安福雷颗粒剂对奶牛乳房炎主要致病菌的体外抑菌试验

目的:观察安福雷颗粒剂体外抑菌效果,为中药防治乳房炎提供实验依据。方法:采用琼脂平板扩散法(牛津杯法),选用安福雷颗粒剂对奶牛乳房炎4种主要致病菌进行体外抑菌试验。结果:安福雷颗粒剂抑菌试验金黄色葡萄球菌的抑菌环直径为21.00mm,表皮葡萄球菌的抑菌环直径为26.52mm,停乳链球菌的抑菌环直径为17.68mm,大肠杆菌的抑菌环直径为11.31mm。结论:安福雷颗粒剂对奶牛乳房炎致病菌有较好的体外抑菌效果,尤其是革兰氏阳性菌,为中草药防治奶牛乳房炎提供了实验依据。

人抗P53蛋白单克隆抗体的制备及评价

目的制备获得人P53蛋白单克隆抗体,并应用于免疫组化检测。方法利用基因重组方法,将p53基因构建到原核质粒载体上并诱导表达,将收集获得的P53蛋白免疫小鼠,经细胞融合及亚克隆手段获得鼠源单克隆抗体,与商品化的抗体DO-1共同染色蜡块包埋的病理组织样本,比较二者的染色结果。结果在筛选获得的与DO-1检测结果相近的5株抗体内,取检测结果最接近的1株抗体5E10,经Protein A/G株纯化抗体,与收集获得的数例癌症组织蜡块进行免疫组化验证,发现结果均与DO-1的结果无明显差异。结论成功制备并筛选出1株人抗P53单克隆抗体,可用于免疫组化染色。

红岩草提取物对奶牛生产性能乳汁体细胞数和血液生化指标的影响

试验选用1～3胎次患有隐性乳房炎的体重600kg泌乳荷斯坦牛36头,按照产奶水平、泌乳阶段、胎次相近的原则,随机分为对照组和试验组,每组18头。试验组奶牛每天灌服200mL浓度为1g/mL的红岩草提取物。结果表明,与对照组相比,用药第7天和第14天试验组平均日产奶量显著提高,乳脂率和乳蛋白有上升的趋势,但乳密度和非脂乳固体等指标变化不大;乳汁体细胞数显著下降,试验组在用药第7天和第14天治愈率分别为55.56%和83.33%;血常规分析试验组第7天和第14天试验组奶牛的嗜碱性粒细胞的比例数目显著上升。结果表明,红岩草提取物具有提高奶牛生产性能,降低牛乳中体细胞数,治疗奶牛隐性乳房炎的作用。

红岩草提取物对隐性乳房炎奶牛乳酶的影响、疗效及安全性评价

本试验选用1～3胎次患有隐性乳房炎的体重600kg泌乳荷斯坦牛36头,随机均分为对照组和试验组,试验组奶牛每天服用200g的红岩草提取物。乳酶活性测定结果表明,试验7d组和14d组的髓过氧化物酶(MPO)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳过氧化物酶(LP)、N-乙酰-B-氨基葡糖糖苷酶(NAG)活性均极显著低于对照组(P<0.01);CMT法检测结果表明,试验7d组和14d组的治愈率分别为55.56%和77.78%;药物安全性评价结果表明,本试验中的红岩草提取物添加量并未造成试验7d和14d组奶牛的肝脏、肾脏功能指标变化,具有较高的安全性,可用于兽医临床。

在研究生中开设“细胞培养技术”课程的教学方法探索

细胞培养技术是细胞工程、基因工程和生物医学工程的重要研究手段,目前已成为生命科学研究领域中最基本的技术和必备的实验技能之一,广泛应用于现代生物制药的研究和生产中。在研究生中开设"细胞培养"的实验教学,对培养适应现代生命科学技术发展需求、适应市场发展需要的生物技术创新人才,具有十分重要的现实意义。结合带教老师的实验体会,文章从加强对细胞培养基础理论的讲解、运用多媒体教学、注重学生实践能力培养、重视实验报告的书写及实验结果的分析等方面进行探索。

红岩草中三种成分的体外抑菌实验及组方优选研究

目的:通过红岩草中连苯三酚、氢醌和没食子酸甲酯等3种成分的体外抑菌作用,验证红岩草的抑菌活性,同时为其成分组方提供依据。方法:采用常量稀释法,测定连苯三酚、氢醌、没食子酸甲酯对导致奶牛乳房炎5种主要致病菌的体外抑菌效果;采用正交试验方法优选3种成分的最佳配比并对其进行验证。结果:连苯三酚对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌和停乳链球菌的最低抑菌浓度分别为160 mg.L-1、80 mg.L-1、1 280 mg.L-1、640 mg.L-1和640 mg.L-1,氢醌对5种细菌的最低抑菌浓度分别为640 mg.L-1、80 mg.L-1、>1 280 mg.L-1、80 mg.L-1和80 mg.L-1,没食子酸甲酯对5种细菌的最低抑菌浓度分别为12 800 mg.L-1、>1 280 mg.L-1、640 mg.L-1、>1 280 mg.L-1和>1 280 mg.L-1。正交试验结果直观分析显示连苯三酚、氢醌、没食子酸甲酯对于金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌的抑菌效果为连苯三酚>氢醌>没食子酸甲酯;对于停乳链球菌的抑菌效果为氢醌>没食子酸甲酯>连苯三酚。方差分析显示,3种成分对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和大肠杆菌,因素水平间存在显著性差异(P<0.05),而对于无乳链球菌和停乳链球菌,因素水平间无显著性差异。结论:氢醌对奶牛乳房炎主要致病菌有较好的体外抑菌作用,3种成分的最佳组方为A3B3C2。

药理学双语教学的实践与体会

通过药理学双语教学实践,从教材、教学内容、教学方式及考核方式等几方面阐述了如何建立设合适的双语教学模式。了解药理教研室药理学"双语"教学的现状,总结经验教训,为双语教学的进一步顺利开展打下基础。

汽车社会成本中的交通拥堵机理分析与“东京模式”

为了解决中国交通拥堵问题,分析了汽车社会成本产生的内在机理和交通拥堵的成因。分析中,运用了经济学中关于社会成本与供需关系的理论,结合建模的方法,并引入交通需求管理的理念。从3个维度探究治堵策略,即:控制交通需求、促进出行方式的转换、合理规划城市空间布局。基于东京与北京的可比性,借鉴了东京治理交通拥堵的经验——"东京模式",其3大特征是:自主限制驾车出行、发展立体轨道交通系统、建设城市"副中心"等。通过与东京、伦敦、纽约等国际大城市的对比,凸现出北京的特殊性,以期借他山之石,为中国治堵提出理论依据和政策建议。

化痰通络汤对高脂血症合并脑缺血模型大鼠脑组织炎症因子表达的影响

[目的]观察化痰通络汤对高脂血症合并脑缺血大鼠模型神经保护作用,探讨化痰通络汤通过抑制炎症反应途径抗脑缺血损伤的作用机制。[方法]建立高脂血症动物模型,以线栓法构建大鼠大脑中动脉栓塞复合缺血模型;采用酶联免疫法(ELISA)检测脑组织中COX-2、TNF-α、IL-1β的含量,免疫组化法测定大鼠脑组织中ICAM-1和VCAM-1的表达。[结果]中药治疗组与中药对照组相比较,神经功能评分降低,脑梗死体积缩小;脑组织匀浆中TNF-α、IL-1β、COX-2和脑组织中ICAM-1、VCAM-1的表达均减少。[结论]化痰通络汤可改善高脂血症合并脑缺血模型大鼠的神经功能缺失症状,缩小脑梗死体积,可能通过调节脑组织炎症反应、抑制炎症因子表达途径对抗缺血性脑损伤。

对“魄门亦为五脏使”的认识

"魄门亦为五脏使"出自《素问·五脏别论》,是对人体五脏生理功能的一个总的概括。其启闭功能与心神主宰,肝气条达,脾气升提,肺气宣肃,肾气固摄有密切的联系。为了更好地理解和教学,本文结合了理论和临床,对魄门和五脏的关系进行了探讨。

流式细胞术在实验教学中的探索与应用

根据目前医学院校实验教学的需要,开设了流式细胞术的实验技术课程,同时结合流式细胞术的理论基础,进行了流式细胞术的教学探索与应用。教学目的不仅是帮助学生了解流式细胞仪的基本结构、工作原理及其应用领域,同时也能够让学生掌握这一方便快捷、应用广泛的新技术,并能够利用流式细胞仪完成基本的检测工作。从而更好地帮助学生拓展科研思路,锻炼学生的实践动手能力,使流式细胞术能够更好地应用于实验教学和科学研究。

胰腺癌小鼠模型研究进展

胰腺癌是一种恶性程度高、预后极差的恶性癌症之一,发病率和死亡率不断上升。胰腺癌小鼠模型可以表征胰腺肿瘤特征,是研究癌症预防和治疗的最佳工具。胰腺癌小鼠模型分为诱导性模型、移植性模型和基因工程模型。然而,与人类胰腺癌相比,没有简单动物模型可以模拟人类胰腺癌的所有特征。已有胰腺癌小鼠模型各自用途不一,本文对不同胰腺癌小鼠模型的造模方法、特征及优缺点的研究进展做一综述,为胰腺癌疾病的研究提供理论依据。

中医院校医学微生物与免疫学实验课教学探索

医学微生物学与免疫学是我院的一门主要的基础医学主干课程，也是一门实践性非常强的学科，理论与实验相辅相成、不可分割，理论课的教学已经比较成熟，实验课的教学更应重视，在课时少、任务重的情况下，只能根据学校的教学目标、教学对象特点，突出教学重点，抓好基本知识和基本技能训练，本文在此谈实验课教学体会。

鼠抗人S100A9天然蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

目的：探索以白细胞为免疫原的鼠抗人白细胞天然蛋白单克隆抗体（monoclonal antibodies,m Abs）制备与克隆筛选鉴定方法,制备鼠抗人S100A9天然蛋白单克隆抗体,并鉴定抗体性质。方法：用健康人外周血白细胞免疫小鼠,利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备m Abs,通过免疫细胞化学法对杂交瘤细胞进行非特异性阳性筛选,有限稀释法进行亚克隆,应用免疫沉淀-质谱法进行mAb特异性鉴定,通过Western blot进行细胞株筛选,小鼠体内诱生腹水法制备单抗,亲和层析法纯化,ELISA间接法测定效价及亲和力,Western blot进行特异性鉴定及交叉反应性分析,免疫组化染色人乳腺癌石蜡切片。结果：获得免疫细胞化学检测阳性多克隆细胞35孔,分泌鼠抗人S100A9蛋白单克隆抗体细胞株11株,优选1株制备腹水并纯化鉴定抗体,抗体效价为1∶3.18×10^5,亚类为IgG1,轻链为kappa链,抗体纯度达95%以上,亲和力常数3.54×10^8L/mol,与S100A8的交叉反应率为0.12%,与S100A12和S100A13几乎无交叉反应,组化染色识别人乳腺癌组织中的S100A9蛋白。结论：成功制备鼠抗人S100A9天然蛋白单克隆抗体,该单抗具有高效价、较高亲和力和高特异性,能为其应用于免疫组化检测S100A9蛋白的表达提供依据。

农村三产融合评价体系构建及应用--以传统农区山东省为例

农村一二三产业融合发展是拓宽农村产业发展空间的有效措施,是实现农业农村现代化的重要内容,同时也为激活农村市场经济提供有力支持。通过探讨农村三产融合的基本内涵,以传统农业大省山东为研究对象,建立了一套包含3个方面12项具体指标的农村三产融合发展评价体系。采用熵值法对2013—2018年6年的指标数据予以客观赋权,并计算各地市三产融合的发展水平,揭示山东省各地级市农村三产融合发展的时空变化和分异特征。结果表明:山东省农村三产融合发展水平逐年稳步递增,各一级指标间发展水平差异不大,但各地市间存有分异特征,尤其是东部沿海地区与鲁西南地区差异最为明显。最后通过分析评价结果,提出推进山东省及各地市农村三产融合发展的政策建议。

六味地黄丸含药血清对β-淀粉样蛋白损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的保护作用研究

目的研究六味地黄丸含药血清(MSLDP)对β-淀粉样蛋白(Aβ)25-35损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)的保护作用,探讨六味地黄丸在防治阿尔茨海默病(AD)中的作用机制。方法 2012年3月—2013年4月选取SPF级雄性SD大鼠20只,按照随机数字表法将20只雄性SD大鼠分为对照组、给药组,每组10只。制备MSLDP及Aβ25-35母液备用。根据Aβ25-35、MSLDP不同干预浓度将处于对数生长期PC12细胞分为0、10、20、40 μmol/LAβ25-35组和0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组,另取处于对数生长期PC12细胞分为正常对照组(不加Aβ25-35和MSLDP)、模型组(加入20 μmol/L Aβ25-35制备AD模型)、MSLDP干预组(加入20%MSLDP+20 μmol/L Aβ25-35),显微镜下观察0%、2.5%、5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组及正常对照组、模型组、MSLDP干预组PC12细胞形态。采用MTT法检测PC12细胞存活率,同上分组方法及步骤采用Western blotting法检测PC12细胞血管内皮生长因子B(VEGF-B)蛋白表达水平。结果 0 μmol/L Aβ25-35组PC12细胞存活率高于10、20、40 μmol/L Aβ25-35组(P<0.05);10 μmol/L Aβ25-35组PC12细胞存活率高于20、40 μmol/L Aβ25-35组(P<0.05);20 μmol/L Aβ25-35组PC12细胞存活率高于40 μmol/L Aβ25-35组(P<0.05)。0、10 μmol/L Aβ25-35组VEGF-B蛋白表达水平高于20、40 μmol/L Aβ25-35组(P<0.05);20 μmol/L Aβ25-35组VEGF-B蛋白表达水平高于40 μmol/L Aβ25-35组(P<0.05)。0%MSLDP组PC12细胞存活率低于2.5%、5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组(P<0.05);2.5%MSLDP组PC12细胞存活率低于5.0%、10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组(P<0.05);5.0%MSLDP组PC12细胞存活率低于10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组(P<0.05);10.0%MSLDP组PC12细胞存活率低于20.0%、30.0%MSLDP组(P<0.05)。20.0%MSLDP组PC12细胞存活率低于30.0%MSLDP组(P<0.05)。显微镜下示0%MSLDP组PC12细胞形态规则,大小均一;2.5%、5.0%MSLDP组PC12细胞数目增多,形态正常;10.0%MSLDP组PC12细胞聚集成片状生长;20.0%、30.0%MSLDP组PC12细胞聚集成片状生长,边缘长出小的棘突,具有分化趋势。0%、2.5%、5.0%MSLDP组VEGF-B蛋白表达水平低于10.0%、20.0%、30.0%MSLDP组(P<0.05);10.0%MSLDP组VEGF-B蛋白表达水平低于20.0%MSLDP组(P<0.05);20.0%MSLDP组VEGF-B蛋白表达水平高于30.0%MSLDP组(P<0.05)。正常对照组、MSLDP干预组PC12细胞存活率高于模型组(P<0.05)。显微镜观察示正常对照组细胞形态规则,大小均一;模型组细胞数量减少,形态不规则,呈凋亡或死亡的萎缩状,有细胞碎片;MSLDP干预组细胞数量明显增多,部分细胞呈拉伸状有棘突。正常对照组VEGF-B蛋白表达水平高于模型组和MSLDP干预组(P<0.05);模型组VEGF-B蛋白表达水平低于MSLDP干预组(P<0.05)。结论 MSLDP可增加Aβ25-35损伤的PC12细胞的活性,并对PC12细胞具有保护作用,其机制可能与其可增加VEGF-B蛋白表达水平有关。

中医院校研究生教育中流式细胞术实验教学的探讨

流式细胞术是利用流式细胞仪对处在快速流动状态中的颗粒进行多参数分析,同时对特定群体加以分选的实验技术。流式细胞术在生物学、临床医学等众多研究领域的应用愈来愈广泛和重要,是基础研究与临床研究的重要方法,也是研究生必须了解和掌握的一种科研技术。本文总结了在中医药院校研究生教育中开展流式细胞术过程中应该注意的问题及解决方法,以利于今后流式教学水平的提高。

适用免疫组化的突触素与嗜铬素A单克隆抗体的制备与临床初步评价

目的:制备突触素与嗜铬素A免疫组化单克隆抗体,期望可初步应用于临床。方法:设计Syn与Cg A融合基因,并构建至表达载体上表达获得融合蛋白。经过抗原免疫、细胞融合后筛选获得目标抗体。通过临床样本对比验证,研究Syn和Cg A两者的特异性,评价相关系数。结果:通过筛选,共获得2株分别针对Syn与Cg A的抗体3D9和4A12。通过对比抗体试剂共同验证19种蜡块组织,统计结果分析,结果符合性较好,相关系数分别达到r=0.989 2与r=0.993 9。结论:该方法成功制备获得了可初步适用于免疫组化的突触素与嗜铬素A抗体,该方法可为免疫学抗体研究提供一定的借鉴意义。

烟酸促进小肠RORγt^(+)Tregs稳态的维持

目的探索烟酸对小肠RORγt^(+)Tregs稳态的影响。方法构建抗生素导致肠道共生菌群失调模型,使用流式细胞术检测小肠固有层(small intestinal lamina propria,SILP)RORγt^(+)Tregs的比例;向含抗生素饮水中添加烟酸,用流式细胞术检测小肠固有层RORγt^(+)Tregs、TH17细胞的比例以及Ki67蛋白的表达情况。结果研究结果显示,抗生素处理会导致小肠肠道固有层RORγt^(+)Treg比例显著降低,添加烟酸能够逆转这种情况,并能够显著促进小肠固有层RORγt^(+)Treg的增殖,而对TH17细胞没有作用。结论烟酸促进RORrt^(+)Treg的增殖可能是肠道菌群维持小肠固有层RORrt^(+)Treg稳态可能的机制之一。

日本新能源汽车的相关政策与未来发展路径选择

近年来,日本对于新能源汽车的投入力度逐渐加大,并制定了诸多发展促进战略。以此为前提,日本中央及地方政府的相关部门制定了一系列财税和非财税政策,形成了市场导向的推广体系和官产学研的研发体系,以推进以电动汽车和燃料电池汽车为代表的新能源汽车的普及、基础设施的建设以及新能源汽车社会的构筑。今后,日本将在整体的能源背景和社会环境下,结合不同的技术路径特点,构建相应的新能源汽车发展路线,相关经验将对我国目前的新能源汽车发展战略具有重要的借鉴意义。