黑曲霉孢子粉粗提物对青枯雷尔式菌的抑菌机制初探

以黑曲霉(Aspergillus niger)孢子粉作为原料,对其粗提物进行分离,以青枯雷尔式菌(Rastonia solanacearum)为指示菌,对抑菌活性进行监测,并利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析其活性成分。通过测定电导率、核酸蛋白泄露、总蛋白以及活性氧(ROS)等指标的变化分析黑曲霉抑菌机制。结果显示,黑曲霉粗提物洗脱液S5对青枯雷尔式菌具有良好的抑菌效果,抑菌率可达90.87%;GC-MS检测结果显示,其主要成分为油酸(26.52%)、亚油酸甲酯(14.46%)、油酸甲酯(11.10%)、棕榈酸(10.50%)、油酸乙酯(7.36%)、亚油酸乙酯(6.88%)等;粗提物主要通过影响细胞膜完整性、损伤细胞结构、抑制细胞蛋白质合成及能量代谢等方面达到抑制菌株Q11-2的效果。

羊肚菌产地调查及安全性评价

本文通过单因子污染指数法、内梅罗综合污染指数法、土壤暴露健康风险评价法对贵州6个羊肚菌种植区土壤Pb、Cd、Cr、Hg、As的污染状况和安全性进行评价。结果表明:通过单因子污染指数法来看,F基地土壤未受到Pb、Cd、Cr、Hg、As重金属元素污染,但其余5个基地均受到不同程度的污染,其主要污染物为Cd。通过内梅罗综合污染指数法可知,C、D基地处于警戒状态,A、E基地处于轻度污染状态,B、F基地处于安全状态。通过土壤暴露健康风险评价法可知,三种暴露途径的非致癌平均日暴露量大小均为:ADD_(经口)>ADD_(皮肤)>ADD_(呼吸),不同元素不同途径的非致癌风险表现均为HQ_(经口)>HQ_(皮肤)>HQ_(呼吸),但HQ值均小于1,说明研究区暂不存在致癌风险。

拮抗菌巨大芽孢杆菌L2发酵条件的响应面优化

为探明拮抗菌巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)L2的发酵条件,提高其抑菌活性,以链格孢菌(Alternaria alternaria)为指示菌,以抑菌圈直径为响应值,优化其发酵条件。在单因素试验的基础上,采用响应面法对发酵条件中各因素进行优化。结果表明:最优发酵条件为牛肉膏4.6 g/L,氯化钠3.0 g/L,初始p H值为7.0,葡萄糖15 g/L,接种量6%,装液量50 m L/250 m L。在此优化条件下,抗菌物质的抑菌圈直径大小从未优化前的(14.55±0.43)mm提高至(34.99±0.14)mm,抑菌圈直径增加了140.48%。

巨大芽孢杆菌L2粗提物的抑菌效果及其抑菌成分分析

对巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)L2粗提物进行初步分离,以青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)为指示菌进行活性追踪,并利用气质联用(GC-MS)法分析其活性成分。结果表明:粗提物洗脱组分LE4-5在质量浓度为1.4mg/mL时对青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)RS-2、根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)T-37及胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)EC-1的抑制率分别为91.04%、59.58%及23.83%;对菌株RS-2和T-37的IC_(50)值分别为(0.512±0.056)mg/mL和(1.215±0.078)mg/mL。GC-MS分析结果发现,粗提物洗脱组分LE4-5的主要成分为亚油酸(23.607%)、亚油酸甲酯(14.444%)、油酸(4.337%)等不饱和脂肪酸。

黑曲霉泡腾片对烟草青枯病防效及烟株生长的影响

以云烟87为试材,研究黑曲霉(Aspergillus niger)泡腾片生防菌剂对烟草农艺性状的影响和对烟草青枯病的防治效果。盆栽试验表明,黑曲霉泡腾片稀释800倍时,对烟草青枯病的防治效果可达92.9%,显著高于稀释1 200倍的多粘类芽孢杆菌(Peanibacillus ploymyxa)(42.9%)的防效(P<0.05)。大田试验表明,黑曲霉泡腾片在提高烟草叶片数、叶长、叶宽、直径、株高等农艺性状方面优于清水对照,表现出良好的促生效果;对采收的烤烟进行送检,结果表明,施用泡腾片的烟叶呈现出良好的评吸效果。

黑曲霉泡腾片制备工艺优化

该研究采用粉末直接压片法制备黑曲霉(Aspergillus niger)泡腾片,以崩解时限、pH值、发泡量为评价指标,通过单因素试验和正交试验对黑曲霉泡腾片的工艺参数进行优化。结果表明,黑曲霉泡腾片的最佳制备工艺为酒石酸和碳酸氢钠比例1.00∶1.25、崩解剂添加量70%、黑曲霉孢子粉添加量15%、质量分数为10%的聚乙二醇6000乙醇溶液为润滑剂,添加量为3.15 g/m L,质量分数为2.5%为聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液为粘合剂,添加量为7 g/m L。在此优化条件下所得的黑曲霉泡腾片表面光滑,黏冲不明显,pH值为5.7,且崩解时限(23 s)、发泡量(40.79 m L/g)、硬度(4.3 kg)均符合2015版《中国药典》的规定,在水中可迅速崩解。

5种菌草越冬性状及营养品质的比较

为贵州省毕节市大面积引种推广菌草种植提供科学依据,通过田间引种和越冬试验,检测与分析巨菌草(Pennisetum sinese)、绿洲1号(Pennisetum Rich)、紫色象草(Pennisetum purpureum Schumab cv. purple)、热研4号王草(Pennisetum×p. americanum cv. Reyan4)、桂闽引象草(Pennisetum purpureum Schum cv. Gui Min Yin)引种菌草的产量、出苗率、养分吸收率及营养品质。结果表明:巨菌草和绿洲1号越冬性状及营养品质较好。越冬后巨菌草和绿洲1号的出苗率均为100%,鲜草产量分别为171.0 t/hm^(2)和167.0 t/hm^(2),干草产量分别为42.00 t/hm^(2)和41.70 t/hm^(2),总氮含量分别达0.41%、0.40%,总磷含量分别为0.39%、0.37%,总钾含量分别为0.79%、0.64%,总氮、总磷、总钾的吸收量整体上高于其他菌草,粗蛋白含量分别为24.2%、29.9%,干物质含量分别为25.4%、23.3%,粗脂肪分别为3.45%、8.95%,粗纤维分别为43.5%、54.6%,木质素分别为11.1%、12.4%,半纤维素分别为40.0%、38.8%。绿洲1号和巨菌草越冬出苗率高、产量高、品质优,建议在毕业市推广种植。

羊肚菌种植区土壤重金属积累特征及生态风险评价

通过地累积综合污染指数法、潜在生态风险指数法和污染负荷指数法揭示羊肚菌不同种植基地土壤Pb、Cd、Cr、Hg、As的污染状况及土壤健康风险程度,从而为羊肚菌种植基地的选择提供科学依据。结果表明,15.38%的A基地土壤Cd含量超过土壤污染风险筛选值,其中最大值超标1.07倍;50%的B基地土壤Cd含量超过土壤污染风险筛选值,其中最大值超标2.5倍;70%的C基地Cd含量超过土壤污染风险筛选值,其中最大值超标2.33倍。利用地质累积指数法发现:A基地的I_(geo)-Pb、I_(geo)-Cd、I_(geo)-Cr、I_(geo)-Hg、I_(geo)-As值均小于0,表明此基地土壤未受到上述重金属污染;但B基地18.18%的I_(geo)-Cd在0~1之间、C基地55.56%采样位点I_(geo)-Cd在0~1之间,存在轻度污染。通过潜在生态危害指数法发现:A、B、C基地均存在轻微生态风险水平。利用污染负荷指数法发现:A、B、C基地土壤均处于无污染水平。三种方法表明,羊肚菌A、B、C种植基地土壤中Pb、Cd、Cr、Hg、As的污染以Cd为主,评价基地土壤污染状况及土壤健康风险需要多种方法结合评价。

黑曲霉xj粗提物的拮抗机制及其抗氧化活性

为探究黑曲霉Aspergillus niger xj菌株粗提物SE对魔芋白绢病病原菌——齐整小核菌Sclerotium rolfsii R-67的拮抗机制及其抗氧化活性,采用菌丝生长速率法,研究了SE对R-67的抑制作用,进而通过测定处理后菌株的电导率、核酸蛋白泄露、三羧酸循环关键酶[琥珀酸脱氢酶(SDH)及苹果酸脱氢酶(MDH)]比活力、胞内活性氧(ROS)水平及核酸含量,对SE的拮抗机制进行了研究,并通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法及2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法测定了其抗氧化活性。通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)方法,从粗提物SE中共检测到12种化合物,其中主要成分为5-羟甲基糠醛(质量分数97.96%)。生物试验结果表明:SE能够抑制R-67菌丝的生长,其IC50值为0.46 mg/mL;SE处理可导致R-67菌液的电导率升高及核酸蛋白含量增加,抑制其三羧酸循环中关键酶SDH与MDH的活力,增加菌体细胞内ROS含量,使细胞核4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色的荧光强度减弱,据此初步推测其作用机制是通过影响R-67菌体细胞膜完整性、损伤细胞结构、抑制三羧酸循环及核酸合成等途径而发挥抑菌作用。研究表明,黑曲霉xj粗提物SE在魔芋白绢病的生物防治中具有良好的应用前景,此外SE对DPPH及ABTS自由基有一定的清除能力,有望应用于抗氧化功能性产品中。

黔芝2号的栽培配方筛选

为菌草替代木屑种植灵芝提供科学参考依据,以黔芝2号为试验菌株,设置8种不同配方梯度的巨菌草替代木屑的培比试验,并通过测定黔芝2号的菌丝长势、农艺性状、多糖含量和三萜类物质含量等指标,筛选适宜种植黔芝2号且高产、稳产、活性物质含量高的栽培配方。结果表明:配方3(巨菌草30%、木屑48%、麸皮20%、石膏1%、蔗糖1%)栽培的黔芝2号菌丝生长浓密,子实体袋均产量为52.08 g,较CK配方(巨菌草0%、木屑78%、麸皮20%、石膏1%、蔗糖1%)高1.8%,多糖含量和总三萜含量分别达9.26 mg/g、2.26 mg/g,较CK配方分别高37.94%、82.3%。使用巨菌草替代30%的木屑对黔芝2号的栽培更加有利。

栽培羊肚菌土壤及其消毒方式比较试验

为探究采用不同土壤栽培羊肚菌效果、土壤消毒剂的消毒效果,试验选用4种土壤(混合草炭土、大田土、腐殖土、贫瘠土),2种土壤消毒剂(生石灰、高效绿霉净)消毒土壤栽培羊肚菌。结果表明:“生石灰+高效绿霉净”处理栽培土能有效抑制羊肚菌菌种被污染,混合草炭土的土质特性非常适宜于羊肚菌菌丝的生长,统计点内的出菇(出菇总数192枚,平均数9.14枚)和厢内鲜菇产量(39.30 kg),为试验栽培土最高,肥沃度最低的贫瘠土统计点内的出菇(出菇总数89枚,平均数4.24枚)和厢内鲜菇产量(17.22 kg),为试验栽培土最低。

食用菌重金属富集研究进展

食用菌是贵州省十二大农业特色产业之一,保障其产品质量安全是产业健康可持续发展的重要支撑。为解决贵州省食用菌重金属污染问题提供参考,助力贵州省食用菌产业更快更好发展,综述国内外有关食用菌重金属富集的机理、来源、危害、防控方法,以及贵州省食用菌产品重金属含量检测的研究。

仿野生栽培冬荪的Hg和As含量测定

仿野生栽培是冬荪规模化人工栽培的主要方式,防控其栽培过程中的重金属污染是保障冬荪产品质量安全的重要方面。为掌握仿野生栽培冬荪的重金属污染情况,以贵阳市白云区冬荪仿野生种植基地的冬荪为试验材料,采用原子荧光法测定冬荪子实体中Hg、As含量,并以国家相关标准限量值为参照,评价其重金属Hg、As的污染程度。结果表明:冬荪子实体对重金属Hg、As具有一定的富集能力,样品中Hg、As含量的平均值分别为0.25 mg/kg、1.15 mg/kg;按照《绿色食品食用菌》(NY/T 749—2018)中Hg含量0.20 mg/kg、As含量1 mg/kg的限量参比值,样品中Hg、As含量略微超出限量值,属于轻度污染。

不同栽培基质和培养周期对蛹虫草菌株QC04主要活性成分含量的影响

本研究以燕麦、大米和小麦为主要栽培基质对蛹虫草菌株QC04进行栽培,比较不同栽培基质和栽培周期对蛹虫草子实体生物量和活性成分的影响,以期为蛹虫草菌株QC04的生产及充分开发利用提供参考。结果表明:栽培时间为35~55 d时,随着栽培时间的延长,子实体干重不断增加且同一时期子实体干重由高到低为小麦培养基>燕麦培养基>大米培养基,燕麦培养基和大米培养基的剩余栽培料干重大于小麦培养基且剩余栽培料干重均大于子实体干重;燕麦和小麦培养基的子实体和栽培剩余物中虫草素和腺苷含量均高于大米培养基;55 d时子实体和栽培剩余物中虫草酸和腺苷含量达到最高;同一时期同一种培养基虫草素在子实体中的含量低于栽培剩余物,腺苷则相反;大米培养基的虫草酸含量普遍高于燕麦和小麦培养基,子实体后期生物量衰退时,子实体虫草酸含量有少量增加且在65 d时大米培养基的子实体虫草酸含量达到最大值,为195.18mg/100g。

5种红托竹荪母种培养基的筛选

红托竹荪已实现人工大规模栽培,但在其栽培过程中菌丝生长速度极慢,制种周期长,且容易老化变红。为寻找适宜其快速生长且菌丝长势良好的培养基配方,对5种不同红托竹荪母种培养基进行筛选。结果表明:配方五(竹叶50 g、马铃薯200 g、葡萄糖20 g、磷酸二氢钾0.3 g、硫酸镁0.15 g、维生素B110 mg、琼脂20 g、水1000 mL)中菌丝长势和生长速度最佳,菌丝生长速率为0.13~0.21 cm/d,菌丝浓密,生长35 d后依然保持洁白。配方五是红托竹荪母种的最佳培养基配方。

羊肚菌新品种‘黔羊肚菌1号’

‘黔羊肚菌1号’是在贵州省黔西市收集的野生羊肚菌菌株中通过人工选育获得的新品种。子囊果兼有单生与丛生。子囊果菌盖为暗红褐色,顶端呈钝圆尖顶,棱纹密度适中,竖棱极明显;菌柄表面光滑,洁白。适宜在贵州省除南部低热河谷以外的地区进行栽培。在黔中地区从播种至采收约80~110 d,鲜菇平均产量达4.955 t·hm^(-2)。