人结直肠癌耐药细胞株HCT-8/L-OHP的构建及HOXB8过表达的探讨

目的建立人结直肠癌耐奥沙利铂(L-OHP)细胞株,检测其多药耐药性并初步探讨可能的耐药机制。方法采用药物浓度梯度递增诱导法建立人结直肠癌耐L-OHP细胞株HCT-8/L-OHP。MTT法鉴定药敏性,并检测耐药细胞株的多药耐药性、生长曲线和细胞群体倍增时间。用光镜、电镜、流式细胞术等方法观察亲本细胞和耐药细胞的形态、周期及细胞凋亡。通过实时荧光定量PCR和Western-blot检测HOXB8基因和ABCC1(MRP or MRP1),ERCC1,P-gp,GST-π的mRNA及蛋白表达水平。结果建成了肠癌耐药细胞模型HCT-8/L-OHP,半抑制浓度(IC50)为62.33μmol/L,耐药指数(RI)为10.78。耐药株细胞形态发生变化,代谢率降低,生物活力减弱。HCT-8/L-OHP细胞株具有耐药性,细胞增殖减慢。HCT-8/L-OHP细胞在G2/M期的比例增多,在S期及G0/G1期的比例减少,相较于亲本细胞株,差别具有统计学意义(P<0.01);HCT-8/L-OHP细胞凋亡率低于HCT-8细胞。ABCC1(MRP or MRP1),ABCB1(P-gp)等耐药相关基因在耐药细胞株中高表达;HOXB8基因在HCT-8/L-OHP细胞中表达,较亲本细胞株表达明显升高,差别具有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建了肠癌耐药细胞株HCT-8/L-OHP,耐药的分子机制可能是ABCC1(MRP or MRP1)及ABCB1(P-gp)等基因的表达升高。HOXB8基因过表达可能与人结直肠癌对L-OHP耐药的机制相关。

结直肠癌奥沙利铂化疗耐药机制的研究进展

结直肠癌是临床最常见的肿瘤之一。目前国内外对中晚期结直肠癌的患者仍以手术为主,化疗为辅的综合治疗方案。2017年NCCN指南推荐含有奥沙利铂的FOLFOX、Cape OX方案是一线化疗方案,但近一半患者因化疗耐药而致生存率降低。因此,寻找肿瘤细胞对化疗的耐药靶点进而提高化疗疗效,成为结直肠癌化疗亟待解决的关键性问题。同时在精准医学时代,寻找特异性的分子标志物也将成为研究热点。本文将对有关奥沙利铂化疗耐药机制、逆转及精准医学应用的新进展进行综述。

转录因子叉头框K1在肿瘤中的作用

叉头框K(forkhead box class K,FOXK)蛋白家族是一类进化保守的转录因子,近年来被认为是多种癌症的关键转录调控因子。FOXK家族成员参与介导了广泛的生物学过程,包括细胞增殖、分化、凋亡、自噬、细胞周期、DNA损伤和肿瘤发生。FOXK1基因作为转录因子参与了多种肿瘤发生、发展等过程的调控,其基因结构及表观遗传学的异常与人类多种疾病的发生发展密切相关。研究发现,FOXK1在大多数恶性肿瘤中充当癌基因的角色,但其相关发病机制尚未明确。因此,对于FOXK1蛋白功能的深入研究,有助于更好地揭示相关疾病的发病机制,为疾病的预防和治疗提供理论依据。本文就国内外FOXK1蛋白在不同肿瘤中的主要作用的研究进展进行综述。