脱落酸的摇瓶发酵工艺优化研究

【目的】通过脱落酸的摇瓶发酵工艺优化,提高脱落酸的摇瓶发酵水平,从而减少摇瓶效价误差,有利于诱变效应的分析。【方法】通过工艺试验确定对脱落酸摇瓶发酵的影响因素,对影响因素进一步进行正交优化试验,得到脱落酸摇瓶培养基的最优配比组合浓度。【结果】脱落酸摇瓶配方中的麦麸可以完全被黄豆粉替代,替代后其摇瓶效价从0.171 g/L提高到0.550 g/L,提高幅度达221.6%。经过进一步正交试验,以黄豆粉、麦芽糖、乙二醇为影响因素,摇瓶产量为评价指标,摇瓶产量结果显示黄豆粉为最显著影响因子,其次为麦芽糖。得到最佳摇瓶配方为黄豆粉5 g/L、麦芽糖10 g/L、乙二醇4 g/L,花生粉4 g/L,葡萄糖4 g/L,硫酸镁1 g/L。摇瓶发酵效价从0.205 g/L提高到1.441 g/L,比对照提高602.9%,其提高幅度较大。【结论】发酵摇瓶中黄豆粉替代麦麸更有利于发酵过程中脱落酸菌产素水平的提高。

从氯霉素抗性突变株筛选赤霉素高产菌株

应用氯霉素抗性筛选法,将经NTG诱变处理的赤霉素产生菌——水稻恶苗病菌6028菌株(Gibberellafujikuroi6028)原生质体涂布在含有氯霉素2000μg/ml的致死再生培养基平板上,获得了大量氯霉素抗性突变株,其中赤霉素产量高于出发菌的阳性效率达20%,同时获得了在20和60吨罐上产素能力和发酵总亿比出发菌株分别提高7.58%和9.36%的7106高产菌株,且该菌株经连续5次传代试验,产素能力无明显变化。

赤霉素萃余液降解微生物的分离筛选及其降解COD的研究

为提高赤霉素萃余液中COD降解率、减轻赤霉素萃余液对废水处理站运行负荷的压力,对土壤样品进行富集培养、分离筛选获得"三耐"高效微生物(菌或菌群),并以赤霉素萃余液为发酵基质,免蒸静止连续发酵获得高效降解赤霉素萃余液COD的微生物菌群。该混合菌群在赤霉素萃余液中能较好生长繁殖,培养7d后,赤霉素萃余液COD从约100 000mg·L-1下降到约40 000mg·L-1,COD降解率达60%以上,为萃余液的处理开辟了新途径。

赤霉素产生菌原生质体理化诱变-定向筛选模型的建立与应用

针对赤霉素工业生产菌株皆为不产生孢子的多核多细胞菌丝型,通过酶解手段溶去赤霉素菌丝体的细胞壁,使其成为单一游离的原生质体,在此基础上建立赤霉素产生菌原生质体抗药性致死突变标志诱变筛选模型,以解除高浓度反应底物及内源赤霉素对其产生菌生物合成的反馈抑制和阻遏,提高赤霉素生物合成酶的活力,从而获得赤霉素高产菌株。应用所建立的赤霉素诱变筛选模型,进行产生菌原生质体理化诱变-定向筛选,成功得到N7298等多株原生质体再生的抗药性突变高产菌株,其摇瓶效价比出发菌株N提高23.4%,在20m3罐生产水平提高24.1%。

应用^(60)C_0辐射诱变选育赤霉酸GA_3高产菌株的研究

通过藤仓赤霉菌原生质体对多种抗生素敏感性测定,采用诱变剂60C0不同诱变剂量对菌株原生质体进行诱变处理,筛选抗多粘菌素的变株。经多轮次诱变摇瓶初复筛,获得抗性突变株1130#的摇瓶发酵单位比对照提高13.3%,取得了较好诱变效果。

常压室温等离子体(ARTP)对脱落酸产生菌的诱变效应

[目的]研究ARTP对脱落酸产生菌的诱变效应及有效性,以期获得高产突变菌株。[方法]应用ARTP在电源功率100 W、等离子体温度25℃、气流量10 SLM、照射距离2 mm的条件下,进行不同照射时间的诱变处理,统计致死率、正变率、变异幅度等。[结果]在100 s的处理剂量下,ARTP对脱落酸产生菌的正变率在20%以上,诱变幅度在-30.53%~22.06%,高产突变株6-2的S-ABA产量比出发菌株提高22.06%,且经连续5次传代试验,产量无明显变化。[结论]ARTP对脱落酸产生菌的正变率高、诱变幅度大,所获高产突变株的稳定性好。

利用家蝇对赤霉素菌渣进行生物转化

[目的]减轻赤霉素菌渣对环境污染的压力,实现真正意义零排放,并资源化利用发酵残渣,缓解我国饲料蛋白的短缺。[方法]以赤霉素菌渣为原料,利用家蝇进行转化生产蛋白饲料,转化后发酵残渣烘干后,还可得到生物有机肥料。[结果]每kg含水率60%的赤霉素菌渣可转化为蝇蛆248.2g,粗蛋白含量为57.8%,可作为饲料蛋白。[结论]在我国首次成功建立了利用家蝇对赤霉素菌渣进行转化生产蛋白饲料的中试生产工艺。

赤霉素萃余液中优势菌训化及降低COD的研究

[目的]提高赤霉素萃余液中COD降解率，减轻赤霉素萃余液对废水处理站运行负荷的压力。[方法]通过从赤霉素萃余液中筛选出长势旺、生命力强的优势菌，将优势菌用目的废液的不同浓度、不同pH值进行逐步训化，并和高效菌进行科学配伍，然后重新投入到赤霉素萃余液进行污水处理，以达到更高更好的处理效果。[结果]优势菌和高效菌的混合菌群经静止培养7d后，赤霉素萃余液COD从10万mg／L下降到1．5万～2．8万mg／L，COD降解率达72％-85％左右。[结论]高效优势微生物菌群能提高赤霉素萃余液COD降解率。