定62例(59.0%);22例注射3或4次,稳定12例(54.5%)。治疗后总体稳定率为57.9%(84例)。白斑面积<1%体表面积的患者治疗稳定率(42/47,89.4%)高于白斑面积≥1%的患者(42/98,42.9%,P<0.001);病程≤2年的患者治疗稳定率(32/41,78.0%)高于病程>2年的患者(52/104,50.0%,P<0.05);伴特殊临床标记(同形反应、三色白癜风、纸屑样外观、炎症性白癜风等)的患者(4/21,19.0%)治疗稳定率低于无临床标记组(80/124,64.5%,P<0.001)。快速进展期患者复方倍他米松注射液治疗同时联合光疗组的稳定率高于未联合光疗组[(33/44,75.0%)比(21/44,47.7%),χ^(2)=6.90,P=0.009]。白斑面积≥1%且复方倍他米松注射液治疗2次的患者中,联合光疗组的稳定率(21/36,58.3%)也高于未联合光疗组(12/37,32.4%;χ^(2)=4.94,P=0.026)。是否为初发、是否有发病诱因、是否有家族史、不同白癜风疾病活动度评分、不同治疗次数和间隔时间的患者组间,治疗后稳定率差异无统计学意义(均P>0.05)。多因素logistic回归分析显示,白斑面积大小(OR=8.11,95%置信区间:2.74~24.04)、病程长短(OR=0.26,95%置信区间:0.07~0.99)、有无特殊临床标记(OR=6.37,95%置信区间:1.72~23.57)和是否联合光疗(OR=0.34,95%置信区间:0.15~0.77)均为影响患者治疗效果的因素(均P<0.05)。结论复方倍他米松注射液可能适用于轻中度进展期白癜风,尤其适合白斑面积<1%,不适用于面积>5%的白癜风患者,且联合光疗可提高进展期白癜风的治疗稳定率。

茶多福胶囊预防小鼠急性乙醇中毒的实验研究

目的 为阐明茶多福胶囊对急性乙醇中毒的预防作用。方法 对NIH小鼠预防性给予茶多福 ,观测其乙醇中毒后的爬杆能力和死亡率 ,并用气相色谱法测定其血浆中乙醇残留浓度。结果 预服茶多福可降低小鼠的急性乙醇中毒死亡率 ,显著改善乙醇中毒小鼠的爬杆能力 ,在乙醇灌胃后 60min和 12 0min ,预服茶多福组的小鼠血浆乙醇浓度比生理盐水组分别下降了 5 2 %和 3 2 %。结论 预服茶多福能有效对抗乙醇所致的小鼠急性中毒 ,可能系通过降低血浆乙醇浓度发挥效应。

个体化培养自体黑素细胞移植治疗白癜风

目的 探讨使用个体化培养基进行自体黑素细胞培养移植治疗白癜风的疗效.方法 负压吸疱获取患者正常表皮片,制成细胞悬液,在Hu16黑素细胞选择性培养基中培养.检测黑素细胞分裂时间（DOT）和黑素含量,根据DOT的大小、黑素含量和细胞形态,调整血清、细胞因子浓度及补充内皮素-1,进行个体化黑素细胞培养.经2～5次传代后收集黑素细胞,白斑区用超脉冲CO2激光磨削后进行黑素细胞移植,随访观察复色效果.结果 共治疗155例稳定期白癜风患者的204处皮损,进行1次移植119例,进行2～4次移植36例.应用个体化黑素细胞培养后细胞扩增可达50～80倍.84.80%的皮损复色面积超过50%,其中52.94%的皮损复色画积超过90%,且复色均匀,未见瘢痕及其他不良反应.性别、年龄、病程长短和皮损面积大小对疗效没有影响.节段型白癜风移植疗效好于寻常型白癜风,两组有效率分别为93.62%和82.16%,痊愈率分别为65.96%和49.04%.手臂和腿部的皮损（不包括肘部和膝盖）移植后痊愈率达73.08%,疗效好于躯干、面颈;肢端皮损疗效最差,痊愈率仅为25.93%.结论 个体化培养技术能提高白癜风患者黑素细胞的培养成功率与细胞扩增倍数.体外培养的自体黑素细胞移植治疗稳定期白癜风疗效肯定,用少量供皮区即可治疗大面积皮损,值得临床应用.

女贞子对培养的黑素细胞酪氨酸酶活性和黑素合成的影响

目的研究女贞子单体酪醇和齐墩果酸对人黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。方法采用MTT法测定细胞增殖情况,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,氢氧化钠裂解法测定黑素含量,半定量RT-PCR检测药物对黑素细胞酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA表达的影响。结果加入酪醇72 h后,各组黑素细胞的酪氨酸酶活性和合成黑素能力明显增强,且呈浓度依赖性;酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA表达量分别比空白对照增加39．10％和99．26％;齐墩果酸也能明显激活酪氨酸酶(P<0．01),促进黑素合成(P<0．05),并使黑素细胞酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA表达量分别比加入无水乙醇的对照增加31．88％和17．73％。结论酪醇和齐墩果酸可能通过上调酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白-1 mRNA的表达而增强正常人黑素细胞的黑素合成和酪氨酸酶活性:两者可能是女贞子中影响黑素细胞生物学活性的主要成分。

白癜风相关基因-1的确认及其序列分析

目的探讨白癜风患者黑素细胞VIT-1基因转录水平的表达情况,分析该基因序列的差异性。方法用半定量RT-PCR法检测黑素细胞VIT-1基因表达水平,克隆VIT-1 ORF cDNA全长并测序, 序列差异由CLUSTAL W(1．83)软件分析。结果黑素细胞的VIT-1基因ORF含有81 bp的内含子,为 FBXO11的3’端的部分序列,白癜风患者黑素细胞VIT-1基因表达量下降。结论 VIT-1不是一个新基因,而是FBXO11,属于F-box蛋白家族成员。

白癜风自体培养黑素细胞移植疗效与白细胞介素17、Foxp3的相关性研究

目的 探讨白癜风自体培养黑素细胞移植疗效与白细胞介素17、Foxp3的相关性.方法 对40例稳定期寻常型白癜风患者进行自体培养黑素细胞移植,同时收集其外周血,6个月后根据移植效果将收集的血液分为成功组25例,失败组15例.用ELISA的方法测定移植成功与移植失败外周血中白细胞介素17及Foxp3水平,比较移植成功组与失败组血清中白细胞介素17及Foxp3水平的差异.用SPSS 17.0统计软件进行统计分析.结果 移植成功组血清中白细胞介素17（15.29±7.86） ng/L,明显低于移植失败组（43.88±13.02） ng/L,差异有统计学意义.血清中Foxp3的水平,移植成功组（6.08±2.03） ng/L,高于移植失贮组（3.37±1.81） ng/L,两者之间比较,差异有统计学意义.结论 血清白细胞介素17水平升高、Foxp3水平降低与白癜风患者的移植失败有相关性.

浙江省815例白癜风患者遗传流行病学研究

目的探讨白癜风可能的遗传模式。方法通过调查表得到浙江地区815例白癜风患者及其一、二级亲属的数据。815例白癜风患者中男411例(50.43%),女404例(49.57%),年龄2月龄至71岁。由于缺乏当地白癜风患病率普查数据,因此设立对照组以方便遗传模式及遗传度的计算。468名对照组性别及各年龄段比例与病例组具有可比性。应用Penrose法、Falconer回归法及SAGE-REGTL软件对白癜风患者进行遗传方式分析,遗传度计算及复合分离分析。结果所调查的815例白癜风先证者中,有家族史者128例,无家族史者687例,遗传率15.70%。Penrose法计算出同胞患病率(s)/人群患病率(q)为41.76,不接近1/2q(260.42),也不接近1/4q(130.21),而接近1(?) (22.82),提示白癜风符合一种多基因遗传模式。白癜风患者一、二级亲属遗传度分别为59.61%和55.20%,加权遗传度为58.7%。复合分离分析显示孟德尔显性、隐性、加性主基因模型假设均被接受;单纯环境与非传递模型被拒绝;以AIC值判断,显性模型拟合程度最好。结论遗传因素在白癜风发病中占有重要作用,白癜风符合一种多基因或多因子遗传模式,存在主基因效应。

人酪氨酸酶抗原表位肽的表达、纯化及生物学活性分析

目的 探讨人酪氨酸酶抗原表位肽在白癜风患者自身抗体检测中的表达。方法 目的基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-2，转化大肠杆菌BL21菌株，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白表达，通过SDS-PAGE分析和蛋白质印迹鉴定目的蛋白表达，ELISA检测其生物学活性。结果 成功构建重组表达载体，SDS-PAGE和蛋白质印迹结果表明，重组蛋白成功表达。应用凝胶分析系统分析蛋白表达量发现，目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的90％。融合蛋白经过试剂盒纯化后，其蛋白纯度达95％以上。ELISA检测纯化蛋白的生物学活性，结果表明，纯化蛋白具有结合白癜风患者IgG的能力。结论 成功表达了人酪氨酸酶抗原表位肽，其表达蛋白具有生物学活性。

七组中药醇提物通过HaCaT细胞对黑素细胞株B10BR增殖和黑素合成的影响

目的研究黑胡椒等中药醇提物通过角质形成细胞对黑素细胞增殖及黑素合成的间接作用,探讨其外用治疗白癜风的可能机理。方法选取七组中药的醇提物,其中Ⅰ号:透骨草、浮萍各等份;Ⅱ号:白芷、蛇床子各等份;Ⅲ号:补骨脂;Ⅳ号:黑胡椒;Ⅴ号:黑胡椒、补骨脂各等份;Ⅵ号:女贞子;Ⅶ号:复方卡力孜然酊,加入到HaCaT细胞培养基中,采用ELISA法测定上述中药干预后HaCaT细胞上清液中内皮素-1和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的含量;MTT法测定经中药干预后HaCaT细胞上清液对水生化黑素细胞株B10BR增殖的影响,多巴氧化法检测酪氨酸酶活性,氧氧化钠裂解法测定黑素含量。结果Ⅱ号和Ⅴ号中药能明显刺激HaCaT细胞分泌内皮素-1(P<0.01及P<0.05).Ⅲ号、Ⅳ号和Ⅶ号可促进HaCaT细胞分泌bFGF(P<0.01,P<0.05及P<0.05)。经各组中药处理后的HaCaT细胞培养上清液,Ⅲ号、Ⅵ号能显著促进B10BR的增殖(P<0.01),Ⅰ号、Ⅱ号和Ⅲ号能明显提高B10BR酪氨酸酶活性(P<0.01);Ⅰ号、Ⅱ号、Ⅵ号、Ⅶ号能明显促进B10BR黑素的合成(P<0.01或<0.05)。结论部分中药醇提物治疗白癜风有效可能与中药促进了角质形成细胞分泌细胞因子、改变表皮的微环境有关。